Diagnose von AIDS durch Immunoblot für HIV. Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Immunblot-Mechanismus praktische Anwendung

Immunblotting (Immunoblot, Western Blot, Western Blot)- kombiniert den enzymgebundenen Immunadsorptionstest (ELISA) mit der vorläufigen elektrophoretischen Übertragung von Virusantigenen auf einen Nitrozellulosestreifen (Streifen).

In diesem schönen wissenschaftlichen Namen wird „Blot“ höchstwahrscheinlich mit „Fleck“ übersetzt, und „westlich“ als „westlich“ spiegelt die Verteilungsrichtung dieses „Flecks“ auf dem Papier von links nach rechts wider, dh auf einer geografischen Karte. dies entspricht der Richtung von West nach Ost.“ Das Wesen des "Immunblot"-Verfahrens besteht darin, dass die immunenzymatische Reaktion nicht mit einer Mischung von Antigenen, sondern mit HIV-Antigenen durchgeführt wird, die zuvor durch Immunophorese in Fraktionen verteilt wurden, die sich entsprechend dem Molekulargewicht auf der Oberfläche einer Nitrozellulosemembran befinden. Infolgedessen werden die Hauptproteine ​​von HIV, Träger von antigenen Determinanten, in Form von separaten Banden, die während des Enzymimmunoassays erscheinen, über die Oberfläche verteilt.

Der Immunoblot umfasst mehrere Phasen:

Streifenvorbereitung. Das Immundefizienzvirus (HIV), das zuvor gereinigt und in seine Bestandteile zerstört wurde, wird einer Elektrophorese unterzogen, während die Antigene, aus denen HIV besteht, nach Molekulargewicht getrennt werden. Dann werden die Antigene durch Abtupfen (analog zum Ausdrücken überschüssiger Tinte auf einem "Löschpapier") auf einen Nitrozellulosestreifen übertragen, der nun ein für das Auge unsichtbares Spektrum antigenischer Banden enthält, die für HIV charakteristisch sind.

Beispielstudie. Auf den Nitrozellulosestreifen wird das Untersuchungsmaterial (Serum, Blutplasma des Patienten etc.) aufgetragen, und falls spezifische Antikörper in der Probe vorhanden sind, binden diese an die genau korrespondierenden (komplementären) antigenen Banden. Durch nachträgliche Manipulationen wird das Ergebnis dieser Interaktion visualisiert – sichtbar gemacht.

Interpretation des Ergebnisses. Das Vorhandensein von Banden in bestimmten Bereichen der Nitrozelluloseplatte bestätigt das Vorhandensein von Antikörpern gegen streng definierte HIV-Antigene im untersuchten Serum.

Spur A – Positive Kontrolle

Bahn B – schwache positive Kontrolle

Bahn C - Negativkontrolle

Streifen D – Positive Probe (Antikörper gegen HIV-1 nachgewiesen)

Derzeit ist der Immunblot (Immunoblot) die Hauptmethode, um das Vorhandensein virusspezifischer Antikörper im Testserum zu bestätigen. In einigen Fällen einer HIV-Infektion werden spezifische Antikörper vor der Serokonversion durch Immunoblotting effektiver nachgewiesen als durch ELISA. Eine Immunblotting-Studie ergab, dass Antikörper gegen gp 41 am häufigsten in den Seren von AIDS-Patienten nachgewiesen werden, und der Nachweis von p24 bei Personen, die zu prophylaktischen Zwecken untersucht wurden, erfordert zusätzliche Untersuchungen auf das Vorhandensein einer HIV-Infektion. Immunoblot-Testsysteme, die auf gentechnisch hergestellten rekombinanten Proteinen basieren, erwiesen sich als spezifischer als herkömmliche Systeme, die auf gereinigtem Viruslysat basieren. Bei Verwendung eines rekombinanten Antigens entsteht keine diffuse, sondern eine klar definierte schmale Antigenbande, die für die Abrechnung und Auswertung gut zugänglich ist.

Serum von Personen, die mit HIV-1 infiziert sind, weist Antikörper gegen die folgenden Hauptproteine ​​und Glykoproteine ​​nach – strukturelle Hüllproteine ​​(env) – gp160, gp120, gp41; Kerne (gag) - p17, p24, p55 sowie Virusenzyme (pol) - p31, p51, p66. Für HIV-2 sind Antikörper gegen env typisch – gp140, gp105, gp36; Knebel - S. 16, S. 25, S. 56; pol-p68.

Unter den Labormethoden, die zum Nachweis der Spezifität der Reaktion erforderlich sind, hat der Nachweis von Antikörpern gegen HIV-1-Hüllproteine ​​- gp41, gp120, gp160 und HIV-2 - gp36, gp105, gp140 die größte Anerkennung.

