Kas yra, jei metodas. Kas yra IFA? ELISA metodas: esmė, principas, trūkumai

ELISA arba fermentinis imunologinis tyrimas reiškia serologinius tyrimus ir yra skirtas patologiniams mikroorganizmams kraujo serume aptikti ir diagnozuoti.

Analizuojant įvairias imunoglobulinų klasės bakterijoms: IgM- esant ūminiam patologiniam procesui ir IgG atsigavimo stadijoje, kuri kai kuriais atvejais išlieka visą gyvenimą.

Atliekant fermentinį imunologinį tyrimą, nustatomos įvairios etiologijos ligos:

Taip pat ELISA yra skirtas sifiliui diagnozuoti, kai teigiami rezultatai patvirtinami RV metodu, ir leidžia stebėti gydymo efektyvumą patologiniame procese.

Fermentinis imunologinis tyrimas skiriamas pagal indikacijas (jei įtariamas užsikrėtimas mikroorganizmais), jis privalomas nėštumo metu ir prieš chirurgines operacijas, siekiant nustatyti įvairių bakterijų pernešimą.

Analizės procedūra atliekama ryte tuščiu skrandžiu, medžiaga (kraujas) paimama iš venos. Diagnostinio tyrimo rezultatai ruošiami iki 10 dienų.

Teigiamas ELISA

Teigiamas ELISA rezultatas patvirtinamas IgG ir IgM imunoglobulinų buvimu. Aptikti titrai kraujyje IgM visada rodo ligą progresuojančioje stadijoje sveikam žmogui šių antikūnų nėra.

O IgG rodo ankstesnę infekciją arba patogeninių mikroorganizmų, kurių kai kurie nedideli kiekiai laikomi normaliais, pernešimą. Pavyzdžiui, streptokokų ir stafilokokų bakterijų yra kiekvieno žmogaus organizme.

Sifilis

IgM antikūnai sergant sifiliu aptinkami praėjus 2 savaitėms po užsikrėtimo ir rodo pirminio, antrinio ar įgimto epizodo buvimą, gydant jie išnyksta maždaug po šešių mėnesių, negydant – po 18 mėnesių. Jei vienu metu nustatomi abiejų tipų imunoglobulinai, patvirtinamas sifilis ūminėje fazėje. Sergantiems žmonėms IgG antikūnai prieš sifilį išlieka serume visą gyvenimą.

Virusinis hepatitas

IgM iki virusinio hepatito dažnai nustatomi net ligos inkubaciniu periodu, kol nepasireiškia pirmieji pasireiškimai ir išlieka ligos eigoje, po gydymo jų nenustatoma. Išimtis yra virusinis hepatitas C, kurio IgM aptinkamas tiek aktyvioje, tiek latentinėje ar lėtinėje stadijoje.

IgG antikūnų prieš hepatitą A gali būti net ir sveikiems žmonėms, o tai yra dėl infekcijos ar susilpnėjusio imuniteto, o sveikiems žmonėms IgG prieš hepatitą B, C ir D nepastebima.

CMVI

CMVI platinamas beveik visur ir nekelia pavojaus visuomenės sveikatai. Tačiau ji neša mirtiną pavojus naujagimiui ir vaisius intrauterinės infekcijos metu.

IgM antikūnų prieš citomegalovirusą aptikimas rodo pirminę infekciją arba latentinės fazės suaktyvėjimą. IgG titrai sveikiems žmonėms išlieka 10 metų.

Herpes

Sveikiems žmonėms herpeso viruso antikūnų paprastai nėra. IgM kiekis rodo ūminę ligos fazę, IgG – latentinę (šiuo atveju žmogus yra infekcijos nešiotojas). Turėdami IgG iki herpeso, turėtumėte žinoti, kad virusas gali bet kada suaktyvėti nuo latentinės stadijos iki progresuojančios.

Vėjaraupiai

Sergant vėjaraupiais ir 2 metus po gydymo IgM klasės imunoglobulinai išlieka kraujyje. Paprastai sveikiems žmonėms vėjaraupių antikūnai neaptinkami.

Stafilokokų ir streptokokų sukeltos ligos

Visi žmonės turi imunoglobulinų stafilokokams ir streptokokams. Todėl šių bakterijų grupių sukeltą patologinį procesą galima diagnozuoti atliekant dvigubo fermento imunologinį tyrimą. Jei titrai padidėja pakartotinai atliekant ELISA (vieną savaitę po pirmosios), analizė laikoma patvirtinta.

Chlamidija

Nustačius chlamidiją, rodomas teigiamas rezultatas IgM titrai 1:8 ir aukščiau ir klasė IgG – 1:64 ir aukščiau, kurios didėja ligos eigoje ir pasiekia aukštas vertes. Pavyzdžiui, vaikams, sergantiems chlamidine pneumonija, titrai pakyla iki 1:2000 – 1:4000. IgM buvimas rodo chlamidijų aktyvumą, praėjus kuriam laikui po užsikrėtimo kraujyje aptinkami IgG globulinai.

Neigiamas fermentinis imunologinis tyrimas rodo nėra IgM antikūnų. Nustatyti IgG ne visais atvejais laikomi diagnostinio tyrimo patvirtinimu, jie dažnai išlieka keletą metų po užsikrėtimo, kartais visą gyvenimą.

