Ko je predao analizu RV imunoblot metodom. Imunobloting (detekcija antitijela u serumu pacijenata na određene antigene patogena)

MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 komplet reagensa je dizajniran da potvrdi detekciju antitela na pojedinačne proteine ​​(antigene) HIV-1 i/ili HIV-1 grupe O i/ili HIV-2 u ljudskom serumu ili plazma metodom imuno blot.

Prepoznatljive karakteristike:

  • Set reagensa "MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2" sadrži prečišćeni lizat virusnih proteina HIV 1 i peptida - HIV-2 gp36 antigenski determinat;
  • Omogućava otkrivanje antitela na HIV-1, HIV-1 grupu O, HIV 2 na jednoj traci;
  • Jednostavna procedura za pripremu i provođenje analiza;
  • Interna kontrola kvaliteta reakcije*
  • Maksimalna brzina analize (3 sata);
  • Mala zapremina testnog uzorka - 20 µl;
  • Ne zahtijeva dodatnu opremu za istraživanje;
  • Kvalitet kompleta je zagarantovan upotrebom ruskih i međunarodnih standardnih uzoraka**

* Interna kontrola kvaliteta je obezbeđena prisustvom:

  • interne kontrolne trake, omogućavaju kontrolu unošenja uzorka seruma ili plazme;
  • kontrolni negativni serum (K-);
  • kontrolni pozitivan serum (K+), koji omogućava identifikaciju traka otkrivenih na traci;
  • kontrola slabo pozitivnog seruma (K + cl), što omogućava kontrolu osjetljivosti kompleta reagensa.

**Osiguranje kvaliteta:

Karakteristike MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 kompleta reagensa određene su testiranjem uzoraka iz slučajnog uzorka donatora, pacijenata s dijagnozom HIV infekcije, komercijalnih panela za serokonverziju, standardnih panela i uzoraka koji „potencijalno ometaju određivanje” komponente.

Komplet reagensa ne daje lažno pozitivne rezultate u ispitivanju seruma standardnog panela koji ne sadrže antitela na HIV 1.2 i HIV-1 antigen ("Standard AT (-) HIV", br. FSR 2007/00953 od 10/ 25/2007). Specifičnost - 100%.

Dijagnostička specifičnost utvrđena je proučavanjem slučajnog uzorka od 200 davalaca iz različitih krvnih centara i klinika sa preliminarno potvrđenim odsustvom HIV-1, HIV-2 infekcije. Specifičnost u istraživanju slučajnog uzorka donora bila je 100%;

Specifičnost kompleta reagensa utvrđena je proučavanjem 250 uzoraka, uključujući uzorke seruma ili plazme dobijene od trudnica, hospitalizovanih pacijenata, pacijenata sa hepatitisom C i E, i uzoraka sa komponentama "potencijalno ometajućim određivanjem". Kada se koristi MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 komplet, nisu pronađeni lažno pozitivni rezultati za ove uzorke.

Dijagnostička osjetljivost je određena korištenjem:
- Boston Biomedica, Inc. Uzorci plazme HIV-1 panela (WWRB 301) iz različitih regiona koji sadrže različite podtipove HIV-1: grupa M (podtipovi A, B, C, D, E, F) i grupa O; osetljivost kompleta reagensa bila je 100%;

Osetljivost kompleta reagensa određena je u studiji međunarodnih panela za serokonverziju Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), kat. nrs. TRN 903, TRN 904, TRN 909, TRN 912, TRN 916, TRN 917, TRN 918, TRN 919, TRN 921, TRN 923, TRN 924, TRN 927, TRN 928, TRN 9930

Komplet reagensa detektuje antitela na HIV-1 u serumu standardnog panela koji sadrži antitela na HIV-1 (“Standard AT (+) HIV-1”, br. FSR 2007/00953 od 25. oktobra 2007.), detektuje antitela na HIV-2 u serumu standardnog panela koji sadrži antitela na HIV-2 („Standard AT (+) HIV-2“, br. FSR 2007/00953 od 25.10.2007.). Osetljivost - 100%.

