Anf homogén típusú lumineszcencia. Mire használható az antinukleáris antitest? Általános információk a tanulmányról

A nagy kollagenózisok csoportjába tartozik, amelyet a kötőszövet és az erek diffúz károsodása jellemez. Ennek a patológiának a korai felismerése komoly probléma, mivel az SLE más betegségek „maszkja” alatt is elkezdődhet. Mivel az SLE egy autoimmun betegség, klinikai megnyilvánulásainak mechanizmusa a modern fogalmak szerint a következő álláspontokból magyarázható:

• a keringő immunkomplexek (CIC), amelyek antinukleáris antitesteket tartalmaznak, és amelyek a mikrocirkulációs láncban lerakódnak, vasculopathia és szövetkárosodás kialakulásához vezetnek;
• a vérsejtek elleni autoantitestek leuko-, limfotrombopéniához és vérszegénységhez vezetnek;
• Az antifoszfolipid antitestek antifoszfolipid szindróma (APS) kialakulásához vezetnek.

Az immunológiai laboratóriumi diagnosztika korszerű módszerei lehetővé teszik az SLE patogenezisének minden összetevőjének azonosítását, és ezáltal a betegség diagnózisának rendkívüli, közel 100%-os pontosságú igazolását. Ugyanakkor az elemzésekben bekövetkezett változások jelenléte lehetővé teszi, hogy azokat csak az egyéni klinikai kép figyelembevételével értelmezzék.

Meg kell jegyezni, hogy az SLE diagnosztizálásának régi módszere LE-sejtek vérben való jelenlétével nem állta ki az idő próbáját, rendkívül alacsony érzékenységet és specificitást mutatott, ezért elvetették. Az LE sejtek még csak nem is szerepelnek az SLE kritériumokban.

Az SLE fő markerei a következők:

A szisztémás lupus erythematosus markereinek vérvizsgálatának kijelölésére vonatkozó jelzések

• bőr lupus;
• gyógyászati ​​lupus;
• thrombocytopeniás purpura;
• eritroderma;
• súlyos májkárosodás;
• CREST szindróma;
• polimiozitisz;
• dermatomyositis;
• krónikus juvenilis ízületi gyulladás;
• autoimmun hepatitis;
• szklerotizáló cholangitis;
• polyneuropathia;
• csontvelőgyulladás;

Milyen az eljárás?

A vérmintavétel a cubitalis vénából történik reggel éhgyomorra.

Felkészülés az elemzésre

Lupus antikoaguláns

A lupus antikoaguláns (LA) az APS diagnózisának egyik fontos szűrő- és megerősítő tesztje. A VA-k a szervezetben a fertőző hatások utáni autoimmun folyamatok kialakulásának eredményeként képződnek, és elnyomják a protrombin trombinná történő átalakulásának reakcióját a vérben. Ha ezeket az antitesteket a vérben kimutatják a véralvadási tesztek meghosszabbításával, akkor ezeket "lupus antikoagulánsnak" nevezik.

Pozitív eredmény:

• daganatok;

antinukleáris faktor

Antinukleáris faktor a HEp-2 sejtvonalon (ANF HEp-2, titerek; ANA IF, titerek). Az ANF pozitív eredménye az SLE-s betegek több mint 90%-ánál és e betegség bőrformáiban, sclerodermában, vegyes kötőszöveti betegségben, Sjögren-szindrómában szenved. Az ANF meghatározásának eredménye a titer, amely a szérum végső hígításának értéke, amely megőrzi a mag jelentős fluoreszcenciáját. Minél nagyobb a frakció nevezője, annál nagyobb a szérum hígítása, annál több antitest van a páciens szérumában. Ennek a tesztnek az érzékenysége SLE-re 95%.

Magas ANF titerek (1/640 és magasabb):

• a szisztémás reumás betegség nagy valószínűsége;
• az autoimmun májbetegség magas kockázata;
• az ANF-titerek dinamikájának növekedése szisztémás betegség súlyosbodását jelzi;
• SLE-ben a titer korrelál a betegség súlyosságával, és csökken a hatékony terápia hatására.

Alacsony ANF titer (akár 1/160):

• az egészséges egyének 1-2%-ában;
• szisztémás betegségben szenvedő betegek hozzátartozóinál;
• számos autoimmun, fertőző és onkológiai betegség.

