Скринингово изследване за ХИВ. Скрининг и изследване за HIV антитела

Ранното откриване на HIV инфекция ви позволява да контролирате възпроизвеждането на вируса в кръвта и да предотвратите развитието на СПИН. Стандартен ELISA тест открива антитела в кръвната плазма на болен човек, които имунната система започва да произвежда един и половина до три месеца след инфекцията (появата им често е придружена от симптоми, характерни за грипа - треска и общо неразположение). PCR може да открие ХИВ в рамките на 2-3 седмици след заразяването.

С цел ранна диагностика на тази хронична вирусна инфекция се провеждат скринингови (масови) прегледи на групи от населението с повишен риск от ХИВ инфекция (например хора, употребяващи наркотици).

Такъв анализ може да бъде предписан от всеки лекар, ако подозира пациент или счита за необходимо да изключи ХИВ инфекцията. Стандартният тест може да бъде направен от всеки по собствено желание и безплатно, включително анонимно, в центровете за превенция на СПИН и техните филиали (пунктове). Резултатът от такъв анализ е медицинска тайна, тя се предоставя на пациента само лично.

Основни показания

  • след всеки незащитен сексуален контакт с нов, случаен, непознат партньор;
  • след изнасилване;
  • ако се установи, че сексуалният партньор (бивш, настоящ) е заразен с ХИВ;
  • ако партньорът е бил в ситуации с висок риск от инфекция;
  • ако въвеждането на наркотични вещества не е извършено с индивидуални спринцовки и игли;
  • след татуиране и пиърсинг с обикновени игли за група хора;
  • след използване на нестерилни игли и медицински инструменти;
  • след контакт с ХИВ-позитивна кръв;
  • ако е диагностициран със STD.

Това също трябва да се направи, ако има:

  • внезапна загуба на тегло без обективна причина;
  • необяснима хронична диария;
  • синдром на хронична умора;
  • чести настинки;
  • нощно изпотяване;
  • увеличаване на няколко групи лимфни възли;
  • чести случаи на вирусни инфекции.

Как да се подготвим за изследването

Вземането на кръв от вена се извършва на празен стомах, така че не се препоръчва да се яде 8 часа преди анализа.

Характеристики на анализа

Наличието на вируса в кръвната плазма се потвърждава с помощта на три теста - ELISA, имуноблотинг, PCR.

Имуноензимният анализ (ELISA) открива протеинови антитела срещу вируса, които започват да циркулират в кръвната плазма 3-6 месеца след появата му в организма. ELISA е доста чувствителен метод, чиято точност е до 99%.

Резултатът от този тест може да бъде положителен, отрицателен или неубедителен. Ако резултатът е серонегативен с висок риск от инфекция или съмнителен без такъв риск, тогава се предписват други тестове за ХИВ. Понякога ELISA показва фалшиво положителен резултат при инфекциозни, онкологични или автоимунни заболявания, което също налага назначаването на други изследвания.

Имуноблотинг- Това също е изследване за наличие на антитела в кръвната плазма, но по-чувствително. Серопозитивният тест потвърждава HIV инфекцията. Съмнителен тест се повтаря след 4-6 седмици. Ако резултатът не се е променил, тогава кръвта се взема още два пъти - на всеки 3 месеца или се провежда друго изследване.

Полимеразна верижна реакция (PCR) идентифицира ДНК на вируса в кръвната плазма 2-3 седмици след навлизането му в кръвта.

Въпреки това, цената на този тест и вероятността от фалшиви положителни отговори предполагат използването му само когато резултатите от двете предишни (стандартни) проучвания не позволяват да се диагностицира или изключи HIV инфекцията.

Ако има сериозно подозрение за ХИВ инфекция, по-добре е да се свържете с център за превенция на СПИН, където под ръководството на лекар да преминете през всички необходими изследвания и да получите надежден резултат.

Диагнозата на HIV инфекцията е от съществено значение за ефективното лечение.За диагностициране на СПИН се извършва стандартна процедура за изследване на пациента. Състои се от 2 етапа:

  • скрининг;
  • имунно блотиране.

За диагностициране допълнително се предписва PCR, експресно тестване.