Po sifilio, infekcinės mononukleozės, imunoglobulinų IgG išlieka visą gyvenimą ir nustatomi kraujo serume. 10 metų išlieka CMVI, tymų, raudonukės, toksoplazmozės mikroorganizmai.

Amebiazės pavadinimai išlieka nuo kelių mėnesių iki kelerių metų. Antikūnai prieš stafilokokų ir streptokoko bakterijas yra nustatomi absoliučiai visiems žmonėms nedideliu kiekiu.

Minėtais atvejais IgG imunoglobulinų nustatymas po praeitų ligų leidžia ELISA rezultatus vertinti kaip neigiamus.

Norma nėštumo metu

Pirmąjį nėštumo trimestrą kiekvienai moteriai atliekamas išsamus kūno tyrimas, kuris apima fermentų imuninį tyrimą.

Toksoplazmozės, CMVI, chlamidijų, 2 tipo (lytinių organų) pūslelinės, raudonukės, ureaplazmos ir mikoplazmos tyrimai yra privalomi, nes šios ligos kelia rimtą grėsmę vaisiaus vystymuisi. Jie gali prasiskverbti į vaiko kūną, aplenkdami placentos barjerą.

Ir jie kelia ypatingą pavojų visame pasaulyje pirmasis nėštumo trimestras ir beveik visada veda prie intrauterinė vaisiaus mirtis ir savaiminis persileidimas.

Minėtų ligų problema ta, kad jos dažnai pasireiškia besimptomėje stadijoje, be matomų klinikinių apraiškų, o nustatyti jas įmanoma tik atliekant fermentinį imuninį tyrimą.

Gerus analizės rezultatus galima pasakyti, jei serume neaptinkami mikroorganizmai. Nustatyti IgG rodo virusų nešiojimą ir reikalauja nuolatinio moters stebėjimo, kad staigaus paūmėjimo atveju būtų laiku suteikta terapija. teigiamas IgM signalizuoja apie progresuojantį patologinį procesą ir reikalauja nedelsiant pašalinti patogeną.

Pavadinimo aptikimas IgG nuo raudonukės rodo ankstesnę ligą ir yra norma nėštumo metu. IgG į CMVI taip pat nekelia ypatingos grėsmės vaisiui, tačiau neatmetama ir paūmėjimo galimybė (pasireiškimo dažnis, maždaug 1-2%).

Ypatingą grėsmę kelia IgG buvimas 2 tipo herpeso virusui arba genitalijų (HSV2) virusui, nes gimdymo metu paūmėjimo rizika žymiai padidėja. Nėštumo laikotarpiu ūminė fazė pasireiškia 0,9% atvejų. 40% atvejų vaisiaus nugalėjimas herpeso virusu įvyksta per lytinius organus ir 50% sukelia mirtį.

Sergant toksoplazmoze, IgM gali išlikti iki 2 metų po gydymo. Vaisiaus infekcijos rizika šiuo atveju yra 17% pirmąjį trimestrą ir padidėja iki 60% trečiąjį, nes pagrindinis infekcijos kelias yra transplacentinis. Atskleista IgG iki toksoplazmozės daugelis ekspertų linkę tai vertinti kaip neigiamą rezultatą, kuris praktiškai nekelia grėsmės nėštumo eigai.

ELISA – tai modernus laboratorinis tyrimas, kurio metu ieškoma specifinių kraujo antikūnų (arba antigenų) konkrečioms ligoms, siekiant nustatyti ne tik ligos etiologiją, bet ir ligos stadiją.

1. ieškoti specifinių antikūnų prieš bet kokią infekcinę ligą;
2. bet kokių infekcinių ligų antigenų paieška;
3. paciento hormoninės būklės tyrimas;
4. autoimuninių ligų buvimo tyrimas.

Kaip ir bet kuris laboratorinės diagnostikos metodas, ELISA turi savo privalumų ir trūkumų. Metodo pranašumai apima:

1. didelis metodo specifiškumas ir jautrumas (daugiau nei 90%);
2. gebėjimas nustatyti ligą ir sekti proceso dinamiką, tai yra lyginti antikūnų kiekį skirtingais laiko intervalais;
3. šio tyrimo prieinamumas ir greitis;
4. neinvazinis medžiagos mėginių ėmimo metodas nėra tyrimas;

Metodo trūkumas yra tai, kad analizės metu galima nustatyti ne ligos sukėlėją, o tik imuninį atsaką į jį (antikūnus).

ELISA metodo esmė

Yra keletas ELISA tipų: tiesioginis, netiesioginis, blokuojantis metodas, konkurencinis. Tačiau praktikoje dažniausiai naudojamas heterogeninis kietosios fazės imunologinis tyrimas arba ELISA.

Su fermentais susieto imunosorbento tyrimo pagrindas yra antigeno ir antikūno imuninė reakcija susidarant imuniniam kompleksui, dėl kurios pasikeičia specifinių antikūnų paviršiuje esančių žymenų fermentinis aktyvumas.