Nukleoszómák elleni antitestek

A nukleoszóma antitestek (NCA-k) az elsők között alakulnak ki a szervezetben az SLE kialakulása során. Az NCA-titerek korrelálnak a betegség aktivitásával. Ezen autoantitestek specifitása az SLE diagnózisában több mint 95%.

Elemzési eredmény értelmezése

A nukleoszómák elleni antitestek magas tartalma (pozitív):

• gyógyászati ​​lupus;
• aktív SLE, nephritis kíséretében.

• az SLE alacsony valószínűsége;
• alacsony a vesekárosodás kockázata SLE-ben.

Az IgG osztályba tartozó antitestek a kettős szálú DNS ellen

A kettős szálú DNS elleni IgG osztályba tartozó antitestek (anti-dsDNA IgG; anti-dsDNA IgG) jelenléte erősen specifikus az SLE-re, kisebb mértékben - más diffúz kötőszöveti betegségekben vagy gyógyszerek által kiváltott SLE-ben. Az SLE teszt érzékenysége 85%. Az anti-dsDNS IgG antitestek mennyiségi meghatározása a legalkalmasabb az SLE-s betegek állapotának, prognózisának és a terápia kontrollálására, mivel összefüggésben áll annak aktivitásával és a glomerulonephritis súlyosságával.

Az elemzés eredményének megfejtése

Szintlépés:

• az Epstein-Barr vírus által okozott fertőzés;

Szint lejjebb:

• norma.

Kardiolipin IgG elleni antitestek

Az anticardiolipin IgG antitestek (aCL IgG) az antifoszfolipid szindróma patogenezisében szerepet játszó autoimmun antifoszfolipid antitestek egyik típusa. Jelenlétük a vérben a foszfolipid-függő koagulogram tesztek (protrombin, APTT) elhúzódásában nyilvánul meg, amelyet "lupus antikoagulánsnak" neveznek.

Elemzési eredmény értelmezése

• gyógyászati ​​lupus;
• hepatitis C;
• borreliosis;
• HIV fertőzés.

A kardiolipin IgM elleni antitestek

A kardiolipin IgM (aCL IgM) elleni antitestek kimutatása az SLE kialakulásának magas kockázatát jelzi; Az aCL IgM a szisztémás lupus erythematosusban szenvedő betegek 20-50%-ában és az egyéb szisztémás reumás betegségben szenvedő betegek 3-20%-ában mutatható ki.

Értelmezés

Pozitív (antitesteket észleltek):

• hepatitis C;
• borreliosis;
• HIV fertőzés;
• szisztémás kötőszöveti betegségek.

Normák

Az orvostudományban vannak olyan speciális állapotok, amelyekben a védősejtek megtámadják saját testüket - autoimmun betegségek. Ezeknek a betegségeknek a többsége krónikus formában fordul elő, és potenciálisan veszélyes is, mivel komoly problémákat okozhat bizonyos szervek és rendszerek működésében. Ez gyakran rokkantsághoz és súlyos következményekhez vezet.

A modern orvoslás lehetőségei nagyok, mindezeket a változásokat korai stádiumban lehet azonosítani, és időben megkezdeni a kezelést. Az ilyen állapotok diagnosztizálására használt egyik leggyakoribb teszt az antinukleáris antitest teszt, vagy röviden AHA.

Az ANA analízise a leginformatívabb módszer bármely feltételezett autoimmun betegség, elsősorban a kötőszöveti betegségek diagnosztizálására. De vannak olyan antitestek is, amelyek rosszindulatú folyamatokban, fertőző stb.

Az ANA analízis a leginformatívabb diagnosztikai módszer a feltételezett autoimmun betegségekre

Az antitestek legnagyobb érzékenysége az ilyen betegségekre:

1. Szisztémás lupus erythematosus.
2. Rheumatoid arthritis.
3. Sjögren-betegség.

Ezek a sejtek a krónikus hepatitisben szenvedő betegek körülbelül egyharmadában is megtalálhatók.

Különféle tényezők befolyásolják a teljesítmény növekedését. Különösen a malária, a leukémia, a fertőző mononukleózis és még sok más.

Az ANA vizsgálat során történő kimutatása mellett fontos az olyan immunglobulinok szintjének felmérése, mint az IgA, IgM, IgG. Ezen komponensek kimutatása a betegek vérében reumás patológiák és kollagenózisok megjelenésének nagy esélyét jelezheti.