ELISA

Първоначалната диагноза на СПИН се основава на използването на лабораторни HIV протеини, които улавят специфични антитела. След контакта им с ензимите на тест системата цветът на индикатора се променя. След това променената цветова схема се обработва със специално оборудване, което определя резултата от теста.

Подобна лабораторна диагностика на HIV инфекция показва резултат 21 дни след заразяването. С помощта на ELISA е невъзможно да се определи наличието на вируса. Този диагностичен метод помага да се открие производството на антитела срещу вируса. Подобен процес може да се наблюдава 2-6 седмици след заразяването.

Специалистите разграничават 4 поколения ELISA системи с различна чувствителност. Лекарите често използват тестове от 3-то и 4-то поколение. Тези системи се основават на рекомбинантни протеини или пептиди от синтетичен произход, които имат значителна точност и специфичност. ELISA се използва за откриване, наблюдение на разпространението на вируса, което гарантира безопасност при проверка на дарената кръв. Точността на такива системи варира от 93-99%. Тестовете, издадени в Западна Европа, са по-чувствителни. За извършване на диагностика лаборантът взема венозна кръв (5 ml). За 8 часа преди изследването се препоръчва да откажете да ядете. Проучването се провежда по-често сутрин.

Декриптиране на данни

Ще отнеме 10 дни, за да получите резултатите от теста. Ако резултатът е отрицателен, тогава пациентът не е заразен. В този случай лечението не се предписва. Открива се фалшиво отрицателен резултат:

  • до 3 седмици след инфекцията;
  • в последния стадий на СПИН с ниска имунна система;
  • с неправилна подготовка на кръвта.

Ако резултатът е положителен, тогава пациентът е заразен. В този случай се извършва IB. Фалшиво положителен резултат показва наличието на съпътстващи заболявания и неправилно извършена подготовка на кръвта. Ако тестът е показан за бременни жени, тогава в събрания материал лекарят може да открие неспецифични антитела, чието производство не е свързано с вируса. Събраният материал се изследва в референтна или арбитражна лаборатория. Ако резултатът от повторния тест е отрицателен, тогава първият резултат е грешен. В този случай IB не се извършва.

Извършване на имунен блот

Лечението на СПИН се прилага, когато се получи положителен резултат от имунен блотинг. Този диагностичен метод се извършва с нитроцелулозна лента, върху която са нанесени вирусни протеини. За IB се използва венозна кръв, която след това се обработва. Протеините, открити в суроватката, са разделени на групи въз основа на техния заряд и молекулно тегло. За извършване на този процес се използва специално оборудване.

Ако в тестовия материал има антитела срещу вируса, на лентата се появяват съответните линии. Положителният IB показва, че пациентът е ХИВ позитивен. Съмнителен резултат се открива в началните етапи на инфекция, с туберкулоза и онкология, при бременни жени. В такива случаи се препоръчва повторение на IB.

Неопределен IB резултат показва наличието на един или повече протеини към вируса в имуноблота. Подобна картина се наблюдава при скорошна инфекция, когато в кръвта има малко количество антитела срещу инфекцията. В този случай IB ще бъде положителен след известно време. Несигурният резултат от това изследване може да се дължи на липсата на ХИВ инфекция при хепатит, хронични метаболитни заболявания, по време на бременност. В този случай IB ще стане отрицателен или специалистите ще идентифицират причината за несигурния резултат при пациента.

PCR изследване

Защитната система е засегната на фона на въвеждането на вируса в човешкото тяло. Инкубационният период обикновено е 3 месеца. Ето защо, след сексуален контакт с партньор, заразен с HIV, се препоръчва да се подложи на PCR диагностика. Това ще ви позволи да определите РНК на вируса. Периодът, през който се препоръчва да се подложи на такова изследване, е 8-24 месеца.

За окончателната диагноза е показано редовно кръводаряване за ХИВ (1 път на 3 месеца). Поради високата си чувствителност, това изследване позволява да се открие вирусът 10 дни след заразяването. Фалшиво положителен PCR резултат може да се получи и при наличие на друга инфекция в тялото на пациента. PCR изследването се счита за скъпа процедура, тъй като изисква специално оборудване.

PCR се предписва за откриване на вируса при следните лица:

  • новородено, родено от ХИВ-инфектирана майка;
  • пациенти със съмнителен IB.