Tiesą sakant, šį procesą galima suskirstyti į kelis etapus:

1. tyrimo sistemos šulinių paviršiuje yra išgrynintas tam tikro patogeno antigenas. Pridėjus gyvūno kraujo serumo, tarp šio antigeno ir norimo antikūno įvyksta specifinė reakcija;
2. toliau į duobutę įpilama specialaus chromogeno (konjugato, pažymėto peroksidaze). Vyksta fermentinė reakcija, dėl kurios tabletės duobutėje susidaro spalvota medžiaga. Jo spalvos intensyvumas priklauso nuo imunoglobulinų (antikūnų) kiekio gyvūno serume;
3. Toliau seka rezultato įvertinimas. Daugiakanalio spektrofotometro pagalba tiriamos medžiagos optinis tankis lyginamas su kontrolinių mėginių optiniu tankiu ir rezultatai apdorojami matematiškai. Antikūnų kiekis paciente tiesiogiai priklauso nuo tam tikros duobutės optinio tankio aukščio.

Reikia atsiminti: kiekvienai bandymų sistemai sukuriami individualūs rodikliai, atsižvelgiant į rezultatus, normos ir patologijos rodiklius („referencinės vertės“). Į tai reikėtų atsižvelgti vertinant kiekvieno konkretaus tyrimo rezultatus.

Nekorektiška vienos laboratorijos rezultatus aiškinti iš kitos laboratorijos „referencinių verčių“. Taip pat neteisinga lyginti skirtingų laboratorijų rezultatus tarpusavyje.

Vertinant konkrečių infekcijų rezultatus, svarbi aptiktų antikūnų klasė ir jų skaičius. Nuo to priklauso ne tik infekcijos etiologijos klausimas, bet ir numatoma ligos stadija (ūminė, lėtinė), taip pat aktyvios infekcijos (ūminės ar lėtinės paūmėjimo) buvimas tyrimo metu. .

Koks apytikslis antikūnų atsiradimo laikas?

Pirmieji antikūnai yra IgM. Jas galima nustatyti praėjus 1-3 savaitėms po galimos infekcijos, kuri apibūdina ūminę infekcinio proceso fazę. Antroji IgM antikūnų atsiradimo situacija yra lėtinio proceso paūmėjimas. IgM cirkuliuoja vidutiniškai apie 3 mėnesius, vėliau jų skaičius palaipsniui nyksta. Tačiau kai kuriems pacientams IgM pėdsakai gali būti aptikti per 1–2 metus nuo užsikrėtimo.

Nuo 4 savaitės po užsikrėtimo pradeda atsirasti IgG antikūnų. Daugumoje infekcijų jų titras laipsniškai didėja iki maksimumo skirtingu laiku (vidutiniškai po 1,5-2 mėnesių), tada titras išlieka žemas ir rodo imunitetą. Kai kurių ligų atveju IgG lygis nėra aukštas.

Antikūnų aptikimo parinktys

• Atskirai aptikti IgM antikūnai rodo pirminę infekciją.
• Vienu metu IgM ir IgG nustatymas kraujyje būdingas pirminei infekcijai per pastaruosius 2-3 mėnesius, taip pat lėtinės ligos paūmėjimo metu.
• IgG aptikimas atskirai gali rodyti ir imunitetą ligai, ir lėtinę infekciją. Antroje situacijoje svarbus ir antikūnų kiekis (titras), ir šio titro pokytis laikui bėgant. Paprastai tyrimai atliekami kas 2-4-6 savaites.

ELISA arba fermentinis imunologinis tyrimas yra modernus būdas nustatyti daugelį patologijų, įskaitant ir infekcinio pobūdžio. Tyrimas atliekamas laboratorijoje. Pagrindinis technikos tikslas – aptikti antikūnus, jų buvimas rodo patogeninių agentų įsiskverbimą į organizmą. Šiuolaikinė medicina naudoja ELISA analizę daugeliui ligų diagnozuoti ir trečiųjų šalių junginiams nustatyti.

ELISA analizė: kada ir kaip ji atliekama

ELISA metodu specialistai gali nustatyti specifinių antikūnų (imunoglobulinų) buvimą kraujo serume ir nustatyti antigenus. Imunoglobulinai susidaro dėl sudėtingų nervinių procesų, kuriuos vykdo apsauginės organizmo funkcijos. Jie yra natūrali imuninės sistemos reakcija į svetimkūnių įsiskverbimą. Kiekvienam patogeno tipui gaminami specifiniai antikūnai.

Svarbu: esant tam tikriems kompleksams, fermento imunologinio tyrimo metodas leidžia nustatyti patogeno tipą žmogaus organizme.

ELISA diagnozė atliekama siekiant nustatyti šias ligas:

• pūslelinė;
• virusinio tipo hepatitas;
• Epstein-Barr virusas (4 tipo herpesas);
• citomegalovirusas.

Kraujo tyrimas atskleidžia pagrindines patogenines bakterijas, kurios provokuoja sifilio, ureaplazmozės ir trichomonozės vystymąsi. Atlikdami analizę, ekspertai nustato antikūnus prieš 600 tipų alergenų. Rengiantis organų transplantacijai tikslinga atlikti fermentinį imuninį tyrimą.

Svarbu: kai kuriais atvejais ELISA yra papildomas metodas onkologijai žmogaus organizme nustatyti.