Potvrda o registraciji br. FSR 2010/07958 od 13.07.2011. (važenje nije ograničeno)

spoj:

  • Imunosorbent. Bijele nitrocelulozne membranske trake sa pojedinačnim HIV-1 proteinima (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) adsorbiranim na njih metodom elektrotransfera i nanesenim na traku sa sintetičkim HIV-2 peptidom, analog gp36 proteina i humanog anti-IgG (interna kontrola) - 18 kom;
  • K- - kontrolni negativni serum. Ljudski krvni serum koji ne sadrži antitela na HIV-1,2, HCV, HIV antigen, HBsAg inaktivira se zagrevanjem na 560C; prozirna svijetložuta tekućina - 1 epruveta (0,08 ml). Sadrži konzervanse: timerosal i natrijum-azid;
  • K+ - kontrolni pozitivni serum. Ljudski krvni serum koji sadrži antitela na HIV-1,2 (titar ne manji od 1:10000), ne sadrži HBsAg, HIV antigen, antitela na HCV, inaktiviran zagrevanjem na 560C; providna svijetložuta tekućina - 1 epruveta (0,08 ml) Sadrži konzervanse: timerosal i natrijum-azid;
  • K+sl - kontrolni slabo pozitivan serum. Ljudski krvni serum koji sadrži antitela na HIV-1,2 (titar ne veći od 1:200), ne sadrži HBsAg, HIV antigen, antitela na HCV, inaktiviran zagrevanjem na 560C; prozirna svijetložuta tekućina - 1 epruveta (0,08 ml). Sadrži konzervanse: timerosal i natrijum-azid;
  • RROKk (x10) - rastvor za razblaživanje uzoraka i konjugata. Koncentrat - Tris pufer koji sadrži prethodno tretirani normalni kozji serum; neprozirna siva tečnost - 1 bočica (10 ml). Sadrži konzervans: timerosal;
  • PRk (x20) - otopina za pranje. Koncentrat - Tris pufer koji sadrži Tween-20; bistra bezbojna tečnost - 1 bočica (70 ml). Sadrži konzervans: timerosal;
  • Konjugirati. Kozja antitijela na ljudski IgG, konjugirana sa alkalnom fosfatazom; bistra bezbojna tečnost - 1 epruveta (0,06 ml);
  • Podloga (rastvor za bojenje). Rastvor 5-bromo-4-fluoro-indolil-fosfata (BCIP) i nitrozin tetrazolijuma (NBT); prozirna svijetložuta tekućina - 1 bočica (50 ml);
  • Prašak za imunoblotiranje. Obrano mleko u prahu - amorfni beli ili svetlo žuti prah - 5 pakovanja x 1g;
  • Tableta s poklopcem za postavljanje reakcije - 2 komada;
  • Plastična pinceta - 1 kom.

Imuni blot (imunoblot, Western blot, Western blot)- kombinuje enzimski imunosorbentni test (ELISA) s preliminarnim elektroforetskim prijenosom virusnih antigena na nitroceluloznu traku (traku).

U ovom prekrasnom naučnom nazivu, “blot” se najvjerovatnije prevodi kao “blot”, a “western” kao “zapadni” odražava smjer distribucije ove “mrlje” na papiru s lijeva na desno, odnosno na geografskoj karti, ovo odgovara smjeru od zapada prema istoku." Suština metode "imune blot" je da se imunoenzimska reakcija ne provodi sa mješavinom antigena, već s HIV antigenima, prethodno raspoređenim imunoforezom u frakcije smještene prema molekularnoj težini na površini nitrocelulozne membrane. Kao rezultat toga, glavni proteini HIV-a, nosioci antigenskih determinanti, distribuiraju se po površini u obliku odvojenih traka, koje se pojavljuju tokom enzimskog imunoeseja.

Imunoblot uključuje nekoliko faza:

Priprema trake. Virus imunodeficijencije (HIV), koji je prethodno pročišćen i uništen do svojih sastavnih komponenti, podvrgava se elektroforezi, dok se antigeni koji čine HIV razdvajaju po molekularnoj težini. Zatim, upijanjem (analogno istiskivanju viška mastila na "bloteru"), antigeni se prenose na traku nitroceluloze, koja sada sadrži spektar antigenskih traka karakterističnih za HIV, nevidljivih za oko.