Също така, тази техника е показана за контрол на концентрацията на вируса в кръвта и изследване на донорска кръв.

Бързи методи за изследване

Специалистите включват бързите тестове към съвременните методи за диагностика на СПИН. Дешифрирането им ще отнеме 10-15 минути. Имунохроматографските тестове, базирани на капилярен поток, дават точни резултати. Такива системи за тестване са представени под формата на специални ленти, върху които се прилага кръв или слюнка. При наличие на вирус на теста се появяват 2 ленти след 10 минути:

  • контрол;
  • оцветени.

В този случай резултатът от теста е положителен. Отрицателният резултат се показва от появата на една контролна лента. За потвърждаване на получения резултат се провежда IB. Въз основа на общите данни лекарят поставя диагноза и предписва лечение.

Можете да откриете вируса у дома. За това се използват специални експресни комплекти. OraSure Technologies1 е система, разработена в САЩ. Ако след изследването се установи положителен резултат, на пациента се препоръчва да се подложи на пълен преглед в медицинския център.

Преглед на детето

Спешно се изследват новородени бебета, родени от заразени майки. С помощта на серологични методи е невъзможно точното откриване на вируса при деца на възраст 5-18 месеца. Но резултатът от такова проучване е важен при провеждане на IB.

Можете да откриете инфекция при деца с помощта на PCR. ДНК на вируса се открива от специалист при деца от първия месец от живота. За да се определи концентрацията на РНК на патогена, експертите определят провируса на имунната недостатъчност. За изследване лекарят използва цяла кръв или нейното изсушено петно. Материалът се поставя в епруветка с консервант EDTA (съотношение 1:20). Пробата трябва да се съхранява при температура не по-висока от 8°C (за 2 дни). Не се допуска замразяване на материала.

За да се получи суха кръвна проба, цялата течност се нанася върху специална хартия. Пробата може да се съхранява под 8°C. Картите се ползват 8 месеца. Новородено дете трябва да бъде прегледано, вземайки материал за изследване, в следните периоди:

  • 48 часа след раждането;
  • на възраст 2 месеца след раждането;
  • 3-6 месеца след раждането.

Ако лекарят открие гена на HIV провируса няколко часа след раждането на бебето, тогава бебето е било заразено вътрематочно. Можете също така да получите вируса по време на раждане или докато кърмите. Резултатите, които показват наличие на вирусна ДНК в 2 проби, показват развитие на СПИН при детето. Не се изисква диспансерно наблюдение, ако резултатите от PCR са отрицателни 4 месеца след раждането на бебето.

Ако резултатът от теста е отрицателен, но са налице симптомите на СПИН, тогава се препоръчва да се консултирате с лекар. Такава клиника може да бъде предизвикана от други заболявания. Тестването се счита за единственият и 100% метод за диагностициране на вирус. Дори квалифицирани и опитни специалисти не могат да идентифицират вируса по симптомите, които представя.

Ако след известно време резултатите на пациента са отрицателни, тогава в тялото няма ХИВ.

Не отчита симптомите. Но такава клинична картина може да бъде свързана със СПИН фобия. В този случай е необходима помощта на психолог. Ако е необходимо, на детето или възрастен се предписва подходящо лечение.

Навременната диагностика на ХИВ инфекцията става изключително важна мярка, тъй като по-ранното лечение може до голяма степен да определи по-нататъшното развитие на заболяването и да удължи живота на пациента. През последните години се наблюдава значителен напредък в областта на откриването на това ужасно заболяване: старите тестови системи се заменят с по-модерни, методите за изследване стават по-достъпни и тяхната точност се повишава значително.

В тази статия ще говорим за съвременните методи за диагностициране на ХИВ инфекцията, които са полезни за навременното лечение на този проблем и поддържането на нормалното качество на живот на пациента.

Методи за диагностициране на ХИВ

В Русия за диагностика на ХИВ инфекцията се провежда стандартна процедура, която включва две нива:

  • ELISA тест система (скрининг анализ);
  • имунно блотиране (IB).

Могат да се използват и други диагностични методи:

  • експресни тестове.

