Serumo diagnostinė salmonelė adsorbuota. Petsal®

Serumo salmonelės polivalentė ABCDE

I N S T R U K T I A

dėl reagentų rinkinio naudojimo

Serumo diagnostinė salmonelė

adsorbuotas O polivalentinis

agliutinacijos reakcijai"

Registracijos pažymėjimas Nr. RZN 2017/591406 .07 .2017 G.

TIKSLAS

Reagentų rinkinys „Diagnostinis salmonelių serumas, adsorbuotas O-polivalentas agliutinacijos reakcijai“ skirtas identifikuoti naudojant agliutinacijos reakciją (RA) ant stiklinio Salmonella genties bakterijų, išskirtų iš žmogaus biologinės medžiagos (šlapimo, išmatų, skrandžio plovimo, vėmimas).

Aprašyta daugiau nei 2400 patogeninių Salmonella serovarų, sukeliančių ūminį žmonių gastroenteritą, į vidurių šiltinę panašias ir septikopiemines ligos formas, kurios vienijamos salmoneliozės pavadinimu. Pagrindiniai salmoneliozės sukėlėjai yra Salmonella serovars enteritidis, typhi murium, cholerae-suis, haifa ir kt.

Reagentų rinkinys „Diagnostic salmonella sera adsorbed O-polyvalent for agliutination response“ skirtas tokioms bakterijoms identifikuoti, kad būtų paskirtas teisingas paciento gydymas.

Rinkinį galima įsigyti 4 konfigūracijų:

Rinkinys Nr. 1 Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių (A, B, C,D, E):

Rinkinys Nr.1/1 - Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių O-serumas, sausas;

Rinkinys Nr.1/2 - Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių O-serumas, skystas;

Rinkinys Nr. 2 Salmonella polivalentinis retų grupių O serumas:

Rinkinys Nr.2/1 - Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas, sausas;

Rinkinys Nr.2/2 - Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas, skystas.

Kiekvienas pilno komplekto variantas 2 egzekucijomis.

SUDĖTIS IR PILNAS KOMPLEKTAS

1 versija 2 vykdymas
Rinkinys Nr. 1 Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių (A, B, C, D, E) O-serumas
Rinkinys №1/1 sausas imuniniu būdu adsorbuotas triušio ar avino kraujo serumas, turintis O-agliutininų prieš antigenus 1;2;3.4;5;6.1;6.2;7;8;9;10;12,Vi; inaktyvuotas; amorfinė baltos arba kreminės spalvos masė 5 buteliukai (po 2,0 ml) 1 buteliukas (po 2,0 ml)
Rinkinys №1/2 skystas imuniniu būdu adsorbuotas triušio ar avino kraujo serumas, turintis O-agliutininų prieš antigenus 1;2;3.4;5;6.1;6.2;7;8;9;10;12,Vi; inaktyvuotas; bespalvis arba rausvai gelsvas skystis 5 buteliukai (po 2,0 ml) 1 buteliukas (po 2,0 ml)
Rinkinys №2 Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas

Rinkinys №2/1

sauso imuninio adsorbuoto triušio ar avino kraujo serumas iš šių grupių (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V , X, Y , Z,52,53,54′ 55,57, 58, 59, 60, 61), kurių sudėtyje yra O-agliutininų prieš antigenus 11;13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; aštuoniolika; 21;28; trisdešimt; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; penkiasdešimt; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61); inaktyvuotas; amorfinė baltos arba kreminės spalvos masė 5 buteliukai (po 2,0 ml) 1 buteliukas (po 2,0 ml)
Rinkinys №2/2 skystas imuniniu būdu adsorbuotas šių grupių triušių arba avinų kraujo serumas (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V, X, Y , Z,52,53,54′ 55,57, 58, 59, 60, 61), kurių sudėtyje yra O-agliutininų prieš antigenus 11;13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; aštuoniolika; 21;28; trisdešimt; 35; 38; 39; 40; 41; 42; 43; 44; 45; 47; 48; penkiasdešimt; 52; 53; 54; 55; 57; 58; 59; 60; 61); inaktyvuotas; bespalvis arba rausvai gelsvas skystis 5 buteliukai (po 2,0 ml) 1 buteliukas (po 2,0 ml)

Rinkinio komponentai supakuoti į dėžutę, dėžutėje pridedama naudojimo instrukcija.Salmonella bakterijų antigeninės struktūros sutrumpinta schema. .

PAGRINDINĖS VARTOTOJŲ CHARAKTERISTIKOS

Pagrindinės rinkinių versijos skirtos 200 (1 versija) arba 40 mėginių (2 versija) tyrimui.

VEIKIMO PRINCIPAS

Adsorbuotuose serumuose yra antikūnų, kurie agliutinuoja salmonelių kultūras, turinčias homologinių O antigenų, ir neagliutinuoja salmonelių kultūrų, kuriose yra heterologinių O antigenų.

TYRIMO PAVYZDŽIAI

Tiriama bakteriologinių tyrimų metu iš biologinės medžiagos (šlapimo, išmatų, skrandžio plovimo, vėmalų) išskirta kultūra, auginama mėgintuvėliuose ant pasvirusio maistinio agaro 18-20 valandų 37 0 C temperatūroje.

Išskirtą kultūrą leidžiama laikyti ant maistinių medžiagų agaro +2 - +8 temperatūroje 2 dienas.

Žmogaus biologinės medžiagos rinkimas, saugojimas ir paruošimas turi būti atliekamas pagal GOST R 53079.4-2008 „Klinikinių laboratorinių tyrimų kokybės užtikrinimas“, MU 4.2.2723-10 „Laboratorinė salmoneliozės diagnostika, salmonelių nustatymas maisto ir aplinkos objektuose“. “.

ANALITINĖS IR DIAGNOSTINĖS CHARAKTERISTIKOS

Konkreti veikla:

Analitinis jautrumas: nustatytas su homologinėmis salmonelių testo padermėmis ir yra 100 proc.

Analitinis specifiškumas : nustatytas su heterologinėmis muziejaus salmonelių testo padermėmis ir yra 100 proc.

Rezultatų atkuriamumas yra 100%.

Diagnostinis jautrumas (su 95 %) patikimumo lygiu buvo:

Diagnostinis specifiškumas (su 95 %) patikimumo lygiu buvo:