Uzorak studije. Ispitni materijal (serum, krvna plazma pacijenta, itd.) se nanosi na nitroceluloznu traku, a ako u uzorku postoje specifična antitijela, ona se vezuju za striktno odgovarajuće (komplementarne) antigene trake. Kao rezultat naknadnih manipulacija, rezultat ove interakcije se vizualizira - postaje vidljiv.

Interpretacija rezultata. Prisustvo traka u određenim područjima nitrocelulozne ploče potvrđuje prisustvo u ispitivanom serumu antitela na strogo definisane HIV antigene.

    Traka A - Pozitivna kontrola

    Traka B - Slaba pozitivna kontrola

    Traka C - negativna kontrola

    Strip D - Pozitivan uzorak (otkrivena antitijela na HIV-1)

Trenutno je imunološki blot (imunoblot) glavna metoda za potvrđivanje prisustva antitijela specifičnih za virus u test serumu. U nekim slučajevima HIV infekcije, prije serokonverzije, specifična antitijela se efikasnije otkrivaju imunoblotingom nego ELISA-om. Imuno blot studija je otkrila da se antitijela na gp 41 najčešće otkrivaju u serumima oboljelih od AIDS-a, a otkrivanje p24 kod osoba pregledanih u profilaktičke svrhe zahtijeva dodatne studije na prisustvo HIV infekcije. Imunoblot test sistemi zasnovani na genetski modifikovanim rekombinantnim proteinima pokazali su se specifičnijim od konvencionalnih sistema baziranih na pročišćenom lizatu virusa. Pri korištenju rekombinantnog antigena formira se ne difuzna, već jasno definirana uska traka antigena, koja je lako dostupna za obračun i procjenu.

Serum osoba inficiranih HIV-1, detektovati antitela na sledeće glavne proteine ​​i glikoproteine ​​- proteini strukturnog omotača (env) - gp160, gp120, gp41; jezgra (gag) - p17, p24, p55, kao i enzimi virusa (pol) - p31, p51, p66. Za HIV-2, tipična su antitela na env - gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol-p68.

Među laboratorijskim metodama neophodnim za utvrđivanje specifičnosti reakcije, najveću prepoznatljivost ima detekcija antitijela na proteine ​​ovojnice HIV-1 - gp41, gp120, gp160 i HIV-2 - gp36, gp105, gp140.

SZO smatra serume pozitivnim ako se imunoblotingom otkriju antitijela na bilo koja dva HIV glikoproteina. Prema ovim preporukama, ako dođe do reakcije samo sa jednim od proteina ovojnice (rp 160, rp 120, rp 41) u kombinaciji ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra sumnjivim i preporučuje se drugi test pomoću kompleta iz druge serije ili iz druge kompanije. Ako nakon ovoga rezultat ostane sumnjiv, preporučuje se promatranje 6 mjeseci (istraživanje nakon 3 mjeseca).

Prisustvo pozitivne reakcije na antigen p24 može ukazivati ​​na period serokonverzije, jer se antitijela na ovaj protein ponekad pojavljuju prva. U ovom slučaju preporučuje se, u zavisnosti od kliničkih i epidemioloških podataka, da se studija ponovi sa uzorkom seruma uzetim najmanje 2 nedelje kasnije, a to je upravo slučaj kada su upareni serumi neophodni kod HIV infekcije.

Pozitivne reakcije sa gag i pol proteinima bez prisustva reakcije sa env proteinima mogu odražavati stadijum rane serokonverzije, a takođe mogu ukazivati ​​na HIV-2 infekciju ili nespecifičnu reakciju. Osobe sa takvim rezultatima nakon testiranja na HIV-2 ponovo se pregledaju nakon 3 mjeseca (unutar 6 mjeseci).