ELISA тест системи

На първия етап от диагностицирането се използва скринингов тест (ELISA) за откриване на HIV инфекция, който се основава на HIV протеини, създадени в лаборатории, които улавят специфични антитела, произведени в тялото в отговор на инфекция. След взаимодействието им с реагентите (ензимите) на тест системата цветът на индикатора се променя. Освен това тези промени в цвета се обработват на специално оборудване, което определя резултата от направения анализ.

Такива тестове ELISA са в състояние да покажат резултати в рамките на няколко седмици след въвеждането на HIV инфекцията. Този анализ не определя наличието на вируса, но открива производството на антитела към него. Понякога в човешкото тяло производството на антитела срещу ХИВ започва след 2 седмици след инфекцията, но при повечето хора те се произвеждат на по-късна дата, след 3-6 седмици.

Има четири поколения ELISA тестове с различна чувствителност. През последните години все по-често се използват тест системи от III и IV поколение, които са базирани на синтетични пептиди или рекомбинантни протеини и имат по-голяма специфичност и точност. Те могат да се използват за диагностициране на ХИВ инфекция, наблюдение на разпространението на ХИВ и осигуряване на безопасност при тестване на дарена кръв. Точността на тест системите III и IV поколение ELISA е 93-99% (по-чувствителни са тестовете, които се произвеждат в Западна Европа - 99%).

За провеждане на ELISA тест се вземат 5 ml кръв от вената на пациента. Между последното хранене и анализа трябва да са най-малко 8 часа (като правило се извършва сутрин на празен стомах). Такъв тест се препоръчва да се направи не по-рано от 3 седмици след предполагаемата инфекция (например след незащитен полов акт с нов сексуален партньор).

Резултатите от теста ELISA се получават след 2-10 дни:

  • отрицателен резултат: показва липсата на HIV инфекция и не изисква насочване към специалист;
  • фалшиво-отрицателен резултат: може да се наблюдава в ранните стадии на инфекцията (до 3 седмици), в по-късните стадии на СПИН при тежко потискане на имунната система и при неправилна подготовка на кръвта;
  • фалшив положителен резултат: може да се наблюдава при някои заболявания и при неправилна подготовка на кръвта;
  • положителен резултат: показва инфекция с HIV инфекция, изисква IB и насочване на пациента към специалист в център за СПИН.

Защо тестът ELISA може да даде фалшиво положителни резултати?

Фалшиво положителни резултати от ELISA тест за ХИВ могат да се наблюдават при неправилна обработка на кръвта или при пациенти с такива състояния и заболявания:

  • множествена миелома;
  • инфекциозни заболявания, провокирани от вируса на Epstein-Barr;
  • състояние след ;
  • автоимунни заболявания;
  • на фона на бременност;
  • състояние след ваксинация.

Поради описаните по-горе причини в кръвта могат да присъстват неспецифични кръстосано реагиращи антитела, чието производство не е провокирано от HIV инфекция.

През последните години честотата на фалшивите положителни резултати значително намаля поради използването на тестови системи от III и IV поколение, които съдържат по-чувствителни пептидни и рекомбинантни протеини (те се синтезират чрез in vitro генно инженерство). След използването на такива ELISA тестове, честотата на фалшиво положителни резултати значително намалява и е около 0,02-0,5%.

Фалшиво положителен резултат не означава, че човек е заразен с ХИВ. В такива случаи СЗО препоръчва друг тест ELISA (задължително IV поколение).

Кръвта на пациента се изпраща в референтна или арбитражна лаборатория с надпис „повтаряне“ и се изследва на IV поколение тест система ELISA. Ако резултатът от новия анализ е отрицателен, тогава първият резултат се признава за грешен (фалшиво положителен) и IB не се извършва. Ако резултатът е положителен или съмнителен по време на втория тест, пациентът трябва да се подложи на IB след 4-6 седмици, за да потвърди или отхвърли HIV инфекцията.

имунно блотиране

Окончателна диагноза на ХИВ инфекция може да бъде направена само след получаване на положителен резултат от имуноблотинг (IB). За изпълнението му се използва нитроцелулозна лента, върху която се нанасят вирусни протеини.

