Kaj je metoda Ifa? Kaj je ELISA? Metoda encimskega imunskega testa: bistvo, princip, slabosti

ELISA ali encimski imunski test se nanaša na serološke teste in je namenjen odkrivanju in diagnosticiranju patoloških mikroorganizmov v krvnem serumu.

Skozi analize, različne razredi imunoglobulinov za bakterije: IgM- v akutnem patološkem procesu in IgG v fazi okrevanja, ki v nekaterih primerih traja vse življenje.

Z encimsko imunodiagnostiko se odkrijejo bolezni različnih etiologij:

ELISA je indicirana tudi za diagnosticiranje sifilisa, ko so pozitivni rezultati potrjeni z metodo RT, in vam omogoča spremljanje učinkovitosti zdravljenja v patološkem procesu.

Encimski imunski test je predpisan glede na indikacije (če obstaja sum na okužbo z mikroorganizmi) in je obvezen med nosečnostjo in pred operacijo za odkrivanje prenašanja različnih bakterij.


Postopek analize se izvaja zjutraj na prazen želodec, material (kri) se vzame iz vene. Rezultati diagnostične študije so pripravljeni v 10 dneh.

Pozitivna ELISA

Pozitiven rezultat ELISA je potrjen s prisotnostjo imunoglobulinov razredov IgG in IgM. Ugotovljeni titri v krvi IgM vedno kaže na bolezen v progresivni fazi zdrava oseba teh protiteles nima.

In IgG kaže na predhodno okužbo ali prenašanje patogenih mikroorganizmov, od katerih so nekateri v majhnih količinah v mejah normale. Na primer, bakterije streptokoki in stafilokoki so prisotne v vsakem človeškem telesu.

sifilis

Protitelesa IgM za sifilis se odkrijejo 2 tedna po okužbi in kažejo na prisotnost primarne, sekundarne ali prirojene epizode; z zdravljenjem izginejo po približno šestih mesecih, brez zdravljenja - po 18 mesecih. Če se odkrijeta obe vrsti imunoglobulinov hkrati, je sifilis potrjen v akutni fazi. Pri ljudeh, ki so bili bolni Protitelesa IgG proti sifilisu ostanejo v serumu vse življenje.

Virusni hepatitis

IgM proti virusnemu hepatitisu se pogosto odkrije v inkubacijskem obdobju bolezni, preden se pojavijo prve manifestacije, in vztraja med potekom bolezni; po ozdravitvi se ne odkrije. Izjema je virusni hepatitis C, pri katerem se IgM odkrije tako v aktivni kot v latentni ali kronični fazi

Protitelesa IgG proti hepatitisu A so lahko prisotna tudi pri zdravih ljudeh, kar je posledica predhodne okužbe ali zmanjšane imunosti, vendar prisotnost IgG proti hepatitisu B, C in D pri zdravih ljudeh ni opažena.

CMVI

Okužba s CMV je razširjena skoraj povsod in ne predstavlja nevarnosti za javno zdravje. Vendar pa nosi smrtonosno nevarnost za novorojenčka in plod med intrauterino okužbo.

Odkrivanje protiteles IgM proti citomegalovirusu kaže na primarno okužbo ali aktivacijo latentne faze. Titri IgG pri ljudeh, ki so preboleli bolezen, trajajo 10 let.

Herpes

Protitelesa proti virusu herpesa pri zdravih ljudeh običajno niso prisotna. Vsebnost IgM kaže na akutno fazo bolezni, IgG - latentno fazo (v tem primeru je oseba nosilec okužbe). Če imate IgG proti herpesu, morate vedeti, da se lahko virus kadar koli aktivira od latentne do progresivne stopnje.

Norice

Med noricami in 2 leti po zdravljenju ostanejo v krvi imunoglobulini razreda IgM. Običajno pri zdravih ljudeh protitelesa proti noricam niso odkrita.

Bolezni, ki jih povzročajo stafilokoki in streptokoki

Vsi ljudje imajo imunoglobuline proti stafilokokom in streptokokom. Zato je mogoče diagnosticirati patološki proces, ki ga povzročajo te skupine bakterij, z izvedbo metode dvojnega encimskega imunskega testa. Če med ponovnim testom ELISA (teden dni po prvem) pride do povečanja titrov, se šteje, da je analiza potrjena.

Klamidija

Pozitiven rezultat za klamidijo je indiciran z identifikacijo Titri IgM 1:8 in višji in razred IgG - 1:64 in višje, ki se med potekom bolezni povečujejo in dosegajo visoke vrednosti. Na primer, pri otrocih s klamidijsko pljučnico se titri povečajo na 1:2000 - 1:4000. Prisotnost IgM kaže na aktivnost klamidije; nekaj časa po okužbi se v krvi odkrijejo globulini IgG.