U praksi laboratorijske dijagnostike zaraznih bolesti ponekad postoji potreba za određivanjem antitijela ne na patogen općenito, već na određene njegove proteine ​​(antigene), odnosno spektar specifičnih antitijela. Ako se u tu svrhu koristi metoda enzimskog imunosorbentnog testa, tada je u tom slučaju potrebno izolirati i pročistiti potrebne antigene iz kulture patogena. Dobijeni proteini se nanose odvojeno na čvrstu fazu. U slučaju upotrebe ploče sa 96 jažica - u svakoj jažici jedna vrsta antigena. Specifična antitijela se zatim određuju indirektnom metodom.

Po prisustvu pozitivne reakcije u jažici sa jednim ili drugim antigenom, može se suditi o prisustvu odgovarajućih specifičnih antitela. Ovakvu vrstu enzimskog imunotest sistema nude proizvođači, međutim, zbog veće informativnosti i lakoće izvođenja same studije, metoda imunološkog blotinga (Western blot) je postala široko rasprostranjena.

Imunološki bloting omogućava otkrivanje antitijela u krvnom serumu istovremeno i u isto vrijeme različito na sve dijagnostički značajne proteine ​​patogena. Prevod sa engleskog Western blot znači western transfer (bukvalno - mrlja). Istorija ovog neobičnog pojma je sljedeća.

Naučnik po imenu Southern (E. Southern) je 1975. godine prvi predložio metodu za prijenos elektroforetski odvojenih fragmenata DNK iz gela na membranu. Prema autoru, metoda je nazvana Southern blot, što znači „južni transfer“. Metodu prijenosa RNA molekula, zauzvrat, stručnjaci su nazvali Northern blot - "sjeverni prijenos". Isprva iz šale, a onda se ovaj naziv fiksirao u službenoj naučnoj literaturi.

G. Toubin je 1979. objavio rezultate prvih eksperimenata na proteinskom blotingu. U nastavku tradicije "geografskih" naziva metoda za prijenos bioloških makromolekula, ova metoda je postala poznata kao "zapadni" prijenos - Western blot.

U prvoj fazi ove metode vrši se elektroforetsko odvajanje mješavine proteina patogena u poliakrilamidnom gelu u prisustvu natrijum dodecil sulfata (SDS). SDS, budući da je surfaktant, jednolično obavija proteinske molekule i daje im svima negativan naboj približno jednake veličine. Stoga se molekule kreću u električnom polju u jednom smjeru, a brzina kretanja ovisi samo o veličini molekula (molekularnoj težini) proteina.

Kao rezultat elektroforetskog postupka dobiva se gel ploča u čijoj se debljini nalaze proteini u obliku odvojenih tankih linearnih zona. U smjeru kretanja podijeljeni su sljedećim redoslijedom: proteini velike molekularne težine, oko 120-150 kDa, bliže su startu, a proteini mase 5-10 kDa su napredovali dalje do cilja. U drugoj fazi, gel ploča se postavlja na sloj nitroceluloze i ova struktura se postavlja između elektroda DC izvora. Pod djelovanjem električnog polja, proteini teku iz poroznog gela do gušće membrane, gdje su čvrsto fiksirani.


Nastala mrlja se tretira otopinom za blokiranje koja sadrži antigenski indiferentne proteine ​​i/ili nejonske deterdžente (Tween 20), koji blokiraju mjesta na membrani bez antigena. List membrane se zatim reže na uske trake tako da svaka traka sadrži sve antigenske frakcije. Opisane korake provodi proizvođač.

Komercijalni test sistemi za detekciju antitela imunološkim blotingom sadrže mrlje (trake ili trake) spremne za analizu. Korisnik određuje cijeli spektar specifičnih antitijela na proteine ​​patogena prema shemi indirektne metode. Kao hromogen za provođenje kolorne (enzimske) reakcije koristi se topljiva bezbojna tvar čiji produkt dobiva boju, postaje nerastvorljiv i taloži se (taloži) na nitrocelulozi.

Kao rezultat uzastopnih imunoloških i enzimskih reakcija, u prisustvu antitijela na proteine ​​patogena u uzorku testa, na mrlji se pojavljuju tamne poprečne pruge, čija je lokacija u zoni određenih proteina patogena. Svaka takva traka ukazuje na prisustvo specifičnih antitela na odgovarajući antigen. Rezultat studije provedene metodom imunološkog blotinga izdaje se u obliku liste antitijela na specifične proteine ​​patogena. Na primjer: "otkrivena su antitijela na proteine ​​p17 i p24."