Ha az antitest-tartalom és a tünetek közötti összefüggést nem azonosították, az ANA vérben való jelenléte a megfelelő kezelési taktika kiválasztását jelzi. A magas hitelállomány hosszú távú megőrzése kiábrándító állapotról beszél. Ezeknek a titereknek a csökkenése a patológia remisszióját jelzi, sokkal ritkábban a közelgő halálesetről.

Ugyanakkor ezek az antitestek az egészséges egyének bizonyos százalékában kimutathatók, és az ANF-titerek meghaladhatják a normál tartományt.

A vizsgálat indikációi

Az eredmények értelmezésére az immunológusnak és bármely okleveles szakembernek joga van, az elváltozás területétől függően.

A tanulmány indikációi a következők:

1. Szisztémás betegségek, valamint autoimmun rendellenességek azonosítása nyilvánvaló tünetek nélkül.
2. A szisztémás lupus erythematosus kimutatása és átfogó vizsgálata, kezelési stratégia kiválasztása.
3. A kábítószeres lupus azonosítása.
4. Bizonyos klinikai megnyilvánulások jelenléte, mint például a látható ok nélküli tartós láz, az ízületek törékenysége és fájdalma, bőrkiütés, izomfájdalmak és nagyfokú fáradtság.
5. A vegyes betegségek tüneti megnyilvánulásainak jelei: a bőr és a belső szervek betegségei, görcsös állapotok, hőmérséklet-emelkedés.
6. Gyógyszerek felírása: dizopiramid, hidralazin stb.

A vizsgálat típusai

lupusz csík

Kétféleképpen lehet kimutatni az antitesteket a vérben. Az első technikát indirekt immunfluoreszcens mikroszkópiának nevezik. Ha antitestek vannak jelen, azok specifikus nukleáris antigénekhez kötődnek. Külön fényspektrumban világító elemeket használnak. A mikroszkóp alatt lehetővé válik a lumineszcencia típusának azonosítása.

Tudjon meg többet arról, hogy mi a myofascial szindróma és hogyan kezelik.

Ezt a módszert tartják a legjobbnak az antinukleáris antitestek értékének meghatározására. Ezenkívül a technika második nevet kapott - lupus tesztcsíkok.
A második diagnosztikai módszer az enzim immunoassay. Jelentése abban rejlik, hogy a vérben lévő antitestek kapcsolatba kerülnek az antigénnel, és ennek következtében az oldat színe megváltozik.

Fontos hangsúlyozni hogy a pozitív szűrés nem lehet a diagnózis egyetlen oka.

További vizsgálatra van szükség, amelynek segítségével a betegség korai szakaszában meghatározható. Negatív szűrés esetén a zavarok teljes hiánya feltételezhető. Ez azonban egyáltalán nem zárja ki egy autoimmun betegség jelenlétét a páciensben.

Az antinukleáris faktor kimutatására más vizsgálatokkal együtt vért adnak. De a végeredményt befolyásolja bizonyos gyógyszerek bevitele, valamint a krónikus és akut patológiák jelenléte a betegben. A szakember segít ezeknek a pontoknak a elemzésében, majd felállítja a helyes diagnózist és tanácsot ad a továbblépésről.

Hogyan készüljünk fel a kutatásra

Az elemzés anyaga a vénás vér.

Az előkészítés jellemzői:

1. Az anyagot éhgyomorra veszik. Az utolsó étkezés után legalább 8 órának el kell telnie. Jó minőségű szűrt víz fogyasztása gáz nélkül megengedett.
2. Két órával a vérvétel előtt dohányzás és nikotintartalmú termékek használata kizárt.
3. Néhány nappal a műtét előtt alkoholos italok, energiaitalok fogyasztása kizárt, nehéz fizikai munkavégzés tilos.
4. Két hét múlva kell teljesen kerülje a gyógyszerek szedését különösen a hormonok, antibiotikumok és egyéb gyógyszerek.
5. A vizsgálat validálása érdekében fontos két hét múlva ismételje meg a szűrést.

Az elemzés anyaga a vénás vér

Az eredményt az eljárás után 48 órán belül várják. Sürgősségi adatfelvételre 3 órán belül van lehetőség.

Az eredmények értelmezése

A kvalitatív vizsgálat során a következő eredmények érhetők el:

• 0,9 alatt - negatív, normál;
• 0,9 és 1,1 közötti értékek - kétséges;
• 1,1 felett - pozitív.

A betegek gyakran felteszik a kérdést: az 1:160 antinukleáris faktor normális vagy sem? Bármi, ami ezt a mutatót meghaladja, a normától eltérő.