Negativen encimski imunski test je označen z odsotnost protiteles IgM. Zaznavni IgG se v vseh primerih ne štejejo za potrditev diagnostičnega testa; pogosto vztrajajo več let po okužbi, včasih vse življenje.

Po sifilisu, infekcijski mononukleozi IgG imunoglobulini vztrajati vse življenje in se odkrijejo v krvnem serumu. 10 let ostanejo mikroorganizmi CMV, ošpic, rdečk in toksoplazmoze.

Titri amebiaze trajajo od nekaj mesecev do nekaj let. Protitelesa proti bakterijam stafilokokov in streptokokov so odkrita pri vseh ljudeh v majhnih količinah.

V zgornjih primerih nam odkrivanje imunoglobulinov IgG po boleznih omogoča, da rezultate ELISA štejemo za negativne.

Normalno med nosečnostjo

V prvem trimesečju nosečnosti vsaka ženska opravi popoln pregled telesa, ki vključuje encimski imunski test.

Testi na toksoplazmozo, CMV, klamidijo, herpes tipa 2 (genitalni), rdečke, ureaplazmo in mikoplazmo so obvezni, saj te bolezni resno ogrožajo razvoj ploda. Lahko prodrejo v otrokovo telo, mimo placentne pregrade.

In vseskozi predstavljajo posebno nevarnost prvo trimesečje nosečnosti in skoraj vedno vodi do intrauterina smrt ploda in spontani splav.

Problem zgoraj navedenih bolezni je, da se pogosto pojavljajo v asimptomatski fazi, brez vidnih kliničnih manifestacij in jih je mogoče prepoznati le z encimsko imunsko diagnostiko.


Dobre rezultate analize lahko rečemo, če v serumu niso odkriti mikroorganizmi. Zaznavni IgG kažejo na prenašanje virusov in zahtevajo stalno spremljanje ženske, da se zagotovi pravočasno zdravljenje v primeru nenadnega poslabšanja. Pozitivni IgM signalizira progresivni patološki proces in zahteva takojšnjo odstranitev patogena.

Zaznavanje naslova IgG za rdečke kaže na predhodno bolezen in je normalna med nosečnostjo. IgG proti CMV tudi ne predstavljajo posebne nevarnosti za plod, vendar ni mogoče izključiti možnosti poslabšanja (pogostnost manifestacije, približno 1-2%).

Posebno nevarnost predstavlja prisotnost IgG virusu herpesa tipa 2 ali genitalnem (HSV2), saj se tveganje za poslabšanje med porodom znatno poveča. V gestacijskem obdobju se pojavnost akutne faze pojavi v 0,9% primerov. Okužba ploda z virusom herpesa med prehodom genitalnega trakta se pojavi v 40% primerov in povzroči smrt v 50%.

V primerih toksoplazmoze lahko IgM vztraja do 2 leti po zdravljenju. Tveganje okužbe ploda je v tem primeru 17% v prvem trimesečju in se poveča na 60% do tretjega, saj je glavna pot okužbe transplacentalna. Identificiran IgG proti toksoplazmozi mnogi strokovnjaki ocenjujejo rezultat kot negativen rezultat, ki praktično ne ogroža poteka nosečnosti.

ELISA je sodoben laboratorijski test, s katerim v krvi iščemo specifična protitelesa (ali antigene) proti določenim boleznim, da bi ugotovili ne le etiologijo, temveč tudi stadij bolezni.

  1. iskanje specifičnih protiteles proti kateri koli nalezljivi bolezni;
  2. iskanje antigenov katere koli nalezljive bolezni;
  3. študija bolnikovega hormonskega statusa;
  4. pregled prisotnosti avtoimunskih bolezni.

Kot vsaka metoda laboratorijske diagnostike ima tudi ELISA svoje prednosti in slabosti. Prednosti metode vključujejo:

  1. visoka specifičnost in občutljivost metode (več kot 90%);
  2. sposobnost določanja bolezni in sledenja dinamiki procesa, to je primerjava števila protiteles v različnih časovnih obdobjih;
  3. dostopnost in hitrost te raziskave;
  4. neinvazivna metoda zbiranja materiala, ne raziskovanje;

Pomanjkljivost metode je dejstvo, da med analizo ni mogoče identificirati samega povzročitelja bolezni, temveč le imunski odziv nanj (protitelesa).

Bistvo metode ELISA

Obstaja več vrst ELISA: neposredna, posredna, blokirna metoda, konkurenčna. Vendar se v praksi najpogosteje uporablja heterogeni encimski imunski test ali ELISA.

Osnova encimskega imunskega testa je imunska reakcija antigena in protitelesa s tvorbo imunskega kompleksa, kar povzroči spremembo encimske aktivnosti specifičnih oznak na površini protiteles.

