AIDS diagnozė ŽIV imunoblotu. Polimerazės grandininė reakcija (PGR) Imuninio blotavimo mechanizmo praktinis panaudojimas

Imuninis blotavimas (imunoblotas, Western blot, Western blot)- derina su fermentais susietą imunosorbentinį tyrimą (ELISA) su preliminariu elektroforetiniu viruso antigenų perkėlimu į nitroceliuliozės juostelę (juostelę).

Šiame nuostabiame moksliniame pavadinime „dėmė“ greičiausiai verčiama kaip „dėmė“, o „vakarinis“ kaip „vakarinis“ atspindi šio „dėmės“ pasiskirstymo popieriuje kryptį iš kairės į dešinę, tai yra, geografiniame žemėlapyje, tai atitinka kryptį iš vakarų į rytus. „Imuninio blotavimo“ metodo esmė yra ta, kad su fermentu susijusi imunosorbentinė reakcija vykdoma ne su antigenų mišiniu, o su ŽIV antigenais, kurie anksčiau imunoforezės būdu buvo paskirstyti į frakcijas, esančias pagal molekulinę masę nitroceliuliozės membranos paviršiuje. . Dėl to pagrindiniai ŽIV baltymai, antigeninių determinantų nešiotojai, pasiskirsto paviršiuje atskirų juostų pavidalu, atsirandančių fermento imunologinio tyrimo metu.

Imunoblotas apima kelis etapus:

Juostos paruošimas. Imunodeficito virusas (ŽIV), kuris anksčiau buvo išgrynintas ir sunaikintas iki sudedamųjų dalių, yra elektroforezės metu, o antigenai, sudarantys ŽIV, atskiriami pagal molekulinę masę. Tada blotuojant (analogiškai išspaudžiant rašalo perteklių ant „bloterio“) antigenai perkeliami į nitroceliuliozės juostelę, kurioje dabar yra ŽIV būdingų, akiai nematomų antigeninių juostų spektras.

Pavyzdinis tyrimas. Ant nitroceliuliozės juostelės užtepama tiriamoji medžiaga (serumas, paciento kraujo plazma ir kt.), o jei mėginyje yra specifinių antikūnų, jie jungiasi prie griežtai atitinkamų (papildomų) antigeninių juostų. Dėl vėlesnių manipuliacijų šios sąveikos rezultatas vizualizuojamas – tampa matomas.

Rezultato interpretacija. Juostų buvimas tam tikrose nitroceliuliozės plokštelės vietose patvirtina, kad tiriamame serume yra antikūnų prieš griežtai apibrėžtus ŽIV antigenus.

    A juosta – teigiamas valdymas

    B juosta – silpna teigiama kontrolė

    C juosta – neigiama kontrolė

    D juostelė – teigiamas mėginys (aptikti antikūnai prieš ŽIV-1)

Šiuo metu imunoblotavimas (imunoblotas) yra pagrindinis metodas, patvirtinantis virusui specifinių antikūnų buvimą tiriamajame serume. Kai kuriais ŽIV infekcijos atvejais prieš serokonversiją specifiniai antikūnai veiksmingiau nustatomi imunoblotingu nei ELISA. Imuninio blotingo tyrimas atskleidė, kad antikūnai prieš gp 41 dažniausiai aptinkami sergančiųjų AIDS serume, o norint nustatyti p24 profilaktiniais tikslais tirtiems asmenims, reikia atlikti papildomus tyrimus dėl ŽIV infekcijos buvimo. Imunoblotų testų sistemos, pagrįstos genetiškai modifikuotais rekombinantiniais baltymais, pasirodė esančios specifiškesnės nei įprastos sistemos, pagrįstos išgrynintu viruso lizatu. Naudojant rekombinantinį antigeną susidaro ne difuzinė, o aiškiai apibrėžta siaura antigeno juosta, kuri lengvai pasiekiama apskaitai ir įvertinimui.

ŽIV-1 užsikrėtusių asmenų serume aptinkami šių pagrindinių baltymų ir glikoproteinų antikūnai – struktūriniai apvalkalo baltymai (env) – gp160, gp120, gp41; branduoliai (gag) - p17, p24, p55, taip pat viruso fermentai (pol) - p31, p51, p66. ŽIV-2 tipiški antikūnai prieš env – gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol-p68.