Nitrocelulozne mrlje nakon razvoja mogu se dugo čuvati u osušenom obliku. Međutim, intenzitet boje je značajno oslabljen. Mokre mrlje se mogu fotografisati ili se pomoću skenera njihova grafička slika može uneti u memoriju personalnih računara. Posebni kompjuterski programi omogućavaju vam da obradite rezultate i brzo pratite dinamiku spektra antitijela tokom dinamičkog praćenja

IMMUNOBLOT(Western blot) - metoda laboratorijskog ispitivanja krvnog seruma na prisustvo antitijela na HIV; to je precizniji test od ELISA i koristi se za potvrdu rezultata ELISA. ELISA - enzimski imunosorbentni test (ELISA) - laboratorijski test koji vam omogućava da odredite prisustvo antitijela na HIV u krvi; Test na HIV antitela.

Prema preporuci SZO, imunobloting (western blot) se koristi u dijagnostici HIV infekcije kao dodatna stručna metoda, koja treba da potvrdi rezultate ELISA. Ova metoda se obično koristi za dvostruku provjeru pozitivnog ELISA rezultata, jer se smatra osjetljivijom i specifičnijom, iako složenijom i skupljom.

Imunoblotiranje kombinuje enzimski imunotest (ELISA) s preliminarnim elektroforetskim odvajanjem virusnih proteina u gelu i njihovim prijenosom na nitroceluloznu membranu. Imunoblot procedura se sastoji od nekoliko faza (). Prvo, prethodno pročišćen i uništen do svojih sastavnih komponenti, HIV se podvrgava elektroforezi, dok su svi antigeni koji čine virus razdvojeni po molekularnoj težini. Zatim se blotiranjem antigeni prenose iz gela na traku nitroceluloze ili najlonski filter, koji sada sadrži spektar proteina karakterističan za HIV, nevidljiv za oko. Zatim se ispitni materijal (serum, plazma pacijenta itd.) nanosi na traku, a ako u uzorku postoje specifična antitijela, ona se vezuju za trake proteina antigena koji im striktno odgovaraju. Kao rezultat naknadnih manipulacija (kao ELISA), rezultat ove interakcije se vizualizira - postaje vidljiv. Prisustvo pruga na određenim područjima trake potvrđuje prisustvo u ispitivanom serumu antitela na strogo definisane antigene HIV-a.

Imunobloting se najčešće koristi za potvrdu dijagnoze HIV infekcije. SZO smatra serume pozitivnim ako se imunoblotingom otkriju antitijela na bilo koja dva proteina ovojnice HIV-a. Prema ovim preporukama, ako postoji reakcija samo sa jednim od proteina ovojnice (gp160, gp120, gp41) u kombinaciji sa ili bez reakcije s drugim proteinima, rezultat se smatra sumnjivim i preporučuje se druga studija korištenjem kompleta od druge serije ili druge kompanije. Ako nakon toga rezultat ostane sumnjiv, studije se nastavljaju svaka 3 mjeseca.

Za imunoblotiranje, u prvoj fazi, proteini sadržani u krvnom serumu se odvajaju u gelu prema njihovoj molekularnoj težini i naboju pomoću električnog polja (metoda gel elektroforeze). Zatim se na gel nanese nitrocelulozna ili najlonska membrana i "nakvasi" (ovo je upijanje). To se izvodi u posebnoj komori, koja omogućava potpuni prijenos materijala sa gela na membranu. Kao rezultat toga, obrazac rasporeda proteina koji je bio na gelu se reproducira na membrani (blot), kojom se onda može lako manipulirati. U početku se membrana tretira antitijelima na željeni antigen, a nakon ispiranja nevezanog materijala dodaje se radioaktivno obilježen konjugat koji se specifično vezuje za antitijela (kao u ELISA-i). Lokacija rezultirajućeg kompleksa konjugata obilježenog antigenom-antitijelom određena je autoradiografijom pomoću rendgenskog filma. Nakon njegove manifestacije, sve postaje jasno da li postoje antigeni u krvi ili ne.