V bistvu lahko ta proces razdelimo na več stopenj:

  1. na površini vdolbinic tablete testnega sistema je prečiščen antigen specifičnega patogena. Ko dodamo živalski krvni serum, pride do specifične reakcije med tem antigenom in želenim protitelesom;
  2. Nato se v jamico doda poseben kromogen (konjugat, označen s peroksidazo). Pride do encimske reakcije, ki ima za posledico nastanek obarvane snovi v jamici plošče. Intenzivnost njegove barve je odvisna od količine imunoglobulinov (protiteles), ki jih vsebuje živalski serum;
  3. Nato se oceni rezultat. Z večkanalnim spektrofotometrom primerjamo optično gostoto testnega materiala z optično gostoto kontrolnih vzorcev in rezultate matematično obdelamo. Količina protiteles pri pacientu je neposredno odvisna od višine optične gostote posamezne jamice.

Zapomniti si je treba: za vsak testni sistem so razviti posamezni indikatorji za beleženje rezultatov, indikatorji normalnosti in patologije ("referenčne vrednosti"). To je treba upoštevati pri ocenjevanju rezultatov vsake posamezne študije.

Nepravilno je interpretirati rezultate enega laboratorija na podlagi "referenčnih vrednosti" drugega laboratorija. Nekorektno je tudi primerjati rezultate različnih laboratorijev med seboj.

Pri ocenjevanju rezultatov za specifične okužbe sta pomembna razred odkritih protiteles in njihova količina. Od tega ni odvisno samo vprašanje etiologije okužbe, temveč tudi pričakovana stopnja bolezni (akutna, kronična), pa tudi prisotnost aktivne okužbe (akutna ali poslabšanje kronične) v času pregleda.

Kakšen je okvirni časovni okvir za pojav protiteles?

Najzgodnejša protitelesa so IgM. Zaznamo jih lahko 1-3 tedne po morebitni okužbi, kar je značilno za akutno fazo infekcijskega procesa. Druga situacija za pojav protiteles IgM je poslabšanje kroničnega procesa. IgM krožijo v povprečju približno 3 mesece, nato pa njihova količina postopoma izgine. Vendar pa je pri nekaterih bolnikih mogoče odkriti IgM v sledovih v 1-2 letih po okužbi.

Od 4. tedna po okužbi se začnejo pojavljati protitelesa IgG. Pri večini okužb se njihov titer postopoma poveča z maksimumom v različnih obdobjih (v povprečju po 1,5-2 mesecih), nato titer ostane na nizki ravni in kaže na imunost. Pri nekaterih boleznih ravni IgG niso visoke.

Možnosti odkrivanja protiteles

  • Izolirano odkrivanje protiteles IgM kaže na prisotnost primarne okužbe.
  • Istočasno odkrivanje IgM in IgG v krvi je značilno za primarno okužbo v zadnjih 2-3 mesecih, pa tudi med poslabšanjem kronične bolezni.
  • Odkrivanje izoliranega IgG lahko kaže tako na imunost na bolezen kot na kronično okužbo. V drugi situaciji sta pomembna tako količina protiteles (titer) kot sprememba tega titra skozi čas. Običajno se študije izvajajo v intervalih 2-4-6 tednov.

ELISA ali encimski imunski test je sodoben način za določanje številnih patologij, vključno s tistimi nalezljive narave. Študija se izvaja v laboratorijskih pogojih. Glavni cilj tehnike je odkriti protitelesa, njihova prisotnost kaže na prodiranje patogenih povzročiteljev v telo. Sodobna medicina uporablja analizo ELISA za diagnosticiranje številnih bolezni in prepoznavanje spojin tretjih oseb.

Analiza ELISA: kdaj in kako se izvaja

Z metodo ELISA lahko strokovnjaki zaznajo prisotnost specifičnih protiteles (imunoglobulinov) v krvnem serumu in identificirajo antigene. Imunoglobulini nastajajo kot posledica zapletenih nevronskih procesov, ki jih izvajajo zaščitne funkcije telesa. So naravna reakcija imunskega sistema na prodiranje tujkov. Za vsako vrsto patogenega mikroorganizma se proizvajajo specifična protitelesa.

Pomembno: na podlagi prisotnosti določenih kompleksov nam tehnika encimskega imunskega testa omogoča identifikacijo vrste patogena v človeškem telesu.

Diagnoza z uporabo ELISA se izvaja za odkrivanje naslednjih bolezni:

  • herpes;
  • virusni hepatitis;
  • virus Epstein-Barr (herpes tipa 4);
  • citomegoalovirus.

Krvni test vam omogoča, da ugotovite glavne patogene bakterije, ki izzovejo razvoj sifilisa, ureaplazmoze in trihomonijaze. Z analizo strokovnjaki določijo protitelesa proti 600 vrstam alergenov. Izvajanje encimskega imunskega testa je primerno pri pripravi na presaditev organa.