Tarp laboratorinių metodų, reikalingų reakcijos specifiškumui nustatyti, didžiausią pripažinimą turi ŽIV-1 apvalkalo baltymų – gp41, gp120, gp160 ir ŽIV-2 – gp36, gp105, gp140 antikūnų nustatymas.

PSO mano, kad serumas yra teigiamas, jei imunoblotingu aptinkami antikūnai prieš bet kuriuos du ŽIV glikoproteinus. Remiantis šiomis rekomendacijomis, jei yra reakcija tik su vienu iš apvalkalo baltymų (rp 160, rp 120, rp 41) kartu arba nereaguojant su kitais baltymais, rezultatas laikomas abejotinu ir rekomenduojama atlikti antrą tyrimą naudojant rinkinį. iš kitos serijos ar kitos kompanijos. Jei po to rezultatas išlieka abejotinas, rekomenduojama stebėti 6 mėnesius (tyrimas po 3 mėnesių).

Teigiama reakcija su p24 antigenu gali rodyti serokonversijos laikotarpį, nes kartais pirmiausia atsiranda šio baltymo antikūnai. Tokiu atveju, atsižvelgiant į klinikinius ir epidemiologinius duomenis, rekomenduojama pakartoti tyrimą su serumo mėginiu, paimtu ne vėliau kaip po 2 savaičių, ir būtent taip yra, kai reikia suporuotų serumų sergant ŽIV infekcija.

Teigiamos reakcijos su gag ir pol baltymais be reakcijos su env baltymais gali atspindėti ankstyvos serokonversijos stadiją, taip pat gali rodyti ŽIV-2 infekciją arba nespecifinę reakciją. Asmenys, turintys tokius rezultatus po ŽIV-2 testo, pakartotinai tiriami po 3 mėnesių (per 6 mėnesius).

Laiku diagnozuota ŽIV infekcija tampa itin svarbia priemone, nes ankstyvesnis gydymas gali iš esmės nulemti tolesnę ligos raidą ir pailginti paciento gyvenimą. Pastaraisiais metais šios baisios ligos nustatymo srityje padaryta didelė pažanga: senos tyrimų sistemos keičiamos pažangesnėmis, tampa prieinamesni tyrimo metodai, gerokai padidėja jų tikslumas.

Šiame straipsnyje kalbėsime apie šiuolaikinius ŽIV infekcijos diagnostikos metodus, kuriuos pravartu žinoti, norint laiku gydyti šią problemą ir palaikyti normalią paciento gyvenimo kokybę.

ŽIV diagnozavimo metodai

Rusijoje ŽIV infekcijai diagnozuoti atliekama standartinė procedūra, kurią sudaro du lygiai:

  • ELISA testų sistema (atrankinė analizė);
  • imuninis blotingas (IB).

Taip pat gali būti naudojami kiti diagnostikos metodai:

  • greitieji testai.

ELISA testų sistemos

Pirmajame diagnozės etape ŽIV infekcijai nustatyti naudojamas atrankos testas (ELISA), kuris pagrįstas ŽIV baltymais, sukurtais laboratorijose, kurios fiksuoja specifinius antikūnus, gaminamus organizme reaguojant į infekciją. Po jų sąveikos su tiriamosios sistemos reagentais (fermentais), pasikeičia indikatoriaus spalva. Be to, šie spalvų pokyčiai apdorojami specialia įranga, kuri lemia atliktos analizės rezultatą.

Tokie ELISA tyrimai gali parodyti rezultatus per kelias savaites nuo ŽIV infekcijos įvedimo. Ši analizė nenustato viruso buvimo, bet nustato antikūnų prieš jį gamybą. Kartais žmogaus organizme antikūnai prieš ŽIV prasideda praėjus 2 savaitėms po užsikrėtimo, tačiau daugumos žmonių jie gaminasi vėliau, po 3-6 savaičių.

Yra keturios skirtingo jautrumo ELISA testų kartos. Pastaraisiais metais vis dažniau naudojamos III ir IV kartos bandymų sistemos, kurios yra pagrįstos sintetiniais peptidais arba rekombinantiniais baltymais ir pasižymi didesniu specifiškumu bei tikslumu. Jais galima diagnozuoti ŽIV infekciją, stebėti ŽIV paplitimą ir užtikrinti saugumą tiriant paaukotą kraują. III ir IV kartos ELISA testų sistemų tikslumas siekia 93-99% (jautresni testai, kurie gaminami Vakarų Europoje – 99%).