Die WHO betrachtet Seren als positiv, wenn Antikörper gegen zwei beliebige HIV-Glykoproteine ​​durch Immunoblotting nachgewiesen werden. Kommt es nach diesen Empfehlungen zu einer Reaktion mit nur einem der Hüllproteine ​​(rp 160, rp 120, rp 41) in Kombination oder ohne Reaktion mit anderen Proteinen, gilt das Ergebnis als zweifelhaft und ein zweiter Test mit einem Kit wird empfohlen aus einer anderen Serie oder von einer anderen Firma. Bleibt das Ergebnis danach zweifelhaft, wird eine Beobachtung über 6 Monate empfohlen (Recherche nach 3 Monaten).

Das Vorhandensein einer positiven Reaktion mit dem p24-Antigen kann auf eine Phase der Serokonversion hinweisen, da Antikörper gegen dieses Protein manchmal zuerst auftreten. In diesem Fall empfiehlt es sich, je nach klinischer und epidemiologischer Datenlage, die Studie mit einer mindestens 2 Wochen später entnommenen Serumprobe zu wiederholen, und zwar genau dann, wenn bei einer HIV-Infektion gepaarte Seren notwendig sind.

Positive Reaktionen mit gag- und pol-Proteinen ohne Vorhandensein einer Reaktion mit env-Proteinen können das Stadium einer frühen Serokonversion widerspiegeln und können auch auf eine HIV-2-Infektion oder eine unspezifische Reaktion hinweisen. Personen mit solchen Ergebnissen nach einem HIV-2-Test werden nach 3 Monaten (innerhalb von 6 Monaten) erneut untersucht.

Die rechtzeitige Diagnose einer HIV-Infektion wird zu einer äußerst wichtigen Maßnahme, da eine frühere Behandlung den weiteren Verlauf der Krankheit maßgeblich bestimmen und das Leben des Patienten verlängern kann. Auf dem Gebiet der Erkennung dieser schrecklichen Krankheit hat es in den letzten Jahren erhebliche Fortschritte gegeben: Die alten Testsysteme werden durch fortschrittlichere ersetzt, die Untersuchungsmethoden werden zugänglicher und ihre Genauigkeit wird deutlich erhöht.

In diesem Artikel werden wir über moderne Methoden zur Diagnose einer HIV-Infektion sprechen, die für die rechtzeitige Behandlung dieses Problems und die Aufrechterhaltung der normalen Lebensqualität des Patienten nützlich sind.

Methoden zur Diagnose von HIV

In Russland wird zur Diagnose einer HIV-Infektion ein Standardverfahren durchgeführt, das zwei Ebenen umfasst:

• ELISA-Testsystem (Screening-Analyse);
• Immunblotting (IB).

Andere diagnostische Methoden können ebenfalls verwendet werden:

• Express-Tests.

ELISA-Testsysteme

In der ersten Phase der Diagnose wird ein Screening-Test (ELISA) zum Nachweis einer HIV-Infektion verwendet, der auf in Labors hergestellten HIV-Proteinen basiert, die spezifische Antikörper erfassen, die im Körper als Reaktion auf eine Infektion produziert werden. Nach ihrer Wechselwirkung mit den Reagenzien (Enzymen) des Testsystems ändert sich die Farbe des Indikators. Darüber hinaus werden diese Farbänderungen auf speziellen Geräten verarbeitet, die das Ergebnis der durchgeführten Analyse bestimmen.

Solche ELISA-Tests können innerhalb weniger Wochen nach Einschleppung der HIV-Infektion Ergebnisse zeigen. Diese Analyse bestimmt nicht das Vorhandensein des Virus, sondern weist die Produktion von Antikörpern dagegen nach. Manchmal beginnt die Produktion von Antikörpern gegen HIV im menschlichen Körper nach 2 Wochen nach der Infektion, aber bei den meisten Menschen werden sie zu einem späteren Zeitpunkt nach 3-6 Wochen produziert.

Es gibt vier Generationen von ELISA-Tests mit unterschiedlichen Sensitivitäten. In den letzten Jahren wurden vermehrt Testsysteme der III. und IV. Generation eingesetzt, die auf synthetischen Peptiden oder rekombinanten Proteinen basieren und eine höhere Spezifität und Genauigkeit aufweisen. Sie können verwendet werden, um eine HIV-Infektion zu diagnostizieren, die HIV-Prävalenz zu überwachen und die Sicherheit beim Testen von Spenderblut zu gewährleisten. Die Genauigkeit der ELISA-Testsysteme der III. und IV. Generation beträgt 93-99 % (empfindlicher sind die Tests, die in Westeuropa hergestellt werden - 99 %).