Pomembno: v nekaterih primerih ELISA deluje kot dodatna metoda za določanje onkologije v človeškem telesu.

Analiza se izvaja izključno v laboratorijskih pogojih. Za študijo se venska kri vzame iz ulnarne vene. Rezultati analize bodo na voljo naslednji dan. Za pridobitev zanesljivih informacij strokovnjaki priporočajo upoštevanje pravil za pripravo na ELISA:

  • en dan pred študijo morate prenehati jesti začinjeno in prekajeno hrano;
  • alkohol je prepovedan;
  • kri se daruje zjutraj na prazen želodec;
  • pred študijo je treba izključiti kakršen koli fizični in čustveni stres;
  • Priporočljivo je opustiti kajenje.

Katere patologije zazna encimski imunski test?

Z metodo encimskega imunskega testa specialist določi različne razrede imunoglobulinov, katerih prisotnost kaže na razvoj patoloških procesov v telesu. Tako sta glavna indikatorja ELISA IgM in IgG. Prisotnost imunoglobulina IgM kaže na razvoj akutnega patološkega procesa. Raven IgG v krvi je značilna za fazo okrevanja.

Z analizo ELISA strokovnjaki identificirajo številne nevarne bolezni. Tej vključujejo:

Pomembno: test ELISA je predpisan za potrditev sifilisa, ko je pozitiven rezultat dajanja krvi v RV.

Pravočasna diagnoza vam omogoča spremljanje učinkovitosti terapije in po potrebi prilagoditev.

Dešifriranje analize: pozitiven in negativen odgovor

Razlago rezultatov ELISA opravi specialist na podlagi pridobljenih podatkov. Odgovor je lahko pozitiven ali negativen.

Pozitivna ELISA

Rezultat se šteje za pozitiven, če so med testom v krvi odkriti imunoglobulini razredov IgG in IgM. Prisotnost predstavljenih komponent kaže na razvoj naslednjih bolezni:

  • sifilis;
  • virusni hepatitis;
  • CMV (citomegalovirus);
  • herpes;
  • norice;
  • bolezni, ki jih povzročajo stafilokoki in streptokoki;
  • klamidija.

Z razvojem sifilisa se v krvi odkrijejo specifična protitelesa 14 dni po okužbi. Na podlagi njihovega števila specialist določi resnost bolezni. Aktivna terapija sifilisa odstrani vse bakterije po 6 mesecih. Če zdravljenja ni, bo trajalo vsaj 1,5 leta, da si telo popolnoma opomore.

Test ELISA zazna virusni hepatitis v inkubacijski dobi, preden se pojavijo prvi simptomi.

CMV je pogosta patologija, ki se pojavi pri vsaki tretji osebi. Ne predstavlja nevarnosti za prebivalstvo; okužba se pojavi v maternici.

Običajno v človeškem telesu ni protiteles proti virusu herpesa. Ko se odkrijejo, je običajno diagnosticirati akutno fazo bolezni.

Z razvojem noric v človeški krvi najdemo specifične imunoglobuline IgM. V telesu lahko ostanejo 2 leti po popolni odpravi patologije.

Bolezni, ki jih povzročajo streptokoki in stafilokoki, je mogoče ugotoviti z dvakratnim testom ELISA. Pri ponovnem pregledu se raven specifičnih protiteles hitro poveča.

Na razvoj klamidije kaže visoka raven imunoglobulina - 1:8 ali več. Indikator se lahko razlikuje glede na napredovanje bolezni.

Pozor: za potrditev razvoja določenega patološkega procesa specialist predpisuje dodatne laboratorijske in instrumentalne študije. Celovita študija vam omogoča, da predpišete učinkovit režim zdravljenja.

Negativna ELISA

Če je rezultat negativen, specifični imunoglobulini razreda IgM v človeški krvi niso odkriti. Možno je, da so protitelesa lahko prisotna v telesu po boleznih bakterijskega in virusnega tipa. V nekaterih primerih njihova prisotnost v krvnem serumu traja desetletja.

Pozor: le izkušen strokovnjak lahko pravilno dešifrira rezultate analize.

Neodvisna študija odgovorov v večini primerov vodi do poskusov postavitve diagnoze in predpisovanja nepravilnega zdravljenja brez sodelovanja zdravnika. Takšna izpostavljenost velja za idealno za nadaljnje napredovanje patološkega procesa.

Encimski imunski test krvi je ena najpomembnejših študij, ki se izvajajo za oceno sposobnosti človeškega telesa, da se upre napadu patogenov. Omogoča vam razumevanje, kako dobro se imunski sistem spopada z nalezljivimi procesi. To pa omogoča prilagoditev režima zdravljenja, če obstaja.

In to niso vse značilnosti tega testa, zato si podrobneje oglejmo vprašanja, kaj je analiza ELISA, komu je indicirana, kako se izvaja in kaj lahko kažejo pridobljeni podatki.