Opis

Metoda određivanja Imunoblot.

Materijal koji se proučava Serum

Mogućnost kućne posjete

Antinuklearna antitijela su porodica autoantitijela koja se vezuju za ribonukleinske kiseline i njihove povezane proteine. Javljaju se kod više od 90% pacijenata sa difuznim bolestima vezivnog tkiva, a često se uočavaju i kod autoimunih bolesti jetre i niza drugih stanja. Do danas je okarakterisano oko 200 varijanti ove porodice autoantitijela, ali se ne mogu sve koristiti u kliničkoj praksi.

Imunoblot antinuklearnih antitijela omogućava istovremeno proučavanje 15 glavnih tipova antinuklearnih antitijela u jednom testu, što osigurava diferencijalnu dijagnozu glavnih sistemskih reumatskih bolesti. Svaki tip autoantitijela otkrivenog imunoblotom obično se opaža kod pacijenata s karakterističnom kliničkom slikom, tako da spektar autoantitijela omogućava ne samo dijagnosticiranje bolesti, već i utvrđivanje rizika od razvoja određenih kliničkih manifestacija.

Imunoblot antinuklearnih antitijela preporučljivo je koristiti u drugoj fazi serološkog pregleda s pozitivnim rezultatom drugih testova koji ukazuju na prisutnost antinuklearnih antitijela u serumu ispitanika. Ovi testovi uključuju određivanje antinuklearnih antitijela (ELISA skrining), detekciju antinuklearnog faktora (ANF) na Hep2 ćelijama (), antinuklearnih antitijela i antitijela na nuklearni antigen koji se može ekstrahirati (ENA,).

Imunoblot metoda antinuklearnih antitijela u dijagnostici sistemskih reumatskih bolesti karakterizira visoka klinička specifičnost. Ali specifičnost antinuklearnih antitijela, čak i pri visokim titrima ANF (), nije uvijek moguće utvrditi, budući da određeni broj antinuklearnih antitela još uvijek ostaje neobilježen. Negativan rezultat imunoblota u ovom slučaju ne isključuje dijagnozu sistemskih reumatskih bolesti. Brojna antinuklearna antitijela mogu se otkriti korištenjem imunoblota - panela autoantitijela specifičnih za miozitis () i imunoblota - panela autoantitijela kod skleroderme ().

Književnost

  1. Lapin S.V. Totolyan A.A. Imunološka laboratorijska dijagnostika autoimunih bolesti / Izdavačka kuća "Čelovek", Sankt Peterburg - 2010. 272 ​​str.
  2. Nasonov E.L., Aleksandrova E.N. Savremeni standardi za laboratorijsku dijagnostiku reumatskih bolesti. Kliničke smjernice / BHM, M - 2006.
  3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantitijela u autoimunim bolestima specifičnim za organ: Dijagnostička referenca/ PABST, Drezden - 2011. 300 str.
  4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantitela u sistemskim autoimunim bolestima: Dijagnostička referenca/ PABST, Drezden - 2007. 300 str.
  5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science - 2006. 862 str.
  6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Dijagnostički kriteriji u autoimunim bolestima / Humana Press - 2008. 598 str.
  7. Upute za komplet reagensa.

Trening

Poželjno je izdržati 4 sata nakon posljednjeg obroka, nema obaveznih zahtjeva.

Indikacije za termin

Test je indiciran za dijagnozu i diferencijalnu dijagnozu sljedećih stanja:

  • sistemski eritematozni lupus;
  • subakutni kožni lupus i druge vrste kožnog lupusa;
  • mješovita bolest vezivnog tkiva;
  • Sjogrenov sindrom i pridružene bolesti;
  • difuzna i lokalizovana sklerodermija, CREST sindrom;
  • upalne miopatije (polimiozitis i dermatomiozitis);
  • juvenilni kronični artritis;
  • autoimuni hepatitis;
  • primarna bilijarna ciroza i sklerozirajući holangitis;
  • upotreba ovog testa je indicirana za detekciju visokih titara antinuklearnog faktora, antinuklearnih antitijela, antitijela na ekstrahirani nuklearni antigen, antitijela na DNK, antitijela na nukleozome i antifosfolipidnih antitijela.