Zur Durchführung eines ELISA-Tests werden dem Patienten 5 ml Blut aus der Vene entnommen. Zwischen der letzten Mahlzeit und der Analyse sollten mindestens 8 Stunden liegen (in der Regel wird sie morgens auf nüchternen Magen durchgeführt). Es wird empfohlen, einen solchen Test frühestens 3 Wochen nach der angeblichen Infektion (z. B. nach ungeschütztem Geschlechtsverkehr mit einem neuen Sexualpartner) durchzuführen.

Die Ergebnisse des ELISA-Tests werden nach 2-10 Tagen erhalten:

• negatives Ergebnis: zeigt das Fehlen einer HIV-Infektion an und erfordert keine Überweisung an einen Spezialisten;
• falsch negatives Ergebnis: kann in den frühen Stadien der Infektion (bis zu 3 Wochen), in den späteren Stadien von AIDS mit schwerer Immunsuppression und bei unsachgemäßer Blutvorbereitung beobachtet werden;
• falsch positives Ergebnis: Es kann bei einigen Krankheiten und bei unsachgemäßer Blutvorbereitung beobachtet werden;
• positives Ergebnis: zeigt eine Infektion mit einer HIV-Infektion an, erfordert eine IB und die Überweisung des Patienten an einen Spezialisten in einem AIDS-Zentrum.

Warum kann ein ELISA-Test falsch positive Ergebnisse liefern?

Falsch positive Ergebnisse eines ELISA-Tests für HIV können bei unsachgemäßer Blutverarbeitung oder bei Patienten mit solchen Zuständen und Krankheiten beobachtet werden:

• Multiples Myelom;
• durch das Epstein-Barr-Virus hervorgerufene Infektionskrankheiten;
• Zustand nach ;
• Autoimmunerkrankungen;
• vor dem Hintergrund der Schwangerschaft;
• Zustand nach der Impfung.

Aus den oben beschriebenen Gründen können unspezifische kreuzreagierende Antikörper im Blut vorhanden sein, deren Bildung nicht durch eine HIV-Infektion hervorgerufen wurde.

In den letzten Jahren ist die Häufigkeit falsch positiver Ergebnisse durch die Verwendung von Testsystemen der III. und IV. Generation, die empfindlichere Peptide und rekombinante Proteine ​​enthalten (sie werden mit In-vitro-Gentechnik synthetisiert), deutlich zurückgegangen. Nach der Verwendung solcher ELISA-Tests hat die Häufigkeit falsch positiver Ergebnisse deutlich abgenommen und liegt bei etwa 0,02–0,5 %.

Ein falsch positives Ergebnis bedeutet nicht, dass eine Person mit HIV infiziert ist. In solchen Fällen empfiehlt die WHO einen weiteren ELISA-Test (obligatorische IV-Generation).

Das Blut des Patienten wird an ein Referenz- oder Schiedslabor mit der Kennzeichnung „Wiederholen“ geschickt und auf einem ELISA-Testsystem der IV-Generation getestet. Ist das Ergebnis der erneuten Analyse negativ, wird das erste Ergebnis als fehlerhaft (falsch positiv) erkannt und IB nicht durchgeführt. Wenn das Ergebnis beim zweiten Test positiv oder zweifelhaft ist, muss sich der Patient innerhalb von 4-6 Wochen einer IB unterziehen, um die HIV-Infektion zu bestätigen oder zu widerlegen.

Immun-Blotting

Eine definitive Diagnose einer HIV-Infektion kann nur gestellt werden, nachdem ein positives Immunblotting (IB)-Ergebnis erhalten wurde. Für die Durchführung wird ein Nitrozellulosestreifen verwendet, auf den virale Proteine ​​​​aufgetragen werden.

Die Blutentnahme für IB wird aus einer Vene durchgeführt. Dann wird es einer speziellen Behandlung unterzogen und die in seinem Serum enthaltenen Proteine ​​werden in einem speziellen Gel nach ihrer Ladung und ihrem Molekulargewicht getrennt (die Manipulation wird auf speziellen Geräten unter dem Einfluss eines elektrischen Feldes durchgeführt). Auf das Blutserumgel wird ein Nitrozellulosestreifen aufgetragen und in einer speziellen Kammer geblottet („Blotting“). Der Streifen wird verarbeitet und wenn die verwendeten Materialien Antikörper gegen HIV enthalten, binden sie an die antigenen Banden auf IB und erscheinen als Linien.