Kakšna raziskava je to

Torej, kaj je analiza ELISA? Ta kratica pomeni "encimski imunski test". Izvaja se, če je potrebno ugotoviti prisotnost protiteles proti različnim antigenom.

Antigeni so patogeni dejavniki, ki prispevajo k razvoju različnih patologij. Protitelesa so snovi, ki so potrebne za uničenje tujih celic.

Imunski test krvi je namenjen določanju ravni imunoglobulinov, ki jih je mogoče združiti v imunokomplekse. Aktivno jih proizvaja imunski sistem kot odgovor na vnos antigenov v telo.

Opomba. Za boj proti vsaki posamezni vrsti antigena se proizvajajo lastna specifična protitelesa. To je tisto, kar pomaga prepoznati bolezen in celo njeno stopnjo z uporabo encimskega imunskega testa krvi.

Ko tuj antigen vstopi v človeško telo, se protitelesa "vežejo" nanj in nato nevtralizirajo njegov učinek. To se zgodi zaradi reakcij encimske lize in fagocitoze. Zahvaljujoč temu procesu se antigeni odstranijo iz krvi.

Kdaj je predviden test?

Ko smo razumeli, kaj je encimski imunski test, bomo razumeli situacije, v katerih je indiciran. Torej je raziskava potrebna, kadar:

  • onkološke bolezni;
  • virusni hepatitis;
  • herpetični izpuščaji na koži ali sluznicah;
  • salmoneloza;
  • ošpice;
  • encefalitis;
  • sifilis;
  • dizenterija;
  • atopični dermatitis ali atipične manifestacije alergijskih reakcij.

Poleg tega se metoda ELISA uporablja za identifikacijo in identifikacijo patogenov:

  • spolno prenosljive bolezni;
  • okužba s citomegalovirusom;
  • helmintoze.

Encimski imunski test je študija, ki pomaga določiti naravo endokrinih bolezni, pa tudi ugotoviti prisotnost imunske pomanjkljivosti in neplodnosti pri moških in ženskah. Z njegovo pomočjo se naredijo napovedi za nadaljnji potek srčnih infarktov, kapi, nevroloških in ledvičnih bolezni.

Analiza ELISA se izvaja tudi v preventivne namene. Obvezno ga je izvajati med nosečnostjo, pa tudi za bolnike, ki so že imeli zgoraj opisane bolezni. Osebe s tveganjem za razvoj prej omenjenih bolezni tudi redno darujejo kri za ELISA.

Značilnosti testa in dekodiranja

V večini primerov se bolniku vzame kri za encimski imunski test. Toda v določenih okoliščinah je mogoče tkivo zbrati s površine steklastega telesa. Pri nosečnicah se lahko diagnoza ELISA izvede s preučevanjem sestave amnijske tekočine.

Vzorčenje krvi se izvaja z brizgo, material za raziskavo pa se praviloma vzame iz vene, ki se nahaja na notranji strani komolca. Pacient mora biti v sproščenem stanju, v sedečem položaju.

Pomembno! Rezultati testa, njegova interpretacija in dekodiranje podatkov so odvisni od metode diagnostične manipulacije in uporabljene opreme. Praviloma vsak laboratorij na obrazcu navede normo ravni imunoglobulina.

Značilnosti priprave

Krvni test za ELISA zahteva določene pripravljalne postopke:

  • preskakovanje zajtrka na dan testa;
  • prenehanje jemanja zdravil za redčenje krvi in ​​drugih farmakoloških učinkovin, ki lahko vplivajo na rezultate (po predhodnem posvetu z zdravnikom);
  • opustitev kajenja na dan študije;
  • izogibajte se pitju alkohola dan pred odvzemom krvi;
  • izključitev uporabe narkotičnih snovi (vključno z zdravili, ki jih vsebujejo).

Skladnost s temi pravili za pripravo na imunokemični krvni test odpravlja možnost izkrivljanja podatkov.

Interpretacija podatkov

Rezultati študije so dani bolniku, po katerem se opravi drugo posvetovanje s specialistom. Dekodiranje podatkov ELISA je lahko pozitivno ali negativno. V tem primeru se upoštevajo tudi številke, ki označujejo (če so bile najdene).

Če je ELISA negativen, lahko to kaže na odsotnost patoloških procesov ali začetno fazo njihovega razvoja. Tudi "minus" rezultat študije opazimo, ko si bolnik po končanem zdravljenju opomore. Toda takšne podatke je mogoče pridobiti šele po določenem času (1 - 2 meseca).

Če v krvi ni IgM in test IF pokaže pozitiven rezultat za , lahko to pomeni, da je bolnik razvil močno imunost na določeno vrsto antigena. To se zgodi pri imunizaciji.

Pri visoki koncentraciji IgM v odsotnosti IgG in IgA lahko govorimo o vnetnem procesu, ki se pojavi v akutni fazi.