ELISA tyrimui atlikti iš paciento venos paimama 5 ml kraujo. Nuo paskutinio valgio iki analizės turi praeiti ne mažiau kaip 8 valandos (paprastai ji atliekama ryte tuščiu skrandžiu). Tokį tyrimą rekomenduojama atlikti ne anksčiau kaip po 3 savaičių po tariamos infekcijos (pavyzdžiui, po nesaugių santykių su nauju lytiniu partneriu).

ELISA tyrimo rezultatai gaunami po 2-10 dienų:

  • neigiamas rezultatas: rodo, kad nėra ŽIV infekcijos ir nereikia siuntimo pas specialistą;
  • klaidingai neigiamas rezultatas: gali būti stebimas ankstyvosiose infekcijos stadijose (iki 3 savaičių), vėlyvose AIDS stadijose su stipriu imuniteto slopinimu ir netinkamai paruošus kraują;
  • klaidingai teigiamas rezultatas: jį galima pastebėti sergant kai kuriomis ligomis ir netinkamai paruošus kraują;
  • teigiamas rezultatas: rodo užsikrėtimą ŽIV infekcija, reikalingas IB ir paciento siuntimas pas specialistą AIDS centre.

Kodėl ELISA testas gali duoti klaidingai teigiamus rezultatus?

Klaidingai teigiami ŽIV ELISA testo rezultatai gali būti stebimi netinkamai apdorojant kraują arba pacientams, sergantiems tokiomis sąlygomis ir ligomis:

  • daugybinė mieloma;
  • infekcinės ligos, kurias sukelia Epstein-Barr virusas;
  • būsena po ;
  • autoimuninės ligos;
  • nėštumo fone;
  • būklė po vakcinacijos.

Dėl aukščiau aprašytų priežasčių kraujyje gali būti nespecifinių kryžmiškai reaguojančių antikūnų, kurių susidarymo neišprovokavo ŽIV infekcija.

Pastaraisiais metais klaidingai teigiamų rezultatų dažnis ženkliai sumažėjo, nes naudojamos III ir IV kartos tyrimų sistemos, kuriose yra jautresnių peptidinių ir rekombinantinių baltymų (jie sintetinami naudojant in vitro genų inžineriją). Panaudojus tokius ELISA tyrimus, klaidingai teigiamų rezultatų dažnis gerokai sumažėjo ir yra apie 0,02-0,5 proc.

Klaidingai teigiamas rezultatas nereiškia, kad žmogus yra užsikrėtęs ŽIV. Tokiais atvejais PSO rekomenduoja atlikti kitą ELISA testą (privalomas IV kartos).

Paciento kraujas siunčiamas į etaloninę ar arbitražo laboratoriją, pažymėtą „pakartojimas“ ir tiriamas IV kartos ELISA tyrimo sistema. Jei naujos analizės rezultatas yra neigiamas, pirmasis rezultatas pripažįstamas klaidingu (klaidingai teigiamas) ir IB neatliekamas. Jei antrojo tyrimo metu rezultatas yra teigiamas arba abejotinas, pacientas turi atlikti IB per 4–6 savaites, kad būtų patvirtinta arba paneigta ŽIV infekcija.

imuninis blotingas

Galutinė ŽIV infekcijos diagnozė gali būti nustatyta tik gavus teigiamą imuninio blotingo (IB) rezultatą. Jai įgyvendinti naudojama nitroceliuliozės juostelė, ant kurios dedami virusiniai baltymai.

IB kraujo mėginiai imami iš venos. Tada jis specialiai apdorojamas, o jo serume esantys baltymai atskiriami specialiu geliu pagal jų krūvį ir molekulinę masę (manipuliacija atliekama specialia įranga veikiant elektriniam laukui). Ant kraujo serumo gelio uždedama nitroceliuliozės juostelė ir specialioje kameroje atliekamas blotavimas („blotingas“). Juostelė yra apdorojama ir, jei naudojamose medžiagose yra antikūnų prieš ŽIV, jie prisijungia prie IB antigeninių juostų ir pasirodo kaip linijos.