Analizė atliekama tik laboratorijoje. Tyrimams veninis kraujas imamas iš kubitalinės venos. Analizės rezultatai bus gauti kitą dieną. Norėdami gauti patikimos informacijos, ekspertai rekomenduoja laikytis pasirengimo ELISA taisyklių:

• vieną dieną prieš tyrimą būtina atsisakyti aštraus ir rūkytų maisto produktų vartojimo;
• alkoholis yra draudžiamas;
• kraujas duodamas ryte tuščiu skrandžiu;
• prieš tyrimą būtina atmesti bet kokį fizinį ir emocinį stresą;
• patartina mesti rūkyti.

Kokios patologijos nustatomos fermentų imunologiniu tyrimu

Naudodamas fermentų imunologinį tyrimą, specialistas nustato įvairių klasių imunoglobulinus, kurių buvimas rodo patologinių procesų vystymąsi organizme. Taigi, pagrindiniai ELISA rodikliai yra IgM ir IgG. IgM imunoglobulino buvimas rodo ūminio patologinio proceso vystymąsi. IgG rodiklis kraujyje būdingas atsigavimo stadijai.

Atlikdami ELISA analizę, specialistai nustato daugybę pavojingų ligų. Jie apima:

Svarbu: sifiliui patvirtinti skiriamas ELISA tyrimas, kai dovanojant kraują RV gauti teigiamas rezultatas.

Laiku atlikta diagnozė leidžia stebėti terapijos efektyvumą ir, jei reikia, jį koreguoti.

Analizės iššifravimas: teigiamas ir neigiamas atsakymas

ELISA rezultatus interpretuoja specialistas, remdamasis gautais duomenimis. Atsakymas gali būti teigiamas arba neigiamas.

Teigiamas ELISA

Rezultatas laikomas teigiamu, jei tyrimo metu kraujyje buvo aptikta IgG ir IgM klasių imunoglobulinų. Pateiktų komponentų buvimas rodo šių ligų vystymąsi:

• sifilis;
• virusinio tipo hepatitas;
• CMVI (citomegalovirusas);
• pūslelinė;
• vėjaraupiai;
• ligos, kurias sukelia stafilokokai ir streptokokai;
• chlamidija.

Išsivysčius sifiliui, specifiniai antikūnai kraujyje randami praėjus 14 dienų po užsikrėtimo. Pagal jų skaičių specialistas nustato ligos eigos sunkumą. Aktyvi sifilio terapija pašalina visas bakterijas po 6 mėnesių. Jei nėra gydymo, prireiks mažiausiai 1,5 metų, kol kūnas visiškai atsigaus.

ELISA analizė aptinka virusinio tipo hepatitą net inkubaciniu laikotarpiu, prieš pasireiškus pirmiesiems simptomams.

CMVI yra dažna patologija, kuri pasireiškia kas trečiam asmeniui. Gyventojams tai nekelia pavojaus, infekcija atsiranda gimdoje.

Paprastai žmogaus organizme nėra antikūnų prieš herpes virusą. Jas nustačius, įprasta diagnozuoti ūminę ligos fazę.

Vystantis vėjaraupiams žmogaus kraujyje randami specifiniai IgM imunoglobulinai. Jie gali išlikti organizme 2 metus, visiškai pašalinus patologiją.

Norint nustatyti streptokokų ir stafilokokų sukeltas ligas, galima atlikti dvigubą ELISA tyrimą. Pakartotinai ištyrus specifinių antikūnų lygis sparčiai didėja.

Chlamidijų išsivystymą rodo aukštas imunoglobulino kiekis – 1:8 ir didesnis. Indikatorius gali skirtis priklausomai nuo ligos progresavimo.

Dėmesio: tam, kad patvirtintų tam tikro patologinio proceso vystymąsi, specialistas skiria papildomus laboratorinius ir instrumentinius tyrimus. Išsamus tyrimas leidžia paskirti veiksmingą gydymo režimą.

Neigiamas ELISA

Esant neigiamam rezultatui, specifiniai IgM klasės imunoglobulinai žmogaus kraujyje neaptinkami. Galbūt IgG buvimas, antikūnai gali likti organizme po ligų, bakterijų ir virusų. Kai kuriais atvejais jų buvimas kraujo serume išlieka dešimtmečius.

Dėmesio: teisingai iššifruoti analizės rezultatus gali tik patyręs specialistas.

Savarankiškas atsakymų tyrimas daugeliu atvejų sukelia bandymus diagnozuoti ir paskirti neteisingą gydymą, nedalyvaujant gydytojui. Toks poveikis laikomas idealiu tolesniam patologinio proceso progresavimui.

Fermentinis imunologinis tyrimas yra vienas iš svarbiausių tyrimų, atliekamų siekiant įvertinti žmogaus organizmo gebėjimą atsispirti patogenų atakoms. Tai leidžia suprasti, kaip gerai imuninė sistema susidoroja su infekciniais procesais. Tai savo ruožtu leidžia koreguoti gydymo režimą, jei toks yra.

Ir tai toli gražu ne visos šio testo ypatybės, todėl panagrinėkime atidžiau į klausimus, kas yra ELISA analizė, kam ji rodoma, kaip ji atliekama ir ką gali pasakyti gauti duomenys.

Kas yra šis tyrimas

Taigi, kas tai yra – ELISA analizė? Ši santrumpa reiškia „fermentinį imuninį tyrimą“. Jis atliekamas tuo atveju, jei reikia nustatyti antikūnų prieš įvairių rūšių antigenus buvimą.