Kaj pomeni, če je test ELISA pozitiven na vse vrste imunoglobulinov? V takih primerih lahko govorimo o ponovitvi nalezljive patologije. V tem primeru se pojav protiteles zabeleži le v akutni fazi kronične bolezni.

Ko bolezen preide v fazo atenuacije, bodo rezultati negativni. Toda ELISA za IgG in IgA bo pozitiven.

Prednosti in slabosti testa

Krvni test z ELISA ima svoje prednosti in slabosti. Prednosti vključujejo:

  • relativno nizki stroški;
  • natančnost;
  • možnost rednega testiranja za oceno učinkovitosti zdravljenja;
  • hitrost izvedbe;
  • uporaba visoko natančnih in visoko informativnih tehnologij za pridobitev zanesljivih rezultatov;
  • možnost izvajanja več študij na območju istega žarišča patološkega procesa;
  • absolutna nebolečnost;
  • odsotnost kakršnega koli tveganja za zdravje pacienta;
  • relativna enostavnost raziskovanja.

Krvni test ELISA je zaradi zgoraj opisanih prednosti postal zelo razširjen in ima pomembno vlogo pri diagnosticiranju različnih bolezni.

Napake

Pomembna pomanjkljivost ELISA krvi je verjetnost pridobitve lažno pozitivnih ali lažno negativnih rezultatov. Toda v večini primerov to ni posledica same raziskovalne metode, temveč človeškega dejavnika.

Še en odtenek, ki lahko vpliva na končne podatke, so zdravila, uporabljena med testom. Če se uporabljajo nepravilno ali če so pokvarjeni, bo interpretacija testov ELISA nezanesljiva. Zato bo treba študijo ponoviti.

Pomembno! Motnje presnovnih procesov v pacientovem telesu lahko vplivajo na podatke testa. Poleg tega lahko prisotnost več žarišč nalezljivih (kroničnih!) Bolezni hkrati vpliva na rezultate.

Krvni test z ELISA se izvaja za identifikacijo:

  • ascariasis;
  • opisthorchiasis - akutna ali kronična;
  • giardiaza;
  • toksoplazmoza.

Tudi med študijo se lahko v bolnikovem telesu odkrijejo pinwormi ali amebe. Diagnoza "leishmaniasis" in "trichinosis" se pogosto postavlja bolnikom tudi na podlagi podatkov krvnega testa ELISA.

Naj povzamemo

Seveda je zelo težko sam razumeti testne podatke, saj je treba pri tem procesu upoštevati številne dejavnike. Slabe navade, prisotnost sočasnih bolezni, uporaba določenih skupin zdravil - vse to igra pomembno vlogo in lahko vpliva na rezultate, kar zdravniki upoštevajo pri interpretaciji rezultatov ELISA.

Vendar pa "zavesten pomeni, da je oborožen", zato je pomembno, da vsaka oseba pozna posebnosti izvajanja in razlage podatkov tistih laboratorijskih testov, ki mu jih predpiše lečeči zdravnik. In metoda ELISA ni izjema!

Seznam razpoložljivih diagnostičnih metod se v zadnjih desetletjih hitro širi, diagnostiki poskušajo združiti prednosti vseh dosedanjih testov v novih metodah in se znebiti vseh njihovih prejšnjih pomanjkljivosti.

V zadnjem času je na seznamu diagnostičnih postopkov vse pogosteje encimski imunski test - sodoben in dokaj nov test, ki je povprečnemu človeku, ki se ne ukvarja z medicino, malo poznan. Kljub temu ta tehnika hitro pridobiva število svojih privržencev med usposobljenim medicinskim osebjem. Lahko poskusite ugotoviti, kaj je in v katerih primerih ga je treba uporabiti, tako da se seznanite z njegovimi značilnostmi in glavnimi lastnostmi.

Encimski imunski test je instrumentalna laboratorijska tehnika, ki temelji na molekularni reakciji "antigen-protitelo", ki omogoča odkrivanje specifičnih beljakovin v bioloških materialih (vzorcih za raziskave). Takšni proteini so lahko encimi, različni mikroorganizmi (virusi, bakterije, glive), praživali itd.

Po odkritju metode se je ta poimenovala ELISA test, ki nima nobene zveze z imenom odkriteljev, ampak je okrajšava polnega imena v angleščini – enzyme-linked immunosorbent assay. To ime uporabljajo zdravniki po vsem svetu, nekateri zdravniki v rusko govorečih državah tako imenujejo tovrstne raziskave.

Glavni princip metode je molekularna reakcija "antigen-protitelo".

Antigen je vsaka tuja molekula, ki pride v človeško telo kot del mikroba, ki povzroča bolezen. Antigeni so običajno beljakovinske molekule. Poleg mikroorganizmov so lahko takšen "tujek" tuje krvne celice, ki se ne ujemajo s skupino ali Rh faktorjem.