Interpretacija rezultata

Tumačenje rezultata testa sadrži informacije za ljekara koji prisustvuje i nije dijagnoza. Informacije u ovom odjeljku ne bi se trebale koristiti za samodijagnozu ili samoliječenje. Tačnu dijagnozu postavlja doktor, koristeći kako rezultate ovog pregleda, tako i potrebne informacije iz drugih izvora: anamneza, rezultati drugih pregleda itd.

Jedinice mjere: kvalitativni test, rezultat se prikazuje u obliku "detektovano" ili "nije pronađeno".

Kada se detektuje traka koja karakteriše prisustvo bilo koje vrste antitela, intenzitet boje trake se dodatno opisuje brojem pluseva („križeva“) za svaki od identifikovanih tipova antitela. Povećanje stepena pozitivnosti indirektno odražava sadržaj i afinitet autoantitijela.

Referentne vrijednosti: antitela na Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNA, histon, nukleosom , Rebro P, AMA-M2, Jo-1 nisu pronađeni.

Rezultat određivanja autoantitijela je predstavljen u "križenjima" za svaki odgovarajući antigen. Povećanje stepena seropozitivnosti indirektno odražava sadržaj i afinitet autoantitijela. Opcije rezultata seropozitivnosti su navedene u nastavku:

  1. Antitijela nisu pronađena.
  2. +/- - granični rezultat;
  3. + - nizak sadržaj autoantitijela na specifični antigen;
  4. ++ je prosječan sadržaj autoantitijela na određeni antigen;
  5. +++ - visok sadržaj autoantitijela na specifični antigen.

Glavne bolesti povezane s otkrivanjem antinuklearnih antitijela:

AntigenZnačenje
Sm (Smith)Specifični marker za sistemski eritematozni lupus (uključen u 10. kriterijum za SLE Američkog koledža za reumatologiju, ACR)
SS-A (Ro52)Zapaža se kod različitih autoimunih bolesti, češće kod sistemskog eritematoznog lupusa i njegovih kožnih oblika, sistemskih reumatskih oboljenja, reumatoidnog artritisa, autoimunih bolesti jetre i dr.
SS-A (Ro60)Sistemski eritematozni lupus, kožni oblici eritematoznog lupusa, fotosenzitivnost kod sistemskog eritematoznog lupusa, visok rizik od kongenitalnog eritematoznog lupusa i srčanih oboljenja fetusa. Glavni serološki indikator kod Sjogrenovog sindroma. Često se primećuje zajedno sa antitelima na SS-A (Ro52) antigen.
SS-BSjogrenov sindrom, sistemski eritematozni lupus.
PCNASistemski eritematozni lupus, rizik od lupus nefritisa.
ribozomi (Ribo P)Sistemski eritematozni lupus, rizik od oštećenja centralnog nervnog sistema.
NukleozomiSistemski eritematozni lupus, visok rizik od lupusnog glomerulonefritisa.
dvolančana DNKSpecifični marker sistemskog eritematoznog lupusa (uključen u 10. kriterijum SLE ACR), visok rizik od lupus nefritisa.
snRNP/SmMješovita bolest vezivnog tkiva, sistemski eritematozni lupus sa niskim rizikom od oštećenja bubrega, sklerodermija.
HistoniSistemski eritematozni lupus, lupus izazvan lijekovima, skleroderma.
Scl-70Sistemska skleroza sa difuznim lezijama kože i unutrašnjih organa.
PM-SclSklerodermija sa polimiozitisom.
CENP-BCREST sindrom sa sklerodaktilijom, telangiektazijama, potkožnim kalcifikacijama, Raynaudov sindrom, ezofagitis.
Jo-1Polimiozitis u obliku antisintetaznog sindroma.
AMA-M2Primarna bilijarna ciroza, Sjogrenov sindrom.