IB gilt als positiv, wenn:

• nach amerikanischen CDC-Kriterien - es gibt zwei oder drei Linien gp41, p24, gp120 / gp160 auf dem Streifen;
• nach amerikanischen FDA-Kriterien - es gibt zwei Linien p24, p31 und eine Linie gp41 oder gp120 / gp160 auf dem Streifen.

In 99,9 % der Fälle weist ein positives IB-Ergebnis auf eine HIV-Infektion hin.

In Abwesenheit von Linien - IB ist negativ.

Bei der Identifizierung von Linien mit gp160, gp120 und gp41 ist IB zweifelhaft. Ein solches Ergebnis kann festgestellt werden, wenn:

• onkologische Erkrankungen;
• Schwangerschaft;
• häufige Bluttransfusionen.

In solchen Fällen wird empfohlen, eine zweite Studie mit einem Kit eines anderen Unternehmens durchzuführen. Bleibt nach zusätzlicher IB das Ergebnis zweifelhaft, ist eine Nachsorge von sechs Monaten erforderlich (IB wird alle 3 Monate durchgeführt).

Polymerase Kettenreaktion

Der PCR-Test kann die RNA des Virus nachweisen. Seine Empfindlichkeit ist ziemlich hoch und ermöglicht den Nachweis einer HIV-Infektion bereits 10 Tage nach der Infektion. In einigen Fällen kann die PCR zu falsch positiven Ergebnissen führen, da sie aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit auch auf Antikörper anderer Infektionen reagieren kann.

Diese Diagnosetechnik ist teuer, erfordert spezielle Geräte und hochqualifizierte Spezialisten. Diese Gründe lassen es nicht zu, dass es während einer Massentestung der Bevölkerung durchgeführt wird.

PCR wird in solchen Fällen verwendet:

• zum Nachweis von HIV bei Neugeborenen, die von HIV-infizierten Müttern geboren wurden;
• zum Nachweis von HIV in der „Fensterperiode“ oder bei zweifelhafter IB;
• um die HIV-Konzentration im Blut zu kontrollieren;
• für die Untersuchung von Spenderblut.

Allein durch den PCR-Test wird die Diagnose HIV nicht gestellt, sondern als zusätzliche diagnostische Methode zur Streitbeilegung durchgeführt.

Express-Methoden

Eine der Innovationen in der HIV-Diagnostik sind Schnelltests geworden, deren Ergebnisse in 10-15 Minuten beurteilt werden können. Die effizientesten und genauesten Ergebnisse werden mit immunchromatographischen Tests erzielt, die auf dem Prinzip des Kapillarflusses basieren. Das sind spezielle Streifen, auf die Blut oder andere Testflüssigkeiten (Speichel, Urin) aufgetragen werden. Bei Vorhandensein von Antikörpern gegen HIV erscheint nach 10-15 Minuten ein farbiger Kontrollstreifen auf dem Test - ein positives Ergebnis. Bei negativem Ergebnis erscheint nur die Kontrolllinie.

Wie bei ELISA-Tests sollten Schnelltestergebnisse durch eine IB-Analyse bestätigt werden. Nur dann kann die Diagnose einer HIV-Infektion gestellt werden.

Es gibt Express-Kits für den Heimtest. Der Test von OraSure Technologies1 (USA) ist von der FDA zugelassen, ohne Rezept erhältlich und kann zum Nachweis von HIV verwendet werden. Nach dem Test wird dem Patienten im Falle eines positiven Ergebnisses empfohlen, sich einer Untersuchung in einem spezialisierten Zentrum zu unterziehen, um die Diagnose zu bestätigen.

Die verbleibenden Tests für den Heimgebrauch wurden noch nicht von der FDA zugelassen und ihre Ergebnisse können sehr fragwürdig sein.

Trotz der Tatsache, dass Schnelltests ELISA-Tests der IV-Generation in ihrer Genauigkeit unterlegen sind, werden sie häufig für zusätzliche Tests in der Bevölkerung eingesetzt.

Sie können sich in jeder Poliklinik, im Zentralkrankenhaus oder in spezialisierten AIDS-Zentren auf eine HIV-Infektion testen lassen. Auf dem Territorium Russlands werden sie absolut vertraulich oder anonym behandelt. Jeder Patient kann damit rechnen, dass er vor oder nach der Analyse medizinisch oder psychologisch beraten wird. HIV-Tests müssen nur in kommerziellen medizinischen Einrichtungen bezahlt werden, in öffentlichen Kliniken und Krankenhäusern werden sie kostenlos durchgeführt.