Kot odgovor na vstop takšnega antigena v telo se sproži imunska reakcija, katere cilj je zaščititi pred morebitnimi tujimi molekulami. To se zgodi zaradi sinteze posebnih agentov imunskega sistema - protiteles (imunoglobulinov). Vsako protitelo je primerno le za določen antigen in nevtralizira patogenega "tujka" tako, da se nanj veže v en sam kompleks. To je proces takšne vezave, ki se imenuje reakcija "antigen-protitelo".

Vrste protiteles

Vsa protitelesa (imunoglobulini) so razdeljena na 5 vrst, odvisno od tega, na kateri stopnji imunskega odziva se pojavijo:

Za ELISA diagnostiko so največkrat pomembne ravni imunoglobulinov IgG, IgM in IgA. Po njihovih titrih lahko ugotovite, ali je oseba že imela bolezen ali se je pred kratkim okužila, ali je razvila imuniteto ali je njegovo telo brez obrambe pred patologijo.

Prednosti in slabosti encimskega imunskega testa

Trenutno je ELISA ena najbolj natančnih in občutljivih metod. Sprejeli so ga strokovnjaki z različnih področij medicine in še naprej širi področje uporabe.

Prednosti metode

  • Visoka natančnost pridobljenih podatkov.
  • Občutljivost (omogoča zaznavanje zahtevane snovi tudi z minimalno prisotnostjo patogena v vzorcu).
  • Možnost diagnoze v prvih dneh bolezni ali v inkubacijski dobi.
  • Hitrost pridobivanja podatkov v primerjavi z drugimi metodami podobne natančnosti.
  • Visoka avtomatizacija procesa in minimalno sodelovanje ljudi, kar zmanjša napako izvajalca.
  • Pridobivanje podatkov o stopnji patološkega procesa in učinkovitosti izbrane terapije.
  • Neboleč in minimalno invaziven pri zbiranju materiala.

Slabosti metode

  • V večini primerov vam omogoča, da določite odziv telesa na patogena in ne samega patogena.
  • Pred preiskavo je treba natančno poznati sum bolezni, saj je preiskava zelo specifična.
  • Verjetnost lažnih kazalcev, ki jih povzročajo tehnične težave, jemanje zdravil, hkratna prisotnost več kroničnih bolezni ali presnovnih motenj v bolnikovem telesu.
  • Interpretacijo rezultatov naj opravi le visoko usposobljen specialist, saj je za interpretacijo dobljenih podatkov potrebna posebna izobrazba in veliko medicinsko znanje na določenem področju.
  • ELISA je dokaj redek test, zato se ne izvaja v vseh diagnostičnih laboratorijih.
  • Metoda je precej draga, saj mora imeti laboratorij poleg reagentov še veliko drago opremo in vzorce antigenov, proizvedenih v posebnih inštitutih.

V katerih primerih se uporablja encimski imunski test?

Celoten seznam indikacij za encimski imunski test je zelo širok in vključuje skoraj vse veje medicine.

Najpogosteje se ELISA uporablja za naslednje namene:

  • odkrivanje nalezljivih bolezni;
  • diagnoza spolno prenosljivih bolezni;
  • ugotavljanje imunskega stanja ali posameznih avtoimunskih bolezni;
  • določitev tumorskih markerjev;
  • določitev hormonov.

V primeru nalezljivih in virusnih bolezni nam tehnika omogoča prepoznavanje naslednjih patologij:

Poleg tega vam ELISA omogoča hitro in učinkovito določanje stanja infarkta, oceno reproduktivnega potenciala telesa, prepoznavanje alergij, njihov vir itd.

Imunoencimska tehnika se uporablja za izvajanje kliničnih študij pri razvoju novih zdravil in pri ocenjevanju njihovega učinka na človeško telo.

Vrste vzorcev in metode njihovega izbora za raziskave

Najpogosteje je testni material za encimski imunski test kri, ki se vzame iz pacientove antekubitalne vene. Odvzem vzorcev se izvaja na prazen želodec, večinoma zjutraj. Po vzorčenju se tiste nastale celice, ki motijo ​​raziskavo, ločijo in odstranijo iz krvi, ostane le serum.

Pri diagnosticiranju genitourinarnih okužb material pogosto postanejo brisi iz sluznice spolnih organov, sluz iz sečnice ali materničnega vratu, vzorci iz danke, ostružki iz erozij ali razjed v predelu dimelj in iz drugih delov telesa. Brise lahko vzamemo iz ustne votline, pa tudi iz nazofarinksa.

Včasih se v porodniški in ginekološki praksi med nosečnostjo uporablja encimski imunski test za določanje stanja amnijske tekočine. V tem primeru vzorec postane amnijska tekočina. Če želite to narediti, vzemite majhno količino tekočine tako, da prebodite amnijsko vrečko z dolgo iglo. Vse manipulacije se izvajajo s sterilnimi instrumenti, da se zmanjšajo možna tveganja.