A vizsgálati eredmények értelmezése információkat tartalmaz a kezelőorvos számára, és nem minősül diagnózisnak. Az ebben a részben található információkat nem szabad öndiagnózisra vagy önkezelésre használni. A pontos diagnózist az orvos állítja fel, felhasználva mind ennek a vizsgálatnak az eredményeit, mind a szükséges információkat más forrásokból: anamnézis, egyéb vizsgálatok eredményei stb.

Mértékegységek: titer.

Az eredmények értelmezése

Az ANF meghatározásának eredménye a titer, amely a szérum végső hígításának értéke, amely megőrzi a mag jelentős fluoreszcenciáját. Minél nagyobb a frakció nevezője, annál nagyobb a szérum hígítása, annál több antitest van a páciens szérumában. A magas szérumhígítási titerek az autoantitestek magas affinitását és koncentrációját tükrözik.

A magas titerek (1/640 és magasabb) azonosítása szisztémás reumás betegség vagy autoimmun májbetegség nagy valószínűségét jelzi, és gondos klinikai, laboratóriumi és műszeres vizsgálatot igényel. Az antinukleáris faktor emelkedett titereinek hiánya jelentősen csökkenti a szisztémás autoimmun betegségek valószínűségét.

Alacsony titerekben (1/160-ig) az antinukleáris faktor az egészséges egyének és a szisztémás betegségekben szenvedő betegek hozzátartozóinak 1-2% -ában figyelhető meg. A pozitív titerek gyakorisága a populációban valamelyest nő az életkorral. Az antinukleáris antitestek alacsony titere számos autoimmun, fertőző és onkológiai betegségben előfordulhat. Az antinukleáris antitestek magas titerének hiánya jelentősen csökkenti a szisztémás reumás folyamatok valószínűségét, és inkább a diagnózis kizárására, mintsem megerősítésére használható.

Az ANF-titerek dinamikájának emelkedése szisztémás betegség súlyosbodását jelzi, így SLE-ben a titer a folyamat súlyosságával korrelál, és a hatékony terápia hatására csökken.

A szérumtiteren kívül, az analízis pozitív eredményével, leírják a sejtmag lumineszcenciájának típusát. Az antitestek széles köre okozza, amelyek a sejten belül találják meg célpontjukat. A lumineszcenciának több mint 20 típusát írták le, de ezek közül nyolcat használnak a klinikai gyakorlatban:

Referencia értékek:< 1:160

Néha 2 fajta ragyogás írható le, amelyekben az egyik alacsony kreditben takarja el a másikat. Ha pozitív ANF-eredményt észlel, meg kell próbálni meghatározni az antinukleáris antitestek antigén célpontjait a kettős szálú DNS (126. számú) és a nukleoszómák elleni antitestek (956. számú) kimutatására szolgáló tesztekkel, az antinukleáris antitestek immunoblotjával. (827. sz.), antitestek immunoblotja szklerodermában (826. sz.), polimiozitisz elleni antitestek immunblotja (939. sz.) és kardiolipin elleni antitestek meghatározása (967-969., 997. sz.).

antinukleáris faktor

antinukleáris faktor- laboratóriumi analízis, amelynek célja a sejtmag szerkezetének különböző típusú specifikus immunglobulinjainak meghatározása. Az ANF index növekszik a kötőszövet szisztémás betegségeiben. A vizsgálatot diagnosztizálásuk, differenciálásuk, kezelésük ellenőrzése, exacerbációk kimutatása céljából végzik. A szisztémás lupus erythematosus, scleroderma, Sharp-szindróma, Sjogren-szindróma, rheumatoid arthritis, gyulladásos myopathia klinikai és laboratóriumi tüneteire írják fel. A vénás vérszérumot RNIF módszerrel vizsgálják. A normál indikátor az 1:160-nál nem magasabb titer. A tesztadatok elkészítési ideje 8 munkanap.

A reumás betegségek alapja egy autoimmun reakció a sejtmag szerkezete ellen - fehérjék és nukleinsavak komplexei. Az antigének az epitheliocyták és limfociták programozott halála során keletkeznek. Az ultraibolya sugarak, fertőző ágensek, gyógyszerek felgyorsítják a sejtpusztulást, lassítják az apoptotikus testek eltávolítását, autoimmun folyamatok kialakulását provokálják. A sejtmag szerkezete elleni antitesteket sokféle típus képviseli, az antinukleáris faktor tanulmányozása során körülbelül nyolcat különböztetnek meg. A teszt előnye a nagy specifitás - olyan antitesteket mutatnak ki, amelyek nem tisztíthatók ELISA-hoz. Az immunkomplexek egy része azonban az RNIF során kivonódik a plazmába, így fennáll a hamis negatív eredmény lehetősége.