Informationen darüber, wie Sie sich mit HIV infizieren können und welche Mythen über die Möglichkeiten einer Ansteckung existieren, finden Sie unter

Was ist das - Immunoblot? Dies ist eine gängige Methode zur Labordiagnostik menschlicher Virusinfektionen. Es gilt als eine der genauesten und zuverlässigsten Methoden, um das Vorhandensein von HIV nachzuweisen. In seiner Zuverlässigkeit übertrifft es sogar die Ergebnisse des Immunoblots, die als unwiderlegbar und endgültig gelten.

allgemeine Informationen

Immunoblot – was ist das? Um eine HIV-Infektion bei einem Menschen zu erkennen, ist eine Laboruntersuchung des Blutserums auf das Vorhandensein von Antikörpern erforderlich. Die Western-Blot-Technik wird auch Western Blot genannt. Es wird als zusätzliche Expertenmethode zum Nachweis menschlicher Virusinfektionen eingesetzt. Es ist notwendig, den ELISA zu bestätigen - einen Labortest, mit dem Sie das Vorhandensein von HIV-Antikörpern im Blut bestimmen können. Eine positive ELISA-Analyse wird durch Immunoblotting überprüft. Es gilt als das empfindlichste, komplexeste und teuerste.

Zweck

Was ist das - Immunoblot? Dies ist eine Technik zur Laboruntersuchung von Blutserum auf das Vorhandensein von Antikörpern gegen das Virus. Während der Studie separiert der Spezialist die Proteine ​​des Virus im Gel vor und überführt sie auf eine Nitrozellulosemembran. Das Immunoblot-Verfahren soll HIV in verschiedenen Stadien bestimmen. In der ersten Stufe wird das gereinigte Virus aus seinen Bestandteilen einer Elektrophorese unterzogen, und die Antigene, aus denen seine Zusammensetzung besteht, werden nach Molekulargewicht getrennt.

Es reproduziert sich in einer lebenden Zelle und bettet darin seine genetische Information ein. In diesem Stadium wird eine Person Träger des HIV-Virus, wenn sie infiziert war. Die Besonderheit der Krankheit besteht darin, dass sie sich möglicherweise lange Zeit nicht manifestiert. Das Virus zerstört Lymphozyten, wodurch die menschliche Immunität verringert wird und der Körper Infektionen nicht mehr widerstehen kann. Wird HIV kompetent und rechtzeitig behandelt, wird der Patient ein hohes Alter erreichen. Fehlende Therapie führt unweigerlich zum Tod. Ab dem Zeitpunkt der Infektion, jedoch ohne Behandlung, beträgt die maximale Lebensdauer nicht mehr als zehn Jahre.

Besonderheiten

Die Immunoblot-Analyse ist eine zuverlässige Methode, mit der Sie das Vorhandensein von Antikörpern gegen HIV-Antigene des ersten und zweiten Typs bestimmen können. Wenn eine Person infiziert ist, erscheinen innerhalb von zwei Wochen Antikörper, die viel später nachgewiesen werden können. Die Besonderheit von HIV besteht darin, dass die Zahl der Antikörper schnell ansteigt und im Blut des Patienten verbleibt. Selbst wenn sie vorhanden sind, kann sich die Krankheit zwei oder mehr Jahre lang nicht manifestieren. Die ELISA-Methode bestimmt das Vorhandensein der Krankheit nicht immer genau, daher ist eine Bestätigung der Ergebnisse durch Immunblotting und PCR erforderlich, wenn der Enzymimmunoassay positiv ist.

Hinweise zum Termin

Was ist dieser "Immunoblot" wurde bereits herausgefunden, aber wem wird diese Studie verschrieben? Der Grund für die Durchführung von Tests für die Methode des Immunoblots ist ein positives ELISA-Ergebnis. Bei Patienten, die operiert werden, ist ein Enzymimmunoassay erforderlich. Darüber hinaus sollte eine Analyse für Frauen durchgeführt werden, die eine Schwangerschaft planen, sowie für alle, die sexuell promiskuitiv sind. Weisen Sie Patienten mit HIV Immunblotting zu, wenn die Ergebnisse des ELISA zweifelhaft sind. Folgende besorgniserregende Symptome können Anlass für einen Arztbesuch sein:

• starker Gewichtsverlust;
• Schwäche, Verlust der Arbeitsfähigkeit;
• Darmbeschwerden (Durchfall), die drei Wochen anhalten;
• Austrocknung des Körpers;
• Fieber;
• geschwollene Lymphknoten im Körper;
• Entwicklung von Candidiasis, Tuberkulose, Lungenentzündung, Toxoplasmose, Verschlimmerung von Herpes.