Вземането на кръв за IB се извършва от вена. След това се подлага на специална обработка и съдържащите се в серума му протеини се разделят в специален гел според техния заряд и молекулно тегло (манипулацията се извършва на специално оборудване под въздействието на електрическо поле). Нитроцелулозна лента се нанася върху гела от кръвен серум и се извършва блотинг („блотинг“) в специална камера. Лентата се обработва и ако използваните материали съдържат антитела срещу HIV, те се свързват с антигенните ивици на IB и се появяват като линии.

IB се счита за положителен, ако:

  • според американските критерии на CDC - на лентата има две или три линии gp41, p24, gp120 / gp160;
  • според американските критерии на FDA - има две линии p24, p31 и линия gp41 или gp120 / gp160 на лентата.

В 99,9% от случаите положителният IB резултат показва HIV инфекция.

При липса на линии - IB е отрицателен.

При идентифициране на линии с gp160, gp120 и gp41, IB е съмнително. Такъв резултат може да бъде открит, когато:

  • онкологични заболявания;
  • бременност;
  • чести кръвопреливания.

В такива случаи се препоръчва да се направи второ изследване с помощта на комплект от друга фирма. Ако след допълнително IB резултатът остане съмнителен, тогава е необходимо проследяване в продължение на шест месеца (IB се извършва на всеки 3 месеца).

полимеразна верижна реакция

PCR тестът може да открие РНК на вируса. Неговата чувствителност е доста висока и позволява откриване на HIV инфекция още 10 дни след заразяването. В някои случаи PCR може да даде фалшиво положителни резултати, тъй като високата му чувствителност може да реагира и на антитела към други инфекции.

Тази диагностична техника е скъпа, изисква специално оборудване и висококвалифицирани специалисти. Тези причини не позволяват то да се извършва при масово тестване на населението.

PCR се използва в такива случаи:

  • за откриване на ХИВ при новородени, родени от инфектирани с ХИВ майки;
  • за откриване на ХИВ в "периода на прозореца" или при съмнителна ИБ;
  • за контрол на концентрацията на ХИВ в кръвта;
  • за изследване на донорска кръв.

Само чрез PCR теста диагнозата ХИВ не се поставя, а се извършва като допълнителен диагностичен метод за разрешаване на спорове.


Експресни методи

Една от иновациите в диагностиката на ХИВ се превърна в бързи тестове, резултатите от които могат да бъдат оценени след 10-15 минути. Най-ефективни и точни резултати се получават с имунохроматографски тестове, базирани на принципа на капилярния поток. Те представляват специални ленти, върху които се нанася кръв или други тестови течности (слюнка, урина). При наличие на антитела срещу HIV, след 10-15 минути върху теста се появява цветна и контролна лента - положителен резултат. Ако резултатът е отрицателен, се появява само контролната линия.

Както при ELISA тестовете, резултатите от бързия тест трябва да бъдат потвърдени от IB анализ. Само тогава може да се постави диагноза ХИВ инфекция.

Има експресни комплекти за домашно тестване. Тестът OraSure Technologies1 (САЩ) е одобрен от FDA, предлага се без рецепта и може да се използва за откриване на ХИВ. След теста, в случай на положителен резултат, на пациента се препоръчва да се подложи на преглед в специализиран център за потвърждаване на диагнозата.

Останалите тестове за домашна употреба все още не са одобрени от FDA и техните резултати могат да бъдат много съмнителни.

Въпреки факта, че бързите тестове са по-ниски по точност от тестовете ELISA от IV поколение, те се използват широко за допълнително изследване на населението.

Можете да се изследвате за ХИВ инфекция във всяка поликлиника, ЦРБ или в специализирани центрове за СПИН. На територията на Русия те се провеждат абсолютно поверително или анонимно. Всеки пациент може да очаква да получи медицински или психологически съвети преди или след анализа. Ще трябва да плащате за тестове за ХИВ само в търговските медицински институции, а в държавните клиники и болници те се извършват безплатно.

За информация как можете да се заразите с ХИВ и какви митове съществуват относно възможностите за заразяване, прочетете

За ранна диагностика се използва тест за HIV инфекция. Методите за диагностициране на инфекция непрекъснато се подобряват, тъй като основните симптоми на заболяването не се появяват веднага, маскирайки се като други патологии. Освен това при лабораторните изследвания процентът както на фалшиво положителни, така и на фалшиво отрицателни резултати е висок.