IB laikomas teigiamu, jei:

  • pagal Amerikos CDC kriterijus - ant juostelės yra dvi ar trys eilutės gp41, p24, gp120 / gp160;
  • pagal Amerikos FDA kriterijus - ant juostelės yra dvi eilutės p24, p31 ir eilutė gp41 arba gp120 / gp160.

99,9% atvejų teigiamas IB rezultatas rodo ŽIV infekciją.

Jei nėra linijų - IB yra neigiamas.

Identifikuojant linijas su gp160, gp120 ir gp41, IB abejotina. Tokį rezultatą galima aptikti, kai:

  • onkologinės ligos;
  • nėštumas;
  • dažni kraujo perpylimai.

Tokiais atvejais rekomenduojama atlikti antrą tyrimą naudojant kitos įmonės rinkinį. Jei po papildomo IB rezultatas išlieka abejotinas, tuomet būtinas stebėjimas šešis mėnesius (IB atliekamas kas 3 mėnesius).

polimerazės grandininė reakcija

PGR testas gali aptikti viruso RNR. Jo jautrumas yra gana didelis ir leidžia nustatyti ŽIV infekciją jau 10 dienų po užsikrėtimo. Kai kuriais atvejais PGR gali duoti klaidingai teigiamus rezultatus, nes jo didelis jautrumas taip pat gali reaguoti į antikūnus prieš kitas infekcijas.

Šis diagnostikos metodas yra brangus, reikalauja specialios įrangos ir aukštos kvalifikacijos specialistų. Šios priežastys neleidžia to atlikti atliekant masinius gyventojų tyrimus.

PGR naudojama šiais atvejais:

  • nustatyti ŽIV naujagimiams, kuriuos pagimdė ŽIV infekuotos motinos;
  • nustatyti ŽIV „lango periodu“ arba esant abejotinam IB;
  • kontroliuoti ŽIV koncentraciją kraujyje;
  • donorų kraujo tyrimui.

Tik PGR testu ŽIV diagnozė nenustatoma, o atliekama kaip papildomas diagnostikos metodas ginčams spręsti.


Ekspreso metodai

Viena iš ŽIV diagnostikos naujovių tapo greitieji testai, kurių rezultatus galima įvertinti per 10-15 minučių. Efektyviausi ir tiksliausi rezultatai gaunami atliekant imunochromatografinius tyrimus, pagrįstus kapiliarinio srauto principu. Tai specialios juostelės, ant kurių užtepamas kraujas ar kiti tiriamieji skysčiai (seilės, šlapimas). Esant antikūnams prieš ŽIV, po 10-15 minučių ant testo atsiranda spalvota ir kontrolinė juostelė – teigiamas rezultatas. Jei rezultatas neigiamas, rodoma tik kontrolinė eilutė.

Kaip ir atliekant ELISA testus, greitųjų testų rezultatai turėtų būti patvirtinti IB analize. Tik tada galima diagnozuoti ŽIV infekciją.

Yra greitųjų rinkinių, skirtų testavimui namuose. OraSure Technologies1 (JAV) testas yra patvirtintas FDA, parduodamas be recepto ir gali būti naudojamas ŽIV aptikti. Po tyrimo, gavus teigiamą rezultatą, pacientui rekomenduojama atlikti tyrimą specializuotame centre, kad būtų patvirtinta diagnozė.

Likę bandymai, skirti naudoti namuose, dar nepatvirtinti FDA ir jų rezultatai gali būti labai abejotini.

Nepaisant to, kad greitieji testai yra prastesni nei IV kartos ELISA tyrimai, jie plačiai naudojami papildomam populiacijos tyrimui.

Pasitikrinti dėl ŽIV infekcijos galite bet kurioje poliklinikoje, Centrinėje regioninėje ligoninėje ar specializuotuose AIDS centruose. Rusijos teritorijoje jie laikomi visiškai konfidencialiai arba anonimiškai. Kiekvienas pacientas gali tikėtis medicininės ar psichologinės konsultacijos prieš arba po analizės. Už ŽIV tyrimus teks mokėti tik komercinėse gydymo įstaigose, o valstybinėse klinikose ir ligoninėse jie atliekami nemokamai.