Der Patient muss sich nicht vorbereiten, bevor er venöses Blut spendet. 8-10 Stunden vor der Studie können Sie nichts essen. Es wird nicht empfohlen, alkoholische und Kaffeegetränke zu trinken, schwere körperliche Übungen zu machen und einen Tag vor der Blutspende Aufregung zu erleben.

Wo soll die Analyse durchgeführt werden?

Wo kann ich mich auf HIV testen lassen? ELISA, Immunoblot-Studien werden in städtischen Privatkliniken durchgeführt, die Ergebnisse werden innerhalb eines Tages ausgestellt. Auch eine Sofortdiagnose ist möglich. In staatlichen medizinischen Einrichtungen werden ELISA-Tests und Immunoblotting gemäß der Gesetzgebung der Russischen Föderation kostenlos durchgeführt. Schwangere sowie Patienten, die ins Krankenhaus eingeliefert oder operiert werden sollen, müssen sich auf Infektionskrankheiten testen lassen.

Wie wird geforscht?

Wie wird ELISA durchgeführt? Immunoblot positiv/negativ bestätigt oder widerlegt die Ergebnisse des Enzymimmunoassays. Das Forschungsverfahren ist recht einfach. Der Spezialist führt eine venöse Blutentnahme durch, die zeitlich nicht länger als fünf Minuten dauert. Nach der Probenahme sollte die Injektionsstelle desinfiziert und mit einem Pflaster verschlossen werden. Die Probenahme erfolgt auf nüchternen Magen, sodass es nach dem Eingriff nicht schadet, eine Tafel dunkle Schokolade zu essen oder ein süßes Heißgetränk zu trinken.

Um eine Überweisung für eine kostenlose Analyse in einer öffentlichen medizinischen Einrichtung zu erhalten, müssen Sie einen Hausarzt aufsuchen. Generell unterscheidet sich der Immunoblot in der Art der Probenentnahme nicht von anderen Blutuntersuchungen. Die Forschungsmethodik ist einfach. Wenn ein Virus im Blut einer Person vorhanden ist, beginnt der Körper, Antikörper zu produzieren, um es zu zerstören. Jedes Virus hat seinen eigenen Satz von Antigenproteinen. Der Nachweis dieser Antikörper ist die Grundlage der Western-Blotting-Technik.

Preis

Was kostet die Analyse? Immunoblot für HIV gilt nicht für billige Forschung. Im Durchschnitt kostet eine Screening-Untersuchung per Enzymimmunoassay zwischen 500 und 900 Rubel. Immunoblotting ist eine Verifizierungsstudie, deren Kosten zwischen drei und fünftausend Rubel liegen. Komplexere Methoden sind viel teurer. Zum Beispiel müssen Sie dafür etwa 12.000 Rubel bezahlen.

Interpretation des Ergebnisses

Die gebräuchlichsten Methoden zur Diagnose einer HIV-Infektion sind der Enzymimmunoassay und der Immunoblot. Sie dienen der Bestimmung der Serumantikörper gegen das Immunschwächevirus. Das Vorhandensein einer Infektion wird normalerweise durch zwei Tests bestätigt: Screening und Bestätigung. Die Interpretation der Studienergebnisse sollte von einem Arzt durchgeführt werden, er stellt auch eine Diagnose und verschreibt eine Behandlung. Ist der Immunoblot positiv, bedeutet dies, dass ein Virus im menschlichen Körper vorhanden ist.

Ein positives Ergebnis sollte kein Grund für eine Selbstbehandlung sein, da jeder Patient sein eigenes Krankheitsbild haben kann. Die qualitative Analyse umfasst Screening und Verifizierung. Wenn der Patient kein Virus hat, wird das Ergebnis als „negativ“ angezeigt. Bei Nachweis durch das Screening-Verfahren wird eine zusätzliche Verifizierungsstudie durchgeführt. Ein Immunoblot ist eine Analyse, die ein Screening bestätigt oder widerlegt. Wenn an bestimmten Stellen (Orte der Proteinlokalisation) auf dem Teststreifen eine Verdunkelung auftritt, wird eine HIV-Diagnose gestellt. Bei Zweifeln an den Ergebnissen werden die Tests innerhalb von drei Monaten durchgeführt.

Sie können einer Ansteckung mit dem Immunschwächevirus vorbeugen, wenn Sie sich an bestimmte Regeln halten: Gelegenheitssex vermeiden, bei Kontakten Kondome benutzen, keine Drogen nehmen. Wenn die Krankheit bei einer schwangeren Frau festgestellt wird, ist es wichtig, die Empfehlungen des behandelnden Arztes strikt zu befolgen. Vergessen Sie nicht, sich auf das Vorhandensein des Virus untersuchen zu lassen.