Тестовите системи използват кръв за определяне на ХИВ, по-рядко използват урина и изстъргване от устната лигавица.

Етапи на диагностициране на ХИВ инфекция при възрастни:

    Предварителен - скрининг, който избира кандидати в риск (вероятно заразени);

    справка

    Констативен - експертен етап.

От етап на етап сложността, трудоемкостта и цената на изследователските методи нарастват.

Термини, използвани в хода на диагностиката на ХИВ:

    Антиген - HIV или негови части (капсула, ензими, липиди, протеини).

    Антитялото е клетка на имунната система, произведена от тялото срещу въвеждането на вирусна инфекция.

    Сероконверсията е имунен отговор на защитната система срещу активното възпроизвеждане на вируса. Веднага след навлизането в тялото ХИВ клетките започват активно да се делят. В отговор концентрацията на антитела се повишава за няколко седмици. Когато достигнат определено ниво (сероконверсия), тестовите системи са достъпни за диагностика. Тъй като концентрацията на вируса пада, нивото на антителата пада.

    "Период на прозореца" - интервалът от време от момента на заразяване до появата на сероконверсия, отнема от 1,5 до 3 месеца. Заразеният човек през този период е особено опасен като носител на инфекция, тъй като тестът за ХИВ показва фалшиво отрицателен резултат, въпреки че рискът от предаване на болестта е изключително висок.


По време на скрининга се извършва ензимен имуноанализ (ELISA) за определяне на общите антитела срещу HIV-1 и HIV-2. Той показва точни резултати не по-рано от 3-6 месеца след заразяването, въпреки че има изключения: може да открие антитела срещу ХИВ 3-5 седмици след опасен контакт.

Тестовите системи от четвърто поколение са най-точни. В допълнение към антителата към вируса, те са в състояние да определят и антигена към ХИВ (p-24-капсид), което прави възможно откриването на вируса дори в „периода на прозореца“, преди появата на антитела.

Високата цена на такива тест системи принуждава в много страни да използват системи от трето и дори второ поколение, които определят само наличието на антитела.

Такива системи дават фалшиви положителни резултати при следните условия:

    Инфекция по време на бременност;

При положителен резултат от имуноензимния анализ се преминава към следващия етап на диагностика.

Референтна стъпка в диагностиката на ХИВ

При по-чувствителни тестови системи се използва двойна диагностика. Два положителни резултата са причина за преминаване към следващо ниво на диагностика.

Експертен етап – имуноблотинг

На този етап се определят антителата към отделните протеини на вируса на човешката имунна недостатъчност.

Етапи на експертния етап:

    Разрушаване на вируса на отделни антигени чрез електрофореза.

    Трансфер на антигени чрез метода на блотиране върху специални ленти с предварително нанесени HIV-специфични протеини.

    Фиксиране на реакцията, която възниква, ако кръвта на пациента съдържа антитела срещу антигени.

Има малък риск от грешка - фалшиво отрицателен резултат. Възможно е, ако изследването се проведе в терминалния стадий на заболяването или в "периода на прозореца".

В комбинация с други тестове се използва методът PCR (полимеразна верижна реакция). Характеризира се с повишена чувствителност към вируса, което може да доведе до голям процент фалшиво положителни резултати.

Диагностика при деца, чиито майки са HIV-инфектирани

Тестването на такива деца има свои собствени характеристики - антителата на майката срещу ХИВ могат да присъстват в кръвта на детето, преминало през плацентата по време на раждането. Те могат да продължат до 15-18 месеца от раждането на бебето. ако няма такива антитела, това не е сто процента доказателство, че детето не е заразено с вируса.

Решаващата роля в диагностиката на ХИВ инфекцията се играе от лабораторната диагностика, която се състои в откриването на антитела срещу ХИВ в кръвта чрез ELISA, последвано от потвърждаване на положителни резултати от IB. Този метод за диагностициране на ХИВ инфекцията дава възможност за идентифициране на заразени с ХИВ лица с ефективност от 99%.