Norėdami gauti informacijos apie tai, kaip galite užsikrėsti ŽIV ir kokie mitai egzistuoja apie galimybę užsikrėsti, skaitykite

Kas tai yra - imunoblotas? Tai yra įprastas žmogaus virusinių infekcijų laboratorinės diagnostikos metodas. Tai laikoma vienu tiksliausių ir patikimiausių būdų nustatyti ŽIV buvimą. Savo patikimumu jis pranoksta net imunobloto rezultatus, kurie laikomi nepaneigiamais ir galutiniais.

Bendra informacija

Imunoblotas - kas tai? Norint atpažinti ŽIV infekciją žmogui, būtina atlikti laboratorinį kraujo serumo tyrimą dėl antikūnų buvimo. Western blot metodas taip pat vadinamas Western blot. Jis naudojamas žmogaus virusinėms infekcijoms nustatyti kaip papildomas ekspertinis metodas. Būtina patvirtinti ELISA – laboratorinį tyrimą, leidžiantį nustatyti ŽIV antikūnų buvimą kraujyje. Teigiama ELISA analizė dar kartą patikrinama imunoblotingu. Jis laikomas jautriausiu, sudėtingiausiu ir brangiausiu.

tikslas

Kas tai yra - imunoblotas? Tai metodas, skirtas laboratoriniam kraujo serumo tyrimui, siekiant nustatyti viruso antikūnų buvimą. Tyrimo metu specialistas iš anksto atskiria gelyje esančius viruso baltymus ir perkelia juos į nitroceliuliozės membraną. Imunoblotavimo procedūra skirta nustatyti ŽIV įvairiais etapais. Pirmajame etape išgrynintas virusas iš jo sudedamųjų dalių yra elektroforezuojamas, o jo sudėtį sudarantys antigenai atskiriami pagal molekulinę masę.

Jis dauginasi gyvoje ląstelėje, įterpdamas į ją savo genetinę informaciją. Šiame etape žmogus tampa ŽIV viruso nešiotojas, jei buvo užsikrėtęs. Ligos specifika yra ta, kad ji gali nepasireikšti ilgą laiką. Virusas naikina limfocitus, todėl sumažėja žmogaus imunitetas, organizmas nebegali atsispirti infekcijoms. Jei ŽIV bus gydomas kompetentingai ir laiku, pacientas gyvens iki brandaus amžiaus. Gydymo trūkumas neišvengiamai veda prie mirties. Nuo užsikrėtimo momento, bet be gydymo, maksimali gyvenimo trukmė yra ne daugiau kaip dešimt metų.

Ypatumai

Imunoblotinė analizė yra patikimas metodas, leidžiantis nustatyti, ar yra antikūnų prieš pirmojo ir antrojo tipo ŽIV antigenus. Jei žmogus yra užsikrėtęs, per dvi savaites atsiranda antikūnų, kuriuos galima aptikti daug vėliau. ŽIV ypatumas yra tas, kad antikūnų skaičius greitai didėja ir lieka paciento kraujyje. Net jei jie yra, liga gali nepasireikšti dvejus ar daugiau metų. ELISA metodas ne visada tiksliai nustato ligos buvimą, todėl, jei fermento imunologinis tyrimas yra teigiamas, būtina patvirtinti rezultatus naudojant imunoblotingą ir PGR.

Indikacijos paskyrimui

Kas yra tas „imunoblotas“, jau išsiaiškinta, bet kam šis tyrimas skirtas? Priežastis atlikti imunoblotavimo metodo tyrimus yra teigiamas ELISA rezultatas. Pacientams, kurie bus operuojami, būtina atlikti fermentinį imuninį tyrimą. Be to, reikia atlikti analizę moterims, planuojančioms nėštumą, taip pat visiems, kurie yra seksualiai ištvirkę. Jei kyla abejonių dėl ELISA rezultatų, pacientams, sergantiems ŽIV, priskirkite imunoblotingą. Šie nerimą keliantys simptomai gali būti priežastis kreiptis į gydytoją:

  • staigus svorio kritimas;
  • silpnumas, darbingumo sumažėjimas;
  • žarnyno sutrikimas (viduriavimas), kuris trunka tris savaites;
  • kūno dehidratacija;
  • karščiavimas;
  • limfmazgių padidėjimas organizme;
  • kandidozės, tuberkuliozės, pneumonijos, toksoplazmozės vystymasis, herpeso paūmėjimas.