Javallatok

Az antinukleáris faktor vizsgálata a kötőszövet szisztémás patológiáira javallt. A vizsga kijelölésének alapja:

• A reumás betegségek tünetei. Jellemző megnyilvánulásai a láz, fáradtság, gyengeség, fogyás, izom- és ízületi fájdalmak, bőrkiütések. A teszt SLE, scleroderma, Sjögren-szindróma, Sharp-szindróma, rheumatoid arthritis, gyulladásos myopathiák kimutatására és megkülönböztetésére szolgál.
• Laborvizsgálati eredmények. A reumás patológia gyanúja az ESR növekedésével, a C-reaktív fehérje szintjével és a CEC-vel jelentkezik. A vizsgálatot a diagnózis megerősítésére rendelik.
• A reumás betegségek diagnosztizálása. Az elemzést évente többször elvégzik (a gyakoriságot egyénileg határozzák meg) a patológia lefolyásának nyomon követése érdekében, az immunszuppresszánsok kezelését követően - a terápia hatékonyságának felmérése érdekében.

Felkészülés az elemzésre

Bioanyag az antinukleáris faktor meghatározására - vénás vér. A begyűjtési eljárás reggel történik. Az előkészítés szabályai a következők:

1. Az utolsó étkezést legkésőbb 4 órával előtte kell elfogyasztani. A víz ivása bármikor megengedett.
2. Az eljárás előtti napon ki kell zárni az alkoholt, a testmozgást, az érzelmi élményeket.
3. A gyógyszerek alkalmazását meg kell beszélni az orvossal. Egyes gyógyszerek provokálják az antitestek termelését, a gyógyszer által kiváltott lupus kialakulását. A glükokortikoszteroidok szedésének hátterében hamis negatív adatok beszerzése lehetséges.
4. A véradás után műszeres diagnosztikai eljárásokat, fizioterápiás foglalkozásokat kell végezni.
5. Az eljárás előtti utolsó 30 percben tilos a dohányzás.

A laboratóriumban a szérumot izolálják a vérből. A benne lévő antinukleáris antitestek meghatározását RNIF módszerrel végezzük HEp-2 sejttenyészet segítségével. A titer becslése a bioanyag legmagasabb hígítása alapján történik, amelynél a nukleáris struktúrák lumineszcenciája kimutatható, az immunglobulinok típusa - a fluoreszcencia jellege szerint. Az elemzés időtartama 6-8 nap.

Normál értékek

Általában az antinukleáris faktor vizsgálatának eredménye negatív. A titer felnőttek és gyermekek esetében nem haladja meg az 1:160-at. A végső érték értelmezésekor a következő megjegyzéseket kell figyelembe venni:

• Az ANA alacsony titere csökkenti az autoimmun patológia valószínűségét, de nem zárja ki. SLE-vel az esetek 5% -ában az eredmény negatív, az SS antigének elleni antitestek vizsgálatát végzik.
• Az immunszuppresszív terápia utáni normális eredmény megerősíti annak sikerességét.
• Negatív eredmény az autoimmun patológia tüneteinek hátterében további teszteket igényel (NCA, ANA ELISA-val).

A mutató növelése

Az antinukleáris antitestek nem rendelkeznek citotoxikus tulajdonságokkal, de az antigénekhez való kötődésük után immunkomplexek képződnek, amelyek gyulladásos folyamatokat indítanak el az érfalakban. Ezek a bőr, a vese glomerulusok, az ízületek membránjai, a mellhártya elváltozásaiban nyilvánulnak meg. A szisztémás patológiákra jellemző tünetek alakulnak ki. A lehetséges betegségeket a lumineszcencia típusa határozza meg a szérum minimális hígításával:

• Homogén. A diffúz fluoreszcencia a ds DNS elleni antitestek, hisztonok jelenlétét jelzi. SLE-ben és gyógyszer-indukálta lupusban határozzák meg.
• Kerületi. A lumineszcencia típusát a kromatin elhelyezkedése határozza meg, Ig jelenlétében detektálható az SLE-re specifikus DNS-komponensekhez.
• szemcsés. Az antigének nukleoproteinek komplexei. A ragyogás nem specifikus, számos reumás betegségben megtalálható. A Sharp-szindrómára leginkább jellemző a magas titer és a nagy szemcsés fluoreszcencia.
• Nukleáris. A specifikus Ig jelenlétét tükrözi a nucleolus szerkezetében. Kimutatja a szklerodermát és a Sjögren-szindrómát. Ritkán észlelhető endokrinopátiákban, bőrpatológiákban, szervátültetéseknél.
• Centromer. Az antigének a kromoszómák centromerei. A ragyogás megerősíti a korlátozott szklerodermát.
• citoplazmatikus. A tRNS-szintetáz (Jo-1), riboszómák, organellumok elleni antitestek jelenléte váltja ki. Lehetővé teszi a gyulladásos myopathiák, az autoimmun májkárosodás meghatározását.
• Mitokondriális. Az antigének a piruvát-dekarboxiláz komplex összetevői. A ragyogás az elsődleges biliaris cirrhosisra jellemző.
• pontozott. A nukleoproteinek elleni antitestek keringésével, autoimmun májkárosodással társul.

Az indikátor csökkenése

A mutató csökkenése prognosztikai értékkel bír a kötőszövet szisztémás betegségeinek monitorozásában. Az ANA szintje korrelál a kóros folyamatok aktivitásával, ezért koncentrációjuk csökkenése a remisszió, a terápia sikerének jele.

Az emberi immunrendszer egy egyedülálló, jól koordinált mechanizmus, amely képes reagálni a kórokozók bármilyen külső bejutására, ezáltal megvédi a szervezetet számos betegségtől. De mint tudod, minden szabály alól vannak kivételek, és ebben az esetben úgy néznek ki, mint az immunrendszer válasza a saját sejtjeire, amit autoimmun betegségeknek neveznek.

Ezekkel a patológiákkal olyan antitestek képződnek, amelyek megtámadják az egészséges sejteket, károsítva vagy elpusztítva azokat. Ennek eredményeként megsértik az egyes szöveti struktúrák, sőt a szervek működését. Az ilyen patológiákat elterjedtségük és több szerv vagy rendszer folyamatában való részvételük miatt szisztémás betegségeknek nevezzük.

A modern laboratóriumi diagnosztikai módszerek megjelenésével, amelyek közül az egyik az ANF, egy antinukleáris faktor keresésének vérvizsgálata, amely lehetővé teszi az antinukleáris (antinukleáris) antitestek azonosítását és a patológia okának meghatározását. Ez a mutató a szisztémás kötőszöveti betegségek (MCTD) egyik markere, amelyet az ilyen típusú kutatások "arany standardjaként" fogadtak el.

A WCTD-t jellemző alapfogalmak

Amint azt fentebb már leírtuk, ezeknek a patológiáknak a patogenezise az immunrendszer működési zavaraiból, valamint a saját sejtjeink bizonyos komponensei ellen védő antitestek termeléséből ered. Az ilyen sejteknek származásuk sajátossága miatt van egy második neve - autoantitestek. Az immunrendszer elégtelensége során nukleáris fehérjevegyületekkel, nukleinsavakkal és a citoplazma antigénjeivel érintkeznek, ami gyulladásos betegségek tüneteinek megjelenéséhez vezet, mint például:

• szerkezeti változások a szövetekben és szervekben;
• kifejezett indokolatlan fáradtság;
• izom- és ízületi fájdalom;
• a bőr károsodása;
• fogyás és mások.

Az antinukleáris antitestek (ANA) az autoimmun patológiák meglehetősen széles körében képződhetnek, de legvalószínűbb, hogy szisztémás lupus erythematosusban (SLE) jelennek meg.

Az ANF-et akkor kell bevenni, ha elhúzódó gyulladásos folyamat jelei vannak

Referencia! A statisztikák szerint a CTD-ben szenvedő betegek több mint 90%-a rendellenesen termel ilyen antitesteket. Jelenleg mintegy 200 fajukat tanulmányozták, amelyek általános nevet kaptak - az antinukleáris faktor. Főleg G osztályú immunglobulinok képviselik őket, de néha M vagy A is megtalálható.

Az antinukleáris faktor vérvizsgálatának lényege

Mielőtt belemerülne az ANF-ről szóló tanulmány elvégzésének sajátosságaiba, érdemes megjegyezni, hogy a technikát meglehetősen régen találták fel és kezdték el használni - a múlt század 60-as éveiben. De a diagnosztikai gyakorlatban csak a XX. század 80-as évek elején terjedt el a javulás után. A tudós Beck még 1961-ben laboratóriumi állatok sejtjeit használta szubsztrátként, és Tan csak 1982-ben használta a HEp-2 folyamatos emberi sejtvonalat az ANF keresésére.