Hypotonie, Tachykardie, Kurzatmigkeit, Zyanose. In schweren Krankheitsfällen sind Blutungen, Erbrechen mit Blutbeimengung möglich. Leber und Milz sind vergrößert. Oligurie beachten. Die Temperatur bleibt 3–10 Tage lang konstant hoch. Im peripheren Blut - neutrophile Leukozytose mit einer Verschiebung der Formel nach links. Zusätzlich zu den beschriebenen allgemeinen Manifestationen der Pest entwickeln sich Läsionen, die für einzelne klinische Formen der Krankheit charakteristisch sind.

Die kutane Form ist selten (3–5 %). An der Stelle des Eintrittstors der Infektion erscheint ein Fleck, dann eine Papel, ein Vesikel (Konflikt), gefüllt mit serösem hämorrhagischem Inhalt, umgeben von einer infiltrierten Zone mit Hyperämie und Ödem. Flikten ist durch starke Schmerzen gekennzeichnet. Beim Öffnen bildet es ein Geschwür mit einem dunklen Schorf an der Unterseite. Ein Pestgeschwür zeichnet sich durch einen langen Verlauf aus, heilt langsam und bildet eine Narbe. Wenn diese Form durch Septikämie kompliziert wird, treten sekundäre Pusteln und Geschwüre auf. Vielleicht die Entwicklung eines regionalen Beulen (Haut-Beulen-Form).

Die Beulenform tritt am häufigsten auf (ca. 80 %) und zeichnet sich durch einen relativ gutartigen Verlauf aus. Ab den ersten Krankheitstagen treten im Bereich der regionalen Lymphknoten starke Schmerzen auf, die die Bewegung erschweren und den Patienten in eine Zwangslage bringen. Die primäre Beule ist in der Regel einzeln, mehrere Beulen werden seltener beobachtet. In den meisten Fällen sind die Leisten- und Oberschenkellymphknoten betroffen, etwas seltener sind Achsel- und Halslymphknoten. Bubo-Größen variieren von einer Walnuss bis zu einem mittelgroßen Apfel. Helle Merkmale sind scharfe Schmerzen, dichte Konsistenz, Haftung an den darunter liegenden Geweben, Glätte der Konturen aufgrund der Entwicklung einer Periadenitis. Bubo beginnt sich am zweiten Krankheitstag zu bilden. Während der Entwicklung wird die Haut darüber rot, glänzend, oft zyanotisch. Am Anfang ist es dicht, dann wird es weicher, Schwankungen treten auf, die Konturen werden unscharf. Am 10.-12. Krankheitstag öffnet es sich - es bildet sich eine Fistel, Geschwürbildung. Bei einem gutartigen Krankheitsverlauf und einer modernen Antibiotikatherapie wird dessen Resorption oder Sklerose beobachtet. Durch hämatogenes Einbringen des Erregers können sich sekundäre Beulen bilden, die später auftreten und klein, weniger schmerzhaft und in der Regel nicht eiternd sind. Eine gewaltige Komplikation dieser Form kann die Entwicklung einer sekundären pulmonalen oder sekundären septischen Form sein, die den Zustand des Patienten bis zum Tod stark verschlechtert.

Primär pulmonal die Form ist selten, in Epidemien in 5-10% der Fälle und ist die epidemiologisch gefährlichste und schwerste klinische Form der Krankheit. Es beginnt scharf, heftig. Vor dem Hintergrund eines ausgeprägten Intoxikationssyndroms treten ab den ersten Tagen trockener Husten, starke Atemnot, schneidende Schmerzen in der Brust auf. Der Husten wird dann produktiv und produziert Auswurf, dessen Menge von wenigen Spucken bis zu großen Mengen variieren kann und selten überhaupt fehlt. Der Auswurf, zunächst schaumig, glasig, durchsichtig, dann blutig aussehend, später rein blutig, enthält eine große Menge an Pestbakterien. Normalerweise ist es eine flüssige Konsistenz - eines der diagnostischen Anzeichen. Körperliche Daten sind spärlich: eine leichte Verkürzung des Perkussionsschalls über dem betroffenen Lappen, während der Auskultation, nicht häufiges feines Blubbern von Rasseln, was eindeutig nicht dem ernsten Allgemeinzustand des Patienten entspricht. Die Endphase ist durch eine Zunahme von Atemnot, Zyanose, die Entwicklung von Stupor, Lungenödem und TSS gekennzeichnet. Der Blutdruck fällt, der Puls beschleunigt und wird fadenförmig, Herztöne werden gedämpft, Hyperthermie wird durch Hypothermie ersetzt. Ohne Behandlung verläuft die Krankheit innerhalb von 2–6 Tagen tödlich. Bei frühzeitigem Einsatz von Antibiotika ist der Krankheitsverlauf gutartig, unterscheidet sich kaum