Pogosto material postane cerebrospinalna ali serozna tekočina. To se zgodi z lokalno anestezijo, ki se daje z injekcijo.

Specialist, ki pošlje študijo, mora pojasniti, kakšne vrste materialov so potrebne za encimski imunski test. Pogosto se vzamejo vzorci več vrst ali iz različnih krajev hkrati. Zdravnik, ki izda napotnico za tovrstno preiskavo, mora bolnika seznaniti tudi s pripravami na darovanje biomateriala.

Priprava na encimski imunski test

Za povečanje točnosti podatkov, pridobljenih po encimskem imunskem testu, mora biti priprava za izbiro materiala naslednja:

  • 10 dni pred študijo izključite antibiotike, protivirusna in antimikotična zdravila;
  • za en dan je treba izključiti alkohol, kajenje in uživanje narkotičnih snovi;
  • v istem obdobju se je treba izogibati fizični prenapetosti;
  • Opozoriti zdravnika, ki je predpisal zdravilo, o vseh zdravilih, ki jih bolnik jemlje;
  • Obvestite svojega zdravnika, če ste noseči ali sumite, da ste noseči.

Najbolje je, če se materiali za testiranje zbirajo zjutraj na prazen želodec.

Če je cilj diagnoze določiti stanje hormonov, je pomembno zagotoviti, da ste dan prej v mirnem stanju in se izogibate živčni napetosti. Pri ženskah je darovanje krvi za hormone jasno določeno z obdobjem mesečnega ciklusa, o katerem bo zdravnik razpravljal ob imenovanju.

2-3 dni pred vzorčenjem morate iz menija izključiti ocvrto in mastno hrano, pred testiranjem na hepatitis pa ne jejte citrusov ali katerega koli drugega oranžnega ali rumenega sadja in zelenjave.

Interpretacija rezultatov encimskega imunskega testa

Rezultat kvalitativne študije je običajno označen z znaki "+" (zaznano) ali "-" (ni najdeno).

Na podlagi prisotnosti ali odsotnosti določenih skupin imunoglobulinov lahko sklepamo naslednje:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imunost na bolezen je popolnoma odsotna (telo se prej ni srečalo s to vrsto antigena);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - prišlo je do prejšnjega trka s tem antigenom ali cepivom;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akutni patološki proces (najverjetneje primarni);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - kronični proces;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - ponovitev;
  • JgM (-) - stopnja okrevanja.

Kvantitativne vrednosti nosijo veliko informacijsko obremenitev, vendar jih lahko razlaga le lečeči zdravnik na podlagi prejšnjih indikacij, starosti bolnika in norm za vsako posamezno bolezen. Zaradi tega ne morete sami oceniti rezultatov.

Kako dolgo morate čakati na rezultate?

Ta tehnika ima veliko vrst, odvisno od tega je določeno obdobje za pridobitev podatkov v roki. Povprečno trajanje diagnostike ELISA je 4-6 ur, kar vam omogoča, da dobite rezultate že naslednji dan.

Najdaljše metode trajajo do 10 dni, na primer pri okužbi s HIV.

V nujnih primerih je možno uporabiti hitre metode, pri katerih se odgovor dobi v 1-2 urah.

Kje lahko dobim test ELISA?

Ker je oprema za tovrstno diagnostiko precej draga, je ne morejo kupiti vsi laboratoriji. Poleg tega imajo testi, ki vsebujejo specifične antigene, omejen rok trajanja (običajno približno 1 leto) in zato zahtevajo stalno posodabljanje.

Zaradi teh razlogov javne zdravstvene ustanove nimajo vedno laboratorijev za ELISA. Najpogosteje se je treba obrniti na velike zasebne medicinske ali velike diagnostične centre.

Za izvajanje testa ELISA mora imeti laboratorij posebno licenco, osebje in laboranti pa morajo opraviti posebno izobraževanje.

Najpogosteje določen diagnostični center ali laboratorij priporoči zdravnik, ki bolnika napoti na pregled.

Stroški encimskega imunskega testa

Cena te študije je odvisna od regije v državi in ​​od ravni klinike, ki nudi storitev. V Moskvi se najnižja cena za določanje enega antigena začne od 700 rubljev. Če je treba identificirati več imunoglobulinov hkrati, se cena sešteje.

V primeru nujne analize se stroški povečajo za 150-200 rubljev. za vsak antigen.

Kljub precej visokim stroškom encimski imunski test omogoča čim bolj informativen in hiter pregled bolnika, kar skrajša čas pred začetkom zdravljenja in omogoča hitrejšo stabilizacijo stanja osebe.

Ta video predstavlja film "Osnove encimskega imunskega testa".