Antigenai yra ligas sukeliančios medžiagos, kurios prisideda prie įvairių patologijų vystymosi. Antikūnai yra medžiagos, reikalingos svetimoms ląstelėms sunaikinti.

Kraujo imunologinis tyrimas skirtas nustatyti imunoglobulinų, kuriuos galima sujungti į imunokompleksus, kiekį. Juos aktyviai gamina imuninė sistema, reaguodama į antigenų patekimą į organizmą.

Pastaba. Siekiant kovoti su kiekvienu atskiru antigeno tipu, gaminami jo specifiniai antikūnai. Būtent tai padeda nustatyti ligą ir net jos stadiją, naudojant fermentinį imunosorbentinį tyrimą.

Kai svetimas antigenas patenka į žmogaus organizmą, prie jo „prisiriša“ antikūnai, po to neutralizuoja jo poveikį. Tai atsitinka dėl fermentinės lizės ir fagocitozės reakcijų. Per šį procesą antigenai pašalinami iš kraujo.

Kada suplanuotas testas?

Supratę, kas yra su fermentu susijęs imunosorbentinis tyrimas, suprasime situacijas, kuriose jis atliekamas. Taigi tyrimas yra būtinas, kai:

• onkologinės ligos;
• virusinis hepatitas;
• herpetiniai išsiveržimai ant odos ar gleivinių;
• salmoneliozė;
• tymų;
• encefalitas;
• sifilis;
• dizenterija;
• atopinis dermatitas arba netipinės alerginės reakcijos.

Be to, ELISA metodas naudojamas patogenams nustatyti ir identifikuoti:

• lytiškai plintančių ligų;
• citomegalovirusinė infekcija;
• helmintozės.

Fermentinis imunologinis tyrimas – tai tyrimas, padedantis nustatyti endokrininių ligų pobūdį, taip pat nustatyti vyrų ir moterų imunodeficito ir nevaisingumo buvimą. Su jo pagalba prognozuojama tolesnė infarktų, insultų, neurologinių ir inkstų ligų eiga.

ELISA analizė atliekama ir prevenciniais tikslais. Būtinai atlikite tai nėštumo metu, taip pat pacientams, kurie anksčiau sirgo minėtomis ligomis. Asmenys, kuriems gresia anksčiau paminėtos ligos, taip pat reguliariai duoda kraujo ELISA tyrimui.

Testo ir dekodavimo ypatybės

Daugeliu atvejų paciento kraujas imamas fermentiniam imuniniam tyrimui. Tačiau tam tikromis aplinkybėmis audiniai gali būti paimti iš stiklakūnio kūno paviršiaus. Nėščioms moterims ELISA diagnozę galima atlikti tiriant amniono skysčio sudėtį.

Kraujo mėginiai imami naudojant švirkštą, o medžiaga tyrimams paprastai imama iš venos, esančios alkūnės lenkimo vidinėje pusėje. Pacientas turi būti atsipalaidavęs, sėdėti.

Svarbu! Tyrimo rezultatai, jo interpretacija ir duomenų interpretacija priklauso nuo diagnostinės manipuliacijos metodikos, naudojamos įrangos. Paprastai kiekviena laboratorija formoje nurodo imunoglobulino rodiklių normą.

Paruošimo ypatybės

Norint atlikti ELISA kraujo tyrimą, reikia atlikti tam tikras parengiamąsias procedūras:

• praleisti pusryčius testo dieną;
• kraujo skiediklių ir kitų farmakologinių preparatų, galinčių turėti įtakos rezultatams, vartojimo nutraukimas (iš anksto pasitarus su gydytoju);
• susilaikymas nuo rūkymo tyrimo dieną;
• atsisakymas gerti alkoholį dieną prieš kraujo paėmimą;
• narkotinių medžiagų (įskaitant vaistus, kuriuose jų yra) vartojimo draudimas.

Tokių pasiruošimo imunocheminiam kraujo tyrimui taisyklių laikymasis pašalina duomenų iškraipymo galimybę.

Duomenų interpretavimas

Tyrimo rezultatai pateikiami pacientui į rankas, po to jam atliekama antra konsultacija su specialistu. ELISA duomenų interpretacija gali būti teigiama arba neigiama. Šiuo atveju taip pat atsižvelgiama į nurodančius skaičius (jei yra).

Jei ELISA rezultatas yra neigiamas, tai gali rodyti patologinių procesų nebuvimą arba pradinę jų vystymosi fazę. Taip pat „neigiamas“ tyrimo rezultatas pastebimas, kai pacientas pasveiksta po gydymo kurso. Bet tokius duomenis galima gauti tik praėjus tam tikram laikui (1-2 mėn.).

Jei kraujyje nėra IgM, o IF analizė parodė teigiamą rezultatą, tai gali reikšti, kad pacientas susikūrė stiprų imunitetą tam tikros rūšies antigenui. Taip atsitinka su imunizacija.

Esant didelei IgM koncentracijai, nesant IgG ir IgA, galime kalbėti apie uždegiminį procesą, kuris atsiranda ūminėje fazėje.