Prieš duodamas veninį kraują pacientui ruoštis nereikia. 8-10 valandų iki tyrimo negalima valgyti. Dieną prieš kraujo davimą nerekomenduojama gerti alkoholinių ir kavos gėrimų, užsiimti sunkiu fiziniu krūviu, patirti jaudulį.

Kur atlikti analizę?

Kur galiu išsitirti dėl ŽIV? ELISA, imunoblotiniai tyrimai atliekami miesto privačiose klinikose, rezultatai išduodami per dieną. Taip pat galima nedelsiant diagnozuoti. Valstybinėse gydymo įstaigose ELISA tyrimai ir imunoblotingas atliekami nemokamai, remiantis Rusijos Federacijos teisės aktais. Nėščios moterys, taip pat pacientai, kuriuos ketinama hospitalizuoti ar operuoti, privalo pasitikrinti dėl infekcinių ligų.

Kaip atliekamas tyrimas?

Kaip atliekama ELISA? Imunoblotas teigiamas / neigiamas patvirtina arba paneigia fermento imunologinio tyrimo rezultatus. Tyrimo procedūra yra gana paprasta. Specialistas atlieka veninio kraujo mėginių paėmimą, laiku tai trunka ne ilgiau kaip penkias minutes. Po mėginio paėmimo injekcijos vieta turi būti dezinfekuojama ir užklijuojama gipsu. Mėginys imamas nevalgius, todėl po procedūros nepakenks suvalgyti plytelę juodojo šokolado ar išgerti saldaus karšto gėrimo.

Norint gauti siuntimą nemokamai analizei atlikti valstybinėje gydymo įstaigoje, reikia apsilankyti pas bendrosios praktikos gydytoją. Apskritai imunoblotas nesiskiria nuo kitų kraujo tyrimų mėginių ėmimo metodu. Tyrimo metodika paprasta. Jei žmogaus kraujyje yra viruso, organizmas pradeda gaminti antikūnus, kad jį sunaikintų. Kiekvienas virusas turi savo antigenų baltymų rinkinį. Šių antikūnų aptikimas yra Western blot technikos pagrindas.

Kaina

Kiek kainuoja analizė? ŽIV imunoblotas netaikomas pigiems tyrimams. Vidutiniškai atrankos tyrimas naudojant fermentinį imuninį tyrimą kainuoja nuo 500 iki 900 rublių. Imunoblotavimas yra patikrinimo tyrimas, kurio kaina yra nuo trijų iki penkių tūkstančių rublių. Sudėtingesni metodai yra daug brangesni. Pavyzdžiui, už tai turėsite sumokėti apie 12 000 rublių.

Rezultato interpretacija

Dažniausi ŽIV infekcijos diagnozavimo metodai yra fermentų imunologinis tyrimas ir imunoblotas. Jie naudojami serumo antikūnams prieš imunodeficito virusą nustatyti. Infekcijos buvimas paprastai patvirtinamas dviem tyrimais: patikra ir patvirtinamuoju. Tyrimo rezultatų aiškinimą turėtų atlikti gydytojas, jis taip pat nustato diagnozę ir paskiria gydymą. Jei imunoblotas yra teigiamas, tai reiškia, kad žmogaus organizme yra virusas.

Teigiamas rezultatas neturėtų būti savarankiško gydymo priežastis, nes kiekvienas pacientas gali turėti savo ligos vaizdą. Kokybinė analizė apima atranką ir patikrinimą. Jei pacientas neturi viruso, rezultatas nurodomas kaip „neigiamas“. Nustačius atrankos metodu, atliekamas papildomas patikros tyrimas. Imunoblotas yra analizė, kuri patvirtina arba paneigia atranką. Jei bandymo juostelėje tam tikrose vietose (baltymų lokalizacijos vietose) atsiranda tamsėjimas, nustatoma ŽIV diagnozė. Jei rezultatai abejojami, tyrimai atliekami per tris mėnesius.