IMMUNOBLOT(Western Blot) - eine Methode zur Laboruntersuchung von Blutserum auf das Vorhandensein von Antikörpern gegen HIV; Es ist ein genauerer Test als ELISA und wird verwendet, um ELISA-Ergebnisse zu bestätigen. ELISA - Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) - ein Labortest, mit dem Sie das Vorhandensein von HIV-Antikörpern im Blut bestimmen können; HIV-Antikörpertest.

Gemäß WHO-Empfehlung wird bei der Diagnose einer HIV-Infektion das Immunblotting (Western Blot) als zusätzliche Expertenmethode eingesetzt, die die Ergebnisse des ELISA bestätigen soll. Diese Methode wird normalerweise verwendet, um ein positives ELISA-Ergebnis zu überprüfen, da sie als empfindlicher und spezifischer gilt, obwohl sie komplexer und teurer ist.

Immunoblotting kombiniert einen Enzymimmunoassay (ELISA) mit einer vorläufigen elektrophoretischen Trennung von Virusproteinen in einem Gel und deren Übertragung auf eine Nitrozellulosemembran. Das Immunoblot-Verfahren besteht aus mehreren Stufen (). Zuerst wird HIV, vorgereinigt und in seine Bestandteile zerstört, einer Elektrophorese unterzogen, während alle Antigene, aus denen das Virus besteht, nach Molekulargewicht getrennt werden. Anschließend werden die Antigene durch Blotting aus dem Gel auf einen Nitrozellulosestreifen oder einen Nylonfilter übertragen, die nun unsichtbar für das Auge ein für HIV charakteristisches Proteinspektrum enthalten. Als nächstes wird das Testmaterial (Serum, Plasma des Patienten usw.) auf den Streifen aufgetragen, und falls spezifische Antikörper in der Probe vorhanden sind, binden diese an die Streifen von Antigenproteinen, die ihnen genau entsprechen. Durch nachfolgende Manipulationen (zB ELISA) wird das Ergebnis dieser Interaktion visualisiert – sichtbar gemacht. Das Vorhandensein von Streifen in bestimmten Bereichen des Streifens bestätigt das Vorhandensein von Antikörpern gegen streng definierte HIV-Antigene im untersuchten Serum.

Immunoblotting wird am häufigsten verwendet, um die Diagnose einer HIV-Infektion zu bestätigen. Die WHO betrachtet Seren als positiv, wenn durch Immunoblotting Antikörper gegen zwei der HIV-Hüllproteine ​​nachgewiesen werden. Kommt es nach diesen Empfehlungen zu einer Reaktion mit nur einem der Hüllproteine ​​(gp160, gp120, gp41) in Kombination mit oder ohne Reaktion mit anderen Proteinen, gilt das Ergebnis als zweifelhaft und es wird eine zweite Studie mit einem Kit von a empfohlen anderen Baureihen oder von einer anderen Firma. Bleibt das Ergebnis danach zweifelhaft, werden die Studien alle 3 Monate fortgesetzt.

Beim Immunoblotting werden im ersten Schritt die im Blutserum enthaltenen Proteine ​​mittels eines elektrischen Feldes nach Molekulargewicht und Ladung im Gel aufgetrennt (Gelelektrophorese-Verfahren). Dann wird eine Nitrozellulose- oder Nylonmembran auf das Gel aufgebracht und "benetzt" (das ist Blotting). Dies erfolgt in einer speziellen Kammer, die eine vollständige Übertragung des Materials vom Gel auf die Membran ermöglicht. Dadurch wird das Muster der Proteinanordnung, das sich auf dem Gel befand, auf der Membran reproduziert (Blot), die dann leicht manipuliert werden kann. Zunächst wird die Membran mit Antikörpern gegen das gewünschte Antigen behandelt und nach dem Abwaschen des ungebundenen Materials wird ein radioaktiv markiertes Konjugat zugegeben, das spezifisch an Antikörper bindet (wie beim ELISA). Die Lage des resultierenden Antigen-Antikörper-markierten Konjugatkomplexes wird durch Autoradiographie unter Verwendung eines Röntgenfilms bestimmt. Nach seiner Manifestation wird alles klar, ob Antigene im Blut vorhanden sind oder nicht.