Ką reiškia, jei ELISA yra teigiamas visų tipų imunoglobulinams? Tokiais atvejais galime kalbėti apie infekcinės patologijos pasikartojimą. Šiuo atveju antikūnų atsiradimas fiksuojamas tik ūminėje lėtinės ligos fazėje.

Kai liga pereis į susilpnėjimo fazę, ji bus neigiama. Tačiau IgG ir IgA ELISA tyrimas bus teigiamas.

Testo privalumai ir trūkumai

Kraujo tyrimas ELISA metodu turi savo stipriąsias ir silpnąsias puses. Privalumai apima:

• santykinai maža kaina;
• tikslumas;
• galimybė reguliariai elgtis siekiant įvertinti gydymo veiksmingumą;
• vykdymo greitis;
• didelio tikslumo ir labai informatyvių technologijų naudojimas patikimiems rezultatams gauti;
• galimybė atlikti kelis tyrimus to paties patologinio proceso židinio srityje;
• absoliutus neskausmingumas;
• nebuvimas pavojaus paciento sveikatai;
• santykinis studijų lengvumas.

ELISA kraujo tyrimas dėl aukščiau aprašytų privalumų tapo plačiai paplitęs ir atlieka svarbų vaidmenį diagnozuojant įvairias ligas.

Trūkumai

Reikšmingas kraujo ELISA trūkumas yra tikimybė, kad bus gauti klaidingai teigiami arba klaidingai neigiami rezultatai. Tačiau dažniausiai tai nulemia ne pats tyrimo metodas, o žmogiškasis faktorius.

Kitas niuansas, galintis turėti įtakos galutiniams duomenims – tyrimo metu naudojami vaistai. Jei jie naudojami neteisingai arba santuokos atveju, ELISA analizės iššifravimas bus nepatikimas. Todėl tyrimą teks kartoti.

Svarbu! Metabolinių procesų pažeidimas paciento kūne gali turėti įtakos tyrimo duomenims. Be to, rezultatams įtakos gali turėti keli infekcinių (lėtinių!) ligų židiniai vienu metu.

ELISA kraujo tyrimas atliekamas siekiant nustatyti:

• askaridozė;
• opisthorchiazė - ūminė ar lėtinė;
• giardiazė;
• toksoplazmozė.

Taip pat tyrimo metu paciento kūne galima aptikti pinworms ar amebų. „Leishmaniozės“ ir „trichineliozės“ diagnozė pacientams taip pat dažnai nustatoma remiantis ELISA kraujo tyrimo duomenimis.

Apibendrinant

Žinoma, labai sunku pačiam suprasti bandymo duomenis, nes atliekant šį procesą reikia atsižvelgti į daugybę veiksnių. Blogi įpročiai, gretutinių ligų buvimas, tam tikrų vaistų grupių vartojimas - visa tai vaidina svarbų vaidmenį ir gali turėti įtakos rezultatams, į kuriuos gydytojai atsižvelgia iššifruodami ELISA rezultatus.

Tačiau „informuotas – tai ginkluotas“, todėl kiekvienam žmogui svarbu žinoti tų laboratorinių tyrimų, kuriuos jam skiria gydantis gydytojas, atlikimo ir duomenų interpretavimo ypatumus. Ir ELISA metodas nėra išimtis!

Galimų diagnostikos metodų sąrašas pastaraisiais dešimtmečiais sparčiai plečiasi, diagnostikai stengiasi sujungti visų ankstesnių analizių privalumus naujuose metoduose, atsikratydami visų ankstesnių jų trūkumų.

Pastaruoju metu vis dažniau diagnostinių procedūrų sąraše atsiranda fermentinis imunologinis tyrimas – modernus ir gana naujas testas, kuris paprastam žmogui, nesusijusiam su medicina, yra mažai žinomas. Nepaisant to, ši technika sparčiai papildo savo šalininkų gretas tarp kvalifikuoto medicinos personalo. Kas tai yra ir kokiais atvejais jis turėtų būti naudojamas, galite pabandyti tai išsiaiškinti, susipažinę su jo ypatybėmis ir pagrindinėmis savybėmis.

Fermentinis imunologinis tyrimas – tai instrumentinė laboratorinė technika, pagrįsta antigeno ir antikūno molekuline reakcija, leidžianti aptikti specifinius baltymus biologinėse medžiagose (tyrimams skirtuose mėginiuose). Tokie baltymai gali būti fermentai, įvairūs mikroorganizmai (virusai, bakterijos, grybai), pirmuonys ir kt.

Po metodo atradimo jam buvo suteiktas ELISA testo pavadinimas, kuris nesusijęs su atradėjų vardais, o yra pilno pavadinimo santrumpa angliškoje versijoje – enzim-linked immunosorbent assay. Gydytojai visame pasaulyje naudoja šį pavadinimą, kai kurie rusakalbių šalių gydytojai taip pat vadina tokio tipo studijas.

Pagrindinis metodo principas yra molekulinė reakcija „antigenas-antikūnas“.

Antigenas yra bet kokia svetima molekulė, kuri patenka į žmogaus organizmą kaip patogeninio mikrobo dalis. Antigenai dažniausiai yra baltymų molekulės. Be mikroorganizmų, tokiu „svetimu“ gali būti svetimo kraujo ląstelės, kurios neatitinka grupės ar Rh faktoriaus.