Užsikrėsti imunodeficito virusu galite, jei laikysitės tam tikrų taisyklių: venkite atsitiktinių lytinių santykių, kontaktų metu naudokitės prezervatyvu, nevartosite narkotikų. Jei liga nustatoma nėščiai moteriai, svarbu griežtai laikytis gydančio gydytojo rekomendacijų, nepamiršti išsitirti, ar nėra viruso.

hipotenzija, tachikardija, dusulys, cianozė. Sunkiais ligos atvejais galimas kraujavimas, vėmimas su kraujo priemaiša. Padidėja kepenys ir blužnis. Atkreipkite dėmesį į oliguriją. Nuolat aukšta temperatūra išlieka 3–10 dienų. Periferiniame kraujyje - neutrofilinė leukocitozė su formulės poslinkiu į kairę. Be aprašytų bendrųjų maro apraiškų, išsivysto ir atskiroms klinikinėms ligos formoms būdingi pažeidimai.

Odos forma yra reta (3–5%). Infekcijos įėjimo vartų vietoje atsiranda dėmė, tada papulė, pūslelė (konfliktas), užpildyta seroziniu hemoraginiu turiniu, apsupta infiltruotos zonos su hiperemija ir edema. Fliktenui būdingas stiprus skausmas. Atidarius susidaro opa su tamsiu šašu ​​apačioje. Maro opai būdinga ilga eiga, gyja lėtai, susidaro randas. Jei šią formą komplikuoja septicemija, atsiranda antrinių pustulių ir opų. Galbūt regioninio bubo (odos-buboninės formos) išsivystymas.

Buboninė forma pasitaiko dažniausiai (apie 80%) ir jai būdinga gana gerybinė eiga. Nuo pirmųjų ligos dienų regioninių limfmazgių srityje atsiranda aštrus skausmas, kuris apsunkina judėjimą ir verčia pacientą užimti priverstinę padėtį. Pirminis bubo, kaip taisyklė, yra pavienis, daugybiniai bubo yra mažiau paplitę. Daugeliu atvejų pažeidžiami kirkšnies ir šlaunikaulio limfmazgiai, kiek rečiau – pažasties ir kaklo limfmazgiai. Bubo dydžiai skiriasi nuo graikinio riešuto iki vidutinio dydžio obuolio. Ryškios savybės yra aštrus skausmas, tanki konsistencija, sukibimas su apatiniais audiniais, kontūrų lygumas dėl periadenito vystymosi. Bubo pradeda formuotis antrą ligos dieną. Jai vystantis, oda virš jo parausta, blizga, dažnai žydi. Pradžioje tankus, vėliau suminkštėja, atsiranda svyravimas, kontūrai tampa neryškūs. 10-12 ligos dieną atsidaro - fistulė, susidaro išopėjimas. Esant gerybinei ligos eigai ir šiuolaikinei antibiotikų terapijai, stebima jos rezorbcija arba sklerozė. Dėl hematogeninio patogeno įvedimo gali susidaryti antriniai burbuliukai, kurie atsiranda vėliau ir yra mažo dydžio, mažiau skausmingi ir, kaip taisyklė, nesupūliuoja. Baisi šios formos komplikacija gali būti antrinės plaučių ar antrinės septinės formos išsivystymas, kuris smarkiai pablogina paciento būklę iki mirties.

Pirminis plaučių forma yra reta, epidemijų laikotarpiu 5–10% atvejų ir yra epidemiologiškai pavojingiausia ir sunkiausia klinikinė ligos forma. Prasideda staigiai, audringai. Dėl ryškaus apsinuodijimo sindromo nuo pirmųjų dienų atsiranda sausas kosulys, stiprus dusulys, pjovimo skausmai krūtinėje. Tada kosulys tampa produktyvus, išsiskiriantis skrepliais, kurių kiekis gali skirtis nuo kelių spjaudymų iki didžiulių kiekių, kurių retai visai nėra. Skrepliai, iš pradžių putojantys, stikliniai, skaidrūs, vėliau įgauna kruviną išvaizdą, vėliau tampa grynai kruvini, juose yra didžiulis kiekis maro bakterijų. Dažniausiai tai būna skystos konsistencijos – vienas iš diagnostinių požymių. Fizinių duomenų nedaug: šiek tiek sutrumpėjęs perkusijos garsas virš pažeistos skilties, auskultacijos metu, negausūs smulkūs burbuliuojantys karkalai, akivaizdžiai neatitinkantys bendros sunkios ligonio būklės. Galutiniam laikotarpiui būdingas padidėjęs dusulys, cianozė, stuporas, plaučių edema ir TSS. Krinta kraujospūdis, padažnėja ir tampa sriegiuotas pulsas, duslūs širdies garsai, hipertermiją pakeičia hipotermija. Negydant liga mirtina per 2–6 dienas. Anksti pradėjus vartoti antibiotikus, ligos eiga yra gerybinė, mažai skiriasi