Показания за използване на различни лабораторни тестове и характеристики на интерпретацията на резултатите

Понастоящем за етапа на скрининг за диагностициране на HIV инфекцията се използват комплекти от реагенти от трето и четвърто поколение, базирани на метода ELISA. Отличителна черта на тестовете от четвърто поколение е възможността за едновременно откриване на АН (р24) и общо АТ, докато тестовете от трето поколение позволяват определяне само на АТ. Когато е възможно, трябва да се предпочитат тестове от четвърто поколение поради тяхната по-висока диагностична чувствителност и способността за откриване на инфекция при индивиди по време на серологичния прозорец.

Отрицателният резултат при откриване на антитела срещу HIV чрез ELISA не винаги показва липсата на инфекция. Сериозен проблем са тези случаи, когато тестът се провежда по време на серологичния прозорец, т.е. през първите седмици след инфекцията, когато антителата срещу HIV все още не са разработени в достатъчни количества. При някои индивиди серологичният прозорец може да продължи няколко месеца, така че ако има доказателства за излагане на заразени с ХИВ индивиди, повторните тестове обикновено се извършват след 2-3 месеца. Фалшиво-отрицателни резултати от откриването на антитела срещу HIV с помощта на ELISA могат да бъдат получени в терминалния стадий на заболяването, характеризиращо се с тежко увреждане на имунната система с дълбоко увреждане на образуването на антитела.

Положителният резултат от откриването на антитела чрез ELISA показва вероятността от заразяване с HIV инфекция, но понякога този резултат може да бъде фалшиво положителен, например, ако човек има тумори, алергични заболявания, по време на бременност, с автоимунни заболявания, значителни промени в биохимични кръвни изследвания, редица хронични заболявания. В такива случаи са необходими допълнителни изследвания в експертна лаборатория.

Ако се получи положителен резултат от откриването на антитела срещу HIV чрез ELISA, е необходимо неговото потвърждение. На първия етап на потвърждение анализът се повтаря в същата тестова система в две ямки - това елиминира технически грешки. Ако резултатът се потвърди, определянето на антитела чрез ELISA в серума на пациента се повтаря с помощта на два референтни комплекта реактиви. Ако се получи положителен резултат при поне едно от тези изследвания, се предприема третият етап на потвърждение: изследване по метода IB, което позволява откриване на антитела към отделни HIV антигенни протеини.

Резултатите, получени по метода IB, се интерпретират като положителни, съмнителни и отрицателни. Резултатите се считат за отрицателни (отрицателни), ако в тестовия серум не са открити антитела към някой от антигените на HIV или има слаба реакция с протеина p17. Най-убедителната причина за положителна реакция е откриването на антитела срещу протеини на обвивката на HIV (гликопротеини gp41, gp120, gp160). Резултатът се счита за положителен, ако се открият антитела срещу всеки два HIV гликопротеина. Ако има реакция само с един от протеините на обвивката, в комбинация с реакция с други протеини или без него, резултатът се счита за съмнителен, в този случай се препоръчва да се проведат тестове за откриване на p24 антиген или HIV ДНК / РНК. Ако се открие р24 хипертония или HIV ДНК/РНК, повторен тест с IB се извършва 2 седмици след първия неопределен резултат и на всеки 2 седмици след това, докато се получи положителен резултат при потвърдителния тест. Ако 6 месеца след първия преглед отново се получат неопределени резултати и пациентът няма рискови фактори за инфекция и клинични симптоми на HIV инфекция, резултатът се счита за фалшиво положителен.

Често, след 1-3-6 месеца от момента на получаване на съмнителен резултат, антителата срещу всички HIV антигени се появяват един след друг в кръвния серум. В този случай съмнителен резултат е доказателство за началния стадий на ХИВ инфекцията. В някои случаи се наблюдават съмнителни резултати от IB при неинфектирани индивиди, които имат антитела в телата си, подобни на истинските антитела срещу HIV.

Един от косвените признаци на HIV инфекция е селективно намаляване на CD4+ Т-хелперните клетки поради факта, че HIV има тропизъм към CD4 клетъчния рецептор. Въпреки това, тези промени може да липсват на определени етапи от ХИВ инфекцията, да варират от пациент на пациент и да се появят при други заболявания. Така че при възрастни пациенти, които са в латентния стадий на заболяването, броят на CD4 + лимфоцитите обикновено надвишава 0,5. 109/l, което отговаря на стойностите при здрави хора.