Reaguojant į tokio antigeno patekimą į organizmą, pradedama imuninė reakcija, kuria siekiama apsisaugoti nuo bet kokių svetimų molekulių. Tai atsiranda dėl specialių imuninės sistemos agentų - antikūnų (imunoglobulinų) sintezės. Kiekvienas antikūnas priartėja tik prie tam tikro antigeno ir neutralizuoja patogeninį „pašalinį“, prisijungdamas prie jo vienu kompleksu. Būtent tokio surišimo procesas vadinamas antigeno ir antikūno reakcija.

Antikūnų tipai

Visi antikūnai (imunoglobulinai) skirstomi į 5 tipus, priklausomai nuo to, kurioje imuninio atsako stadijoje jie atsiranda:

ELISA diagnostikai dažniausiai svarbūs imunoglobulinų IgG, IgM ir IgA kiekiai. Iš jų kreditų galite sužinoti, ar žmogus anksčiau sirgo liga, ar neseniai užsikrėtė, ar jam susiformavo imunitetas, ar jo organizmas neapsaugotas nuo patologijos.

Fermentinio imunologinio tyrimo privalumai ir trūkumai

Šiuo metu ELISA yra vienas tiksliausių ir jautriausių metodų. Jį priėmė įvairių medicinos sričių specialistai ir toliau plečia savo taikymo sritį.

Metodo privalumai

• Didelis gautų duomenų tikslumas.
• Jautrumas (leidžia aptikti reikiamą medžiagą net ir esant minimaliam patogeno buvimui mėginyje).
• Diagnozės galimybė pirmosiomis ligos dienomis arba inkubaciniu laikotarpiu.
• Duomenų gavimo greitis, palyginti su kitais panašaus tikslumo metodais.
• Didelis proceso automatizavimas ir minimalus žmogaus dalyvavimas, kas sumažina atlikėjo klaidą.
• Duomenų apie patologinio proceso stadiją ir pasirinktos terapijos efektyvumą gavimas.
• Neskausmingas ir mažas invaziškumas renkantis medžiagą.

Metodo trūkumai

• Daugeliu atvejų tai leidžia nustatyti organizmo reakciją į patogeninį veiksnį, o ne patį patogeną.
• Prieš tyrimą būtina tiksliai žinoti įtariamą ligą, nes testas yra labai specifinis.
• Klaidingų rodiklių atsiradimo tikimybė dėl techninių problemų, vaistų vartojimo, kelių lėtinių ligų ar medžiagų apykaitos sutrikimų tuo pačiu metu paciento organizme.
• Rezultatus turėtų interpretuoti tik aukštos kvalifikacijos specialistas, nes norint interpretuoti gautus duomenis, būtina turėti specialų išsilavinimą ir turėti daug medicinos žinių konkrečioje srityje.
• ELISA yra gana reta analizė, todėl ji atliekama ne visose diagnostinėse laboratorijose.
• Metodas yra gana brangus, nes, be reagentų, laboratorijoje turi būti daug brangios įrangos ir specialiuose institutuose pagamintų antigenų mėginių.

Kada naudojamas fermentinis imunologinis tyrimas?

Visas fermentų imunologinio tyrimo paskyrimo indikacijų sąrašas yra labai platus, jis apima beveik visas medicinos šakas.

Dažniausiai ELISA naudojama šiems tikslams:

• infekcinių ligų nustatymas;
• venerinių ligų diagnostika;
• imuninės būklės arba atskirų autoimuninių ligų nustatymas;
• naviko žymenų nustatymas;
• hormonų apibrėžimas.

Infekcinių ir virusinių ligų atveju technika leidžia nustatyti šias patologijas:

Be to, ELISA leidžia greitai ir efektyviai nustatyti infarktą, įvertinti organizmo reprodukcinį potencialą, nustatyti alergijas, jos šaltinį ir kt.

ELISA metodika naudojama klinikiniams tyrimams kuriant naujus vaistus ir vertinant jų poveikį žmogaus organizmui.

Mėginių tipai ir jų atrankos tyrimams metodai

Dažniausiai fermento imunologinio tyrimo medžiaga yra kraujas, paimamas iš paciento kubitalinės venos. Mėginiai imami tuščiu skrandžiu, daugiausia ryte. Po atrankos iš kraujo tos susidariusios ląstelės, kurios trukdo tyrimui, atskiriamos ir pašalinamos, paliekant tik serumą.

Diagnozuojant urogenitalines infekcijas, dažnai medžiaga tampa lytinių organų gleivinių audinių tepinėliai, šlaplės ar gimdos kaklelio gleivės, mėginiai iš tiesiosios žarnos, erozijų ar opų įbrėžimai kirkšnies srityje ir kitose kūno vietose. Tepinėliai gali būti imami iš burnos ertmės, taip pat iš nosiaryklės.

Kartais akušerijos ir ginekologijos praktikoje nėštumo metu naudojamas fermentinis imunologinis tyrimas, siekiant nustatyti vaisiaus vandenų būklę. Šiuo atveju mėginiu tampa vaisiaus vandenys. Tam paimamas nedidelis kiekis skysčio, ilga adata praduriant vaisiaus šlapimo pūslę. Visos manipuliacijos atliekamos steriliu instrumentu, siekiant sumažinti galimą riziką.

Dažnai medžiaga tampa smegenų arba seroziniu skysčiu. Tai atsitinka taikant vietinę nejautrą, kuri švirkščiama.

Nurodykite, kokios medžiagos reikalingos fermentų imunologiniam tyrimui, turėtų specialistas, siunčiantis į tyrimą. Dažnai mėginiai imami kelių tipų iš karto arba iš skirtingų vietų. Gydytojas, išdavęs siuntimą tokiam tyrimui, taip pat turėtų pasakyti pacientui apie pasiruošimą biomedžiagos pristatymui.

Pasiruošimas fermentų imunologiniam tyrimui

Siekiant padidinti duomenų, gautų atlikus fermentinį imuninį tyrimą, tikslumą, medžiagos parinkimui reikia pasiruošti taip:

• 10 dienų prieš tyrimą neįtraukite antibiotikų, antivirusinių ir antimikotinių vaistų;
• per dieną būtina atsisakyti alkoholio, rūkyti ir vartoti narkotikus;
• tuo pačiu laikotarpiu būtina vengti fizinio per didelio krūvio;
• informuoti išrašantįjį gydytoją apie visus paciento vartojamus vaistus;
• Pasakykite gydytojui, jei esate nėščia arba įtariama, kad esate nėščia.

Geriausia, jei medžiagos tyrimams būtų parenkamos ryte tuščiu skrandžiu.

Jei diagnoze siekiama nustatyti hormoninio fono būklę, svarbu užtikrinti ramią būseną išvakarėse ir išvengti nervinės įtampos. Moterims kraujo donorystę hormonams aiškiai lemia mėnesinio ciklo laikotarpis, kurį gydytojas aptars paskyrimo metu.

Likus 2-3 dienoms iki mėginių ėmimo, iš valgiaraščio reikia išbraukti keptą ir riebų maistą, o prieš hepatito tyrimą nevalgyti citrusinių vaisių ir bet kokių kitų oranžinės ir geltonos spalvos vaisių bei daržovių.

Fermentinio imunologinio tyrimo rezultatų iššifravimas

Kokybinio tyrimo rezultatas, kaip taisyklė, žymimas ženklais „+“ (rasta) arba „-“ (nerasta).

Atsižvelgiant į tam tikrų imunoglobulinų grupių buvimą ar nebuvimą, galima padaryti tokias išvadas:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imuniteto ligai visiškai nėra (organizmas anksčiau nebuvo susidūręs su tokio tipo antigenu);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) - anksčiau buvo susidūrimas su šiuo antigenu arba su vakcina;
• JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – ūmus patologinis procesas (greičiausiai pirminis);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – lėtinė eiga;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) – recidyvas;
• JgM (-) - sveikimo stadija.

Kiekybinės reikšmės turi didelį informacijos kiekį, tačiau jas interpretuoti gali tik gydantis gydytojas, remdamasis ankstesnėmis indikacijomis, paciento amžiumi ir kiekvienos konkrečios ligos normomis. Dėl šios priežasties neįmanoma savarankiškai įvertinti rezultatų.

Kiek laiko laukti rezultatų

Ši technika turi daugybę variantų, priklausomai nuo to, koks yra duomenų gavimo terminas. Vidutinė ELISA diagnostikos trukmė yra 4-6 valandos, todėl rezultatus galima pateikti jau kitą dieną.

Ilgiausi metodai užtrunka iki 10 dienų, pavyzdžiui, nustačius ŽIV infekciją.

Esant skubiam poreikiui, galima naudoti greituosius būdus, kai atsakymas gaunamas per 1-2 val.

Kur galiu atlikti ELISA testą?

Kadangi tokio tipo diagnostikos įranga yra gana brangi, ne visos laboratorijos gali ją įsigyti. Be to, testų, kuriuose yra specifinių antigenų, galiojimo laikas yra ribotas (dažniausiai apie 1 metus), todėl juos reikia nuolat atnaujinti.

Dėl šių priežasčių valstybinės gydymo įstaigos ne visada turi ELISA laboratorijas. Dažniausiai reikia susisiekti su dideliais privačiais medicinos ar dideliais diagnostikos centrais.

Norint atlikti ELISA tyrimą, laboratorija turi turėti specialią licenciją, o darbuotojai ir laborantai turi būti specialiai apmokyti.

Dažniausiai konkretų diagnostikos centrą ar laboratoriją rekomenduoja gydytojas, kuris nukreipia pacientą tirti.

Fermentinio imunologinio tyrimo kaina

Šio tyrimo kaina priklauso nuo šalies regiono ir paslaugą teikiančios klinikos lygio. Maskvoje minimali vieno antigeno nustatymo kaina prasideda nuo 700 rublių. Jei reikia vienu metu nustatyti kelis imunoglobulinus, kaina bus sumuojama.

Skubios analizės atveju kaina padidėja 150-200 rublių. kiekvienam antigenui.

Nepaisant gana didelių sąnaudų, fermentinis imunologinis tyrimas leidžia padaryti paciento tyrimą kuo informatyvesnį ir greitesnį, o tai sumažina laiką iki gydymo pradžios ir leidžia greitai stabilizuoti asmens būklę.

Šiame vaizdo įraše rodomas filmas „Fundamentals of ferment immunoassay“.