IMUNOBLOTAS(Western blot) - laboratorinio kraujo serumo tyrimo, siekiant nustatyti antikūnus prieš ŽIV, metodas; tai tikslesnis testas nei ELISA ir naudojamas ELISA rezultatams patvirtinti. ELISA – fermentų imunologinis tyrimas (ELISA) – laboratorinis tyrimas, leidžiantis nustatyti ŽIV antikūnų buvimą kraujyje; ŽIV antikūnų tyrimas.

Pagal PSO rekomendaciją imunoblotavimas (Western blot) ŽIV infekcijos diagnozei taikomas kaip papildomas ekspertinis metodas, kuris turėtų patvirtinti ELISA rezultatus. Šis metodas paprastai naudojamas norint dar kartą patikrinti teigiamą ELISA rezultatą, nes jis laikomas jautresniu ir specifiškesniu, nors ir sudėtingesniu ir brangesniu.

Imunoblotingas apjungia fermentinį imuninį tyrimą (ELISA) su preliminariu elektroforetiniu viruso baltymų atskyrimu gelyje ir jų perkėlimu į nitroceliuliozės membraną. Imunobloto procedūra susideda iš kelių etapų (). Pirma, iš anksto išgrynintas ir sunaikintas iki sudedamųjų dalių, ŽIV yra veikiamas elektroforezės, o visi virusą sudarantys antigenai yra atskiriami pagal molekulinę masę. Tada blotuojant antigenai iš gelio perkeliami į nitroceliuliozės juostelę arba nailono filtrą, kuriame dabar yra ŽIV būdingas akiai nematomas baltymų spektras. Toliau ant juostelės uždedama tiriamoji medžiaga (serumas, paciento kraujo plazma ir kt.), o jei mėginyje yra specifinių antikūnų, jie jungiasi prie juos griežtai atitinkančių antigeninių baltymų juostelių. Dėl vėlesnių manipuliacijų (pvz., ELISA) šios sąveikos rezultatas vizualizuojamas – tampa matomas. Juostelių buvimas tam tikrose juostelės vietose patvirtina, kad tiriamame serume yra antikūnų prieš griežtai apibrėžtus ŽIV antigenus.

Imunoblotavimas dažniausiai naudojamas ŽIV infekcijos diagnozei patvirtinti. PSO mano, kad serumas yra teigiamas, jei imunoblotingu aptinkami antikūnai prieš bet kuriuos du ŽIV apvalkalo baltymus. Remiantis šiomis rekomendacijomis, jei yra reakcija tik su vienu iš apvalkalo baltymų (gp160, gp120, gp41) kartu arba be reakcijos su kitais baltymais, rezultatas laikomas abejotinu ir rekomenduojama atlikti antrą tyrimą naudojant rinkinį iš kitokio. serijos ar kitos firmos. Jei po to rezultatas lieka abejotinas, tyrimai tęsiami kas 3 mėnesius.

Imunoblotavimui pirmajame etape kraujo serume esantys baltymai atskiriami gelyje pagal jų molekulinę masę ir krūvį, naudojant elektrinį lauką (gelio elektroforezės metodas). Tada ant gelio užtepama nitroceliuliozės arba nailono membrana ir „sušlapinama“ (tai yra blotingas). Tai atliekama specialioje kameroje, kuri leidžia visiškai perkelti medžiagą iš gelio į membraną. Dėl to baltymų išdėstymo modelis, kuris buvo ant gelio, atkuriamas ant membranos (dėmės), kurią vėliau galima lengvai manipuliuoti. Iš pradžių membrana apdorojama antikūnais prieš norimą antigeną, o nuplovus nesurištą medžiagą, pridedamas radioaktyviai pažymėtas konjugatas, kuris specifiškai jungiasi su antikūnais (kaip ELISA). Gauto antigenu-antikūnu pažymėto konjugato komplekso vieta nustatoma autoradiografijos būdu naudojant rentgeno plėvelę. Po jo pasireiškimo viskas tampa aišku, ar kraujyje yra antigenų, ar ne.