Bár ennek a tesztnek a fő célja a lupus erythematosus diagnózisának felállítása, továbbra is univerzális technikának tekintik más kollagenózisok (MCTS) kezelésére. Ez utóbbiak közé tartozik:

• szkleroderma;
• dermatomyositis;
• noduláris periarteritis;
• krónikus aktív hepatitis stb.

Az egyik legkényelmesebb, és ezért a leggyakrabban használt módszer a betegek vérében az antinukleáris faktor meghatározására az indirekt immunfluoreszcencia. A vizsgálatot úgy hajtják végre, hogy vérszérumot alkalmaznak a humán gége HEp-2 adenokarcinóma transzplantálható epithelioid vonalának sejtjeire (amely bizonyos számú nukleáris antigént tartalmaz), antitestekkel ellátott jelölt konjugátum (vegyület) felhasználásával.

Ez a választás nem véletlenül történt - a HEp-2 sejtek nagyon kényelmes szubsztrát a bioanyag tanulmányozására. Meglehetősen nagy magjuk van, és laboratóriumi tárgylemezekre ültetve egyetlen rétegben nőnek. Más emberi sejtvonalak is használhatók szubsztrátként, de a sikeres morfológia és tenyésztés mindenképpen nélkülözhetetlen anyaggá teszi a HEp-2-t.

A diagnosztika során, amikor a beteg szérumát sejtszubsztráttal inkubálják, ANA jelenlétében kombinálják a megfelelő nukleáris antigénekkel. Az ANF HEp-2-vel való kötőhelyeit fluoreszceinnel (festékkel) jelölt konjugátum segítségével határozzuk meg. A bekövetkezett reakciók eredményeinek értékeléséhez lumineszcens mikroszkópot használnak, amely lehetővé teszi a keletkező szalagok jellegének és mértékének megkülönböztetését.

Fluoreszcens mikroszkóp laboratóriumi kutatásokhoz ANF

Referencia! A humán HEp-2, ellentétben az állatok szöveti fagyasztott metszeteivel, magasabb sejtosztódási sebességgel rendelkezik, ami lehetővé teszi a csak osztódás során expresszálódó antigének elleni antitestek kimutatását. Ezenkívül az emberi szubsztrátban nincs sejtmátrix, ami csökkenti a vizsgált lumineszcencia megjelenítésének minőségét.

Milyen antigéncsoportokat használnak a vizsgálatban?

Az anyagok megfejtésekor mindig figyelembe kell venni, hogy az ANA-spektrum a nukleoproteinek, ribonukleoproteinek, hisztonok, DNS és a sejtmag egyéb szerkezeti egységei elleni autoantitestek meglehetősen nagy csoportját tartalmazza. Ebből az következik, hogy a teszt funkcionalitása a sejtmag és a citoplazma komponensei elleni antitestek kimutatására irányul, amelyeket eredetileg SLE-ben azonosítottak.

Később a vizsgálat diagnosztikai lehetőségei kibővültek az ilyen antitestek más CTD-kben történő meghatározása miatt. A teljes ANA kimutatására szolgáló szűrési módszerekben általában egy bizonyos antigénkészletet használnak, amelyeket az autoimmun CTD fő markereinek tekintenek.

Ide tartoznak az IgG osztályba tartozó antitestek:

• SS-A (Ro) – nukleáris ribonukleoproteinek;
• SS-B (La) – nukleáris fehérjék;
• Scl-70, fehérje-enzim (topoizomeráz-1);
• natív kétszálú DNS;
• RNP/Sm, antigének komplexe;
• Jo-1, RNS-szintetáz enzim;
• CENP-B (Centromer)
• Hep-2 sejtek;
• mitokondriumok (PDC).

Az AHA gyakorlatilag ártalmatlan a szervezetre - nem képes behatolni az élő szövetekbe. De bizonyos esetekben antigén-antitest komplexekké egyesülhetnek, ami ennek eredményeként a szövetek szerkezeti pusztulásához vezet. Ilyen például a vese parenchyma károsodása SLE-ben. Mivel a CTD-ben több szerv is részt vesz a folyamatban, az ANA kimutatása nem kiemelt jelentőségű a diagnózis szempontjából, hanem csak bizonyos tünetek megerősítésének tekinthető.

ANF-elemzési képességek, százalékban kifejezve

Az eredmények tanulmányozása

Az összes szükséges eljárás elvégzése után - a bioanyag és annak laboratóriumi előkészítése a vizsgálathoz - az eredményeket értékelik és értelmezik. Ez magában foglalja az antitestek titerének (koncentrációjának) és a lumineszcencia típusának meghatározását. A diagnózis fontos paramétere az 1:160 feletti koncentrációindex. Például a reuma exacerbációja során meghaladhatja az 1:640-et, míg a remissziós időszakban 1:160-1:320-ra csökken.

A ragyogás típusa az ANA-célpontokat mutatja, ami különösen fontos klinikai pont, amely irányítja az orvos további intézkedéseit a diagnosztikai intézkedések felírásakor. A HEp-2 alkalmazásakor a sejtmagok fényének természete alapján a nukleáris festődés több mint 20 változatát határozzák meg, a bioanyagban jelenlévő antitestek típusától függően. A főbbek közé tartoznak a következő típusú ragyogás.

• Kerületi. A fény az anti-DNS antitestek jelenlétét jelzi, ami megerősíti az SLE-t. A perifériás típusú antigének fő típusai a hisztonfehérjék és a DNS.
• Diffúz (homogén). Ilyen ragyogás figyelhető meg SLE-ben, amelyet a vese szerkezetének károsodása és hasonló CTD-k, nephritis, scleroderma, valamint gyógyszer-indukálta SLE kísér. Az ilyen típusú antigéneket a dsDNS, a hisztonátok és a nukleoszómák képviselik.
• Nukleoláris (nukleáris). Ez a típus a scleroderma szisztémás formájára jellemző, és a betegekben antitestek jelenlétében határozzák meg - RNS polimeráz 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
• Citoplazmatikus. Ez a fajta megvilágítás ANA jelenlétét jelzi a tRNS szintetázokhoz, nevezetesen a Jo-1-hez, és polimiozitisben figyelhető meg.
• Szemcsés. Sjögren-szindrómában, fertőző mononukleózisban, vegyes CTD-ben (Sharp-szindróma, MCTD) és gyógyszer-indukálta lupus szindrómában határozzák meg. Az ilyen típusú antigének túlnyomórészt az SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP és PCNA.
• Nagy szemcsés. Jellemző a vegyes CTD-re, és sok tudós szerint az RNP antigén jelenlétéhez kapcsolódik.
• Finom szemcsés. Meghatározzák a ribonukleinsav fehérjék - ASSP (ACCP), SS-A, SS-B és mások - elleni antitestek jelenlétét. Az ilyen antitestek jellemzőek az SLE-re, valamint annak specifikus bőrformáira, a rheumatoid arthritisre, a sclerodermára, a polymyositisre, a Sjögren-szindrómára.
• Centromer. Ez a típus főként szklerodermában figyelhető meg. Bár egy vérmintában, különösen a diffúz CTD-ben szenvedő alanyokban, a leválasztott plazmában különböző nukleáris komponensek elleni antitestek kimutathatók.
• Pontzárványok a magban. Ezt a típust túlnyomórészt autoimmun májbetegségekben mutatják ki. Ezzel több fluoreszcens típus kombinálható, például nukleoláris és finomszemcsés, ami az Scl-70 elleni antitesteknek köszönhető.

Referencia! Megállapították, hogy a plazma bioanyag hígításának növekedésével a lumineszcencia paraméterek változhatnak, mivel sok antitestre jellemző az aktivitás változása különböző koncentrációkban.

Az eredményeket torzító tényezők

A vizsgálat során nyert adatok megbízhatóságát csak néhány olyan tényező befolyásolhatja, amely fals pozitív és hamis negatív eredményt is mutathat. Így a 60 év feletti idős betegeknél (a statisztikák szerint az esetek 10-37% -ában) és a lupust okozó gyógyszerek (egyes antibiotikumok, fogamzásgátlók, szulfonamidok, tiazid-diuretikumok) szedésekor felfelé eltolódással járó valószínűtlen válaszok figyelhetők meg.

Megjegyzendő, hogy a mellimplantátummal rendelkező nők 5-55%-ánál megnő az AHA-koncentráció szintje. A lefelé tolódással járó téves diagnózist glükokortikoid gyógyszerek - Prednizolon, Metipred vagy Dexametazon - alkalmazása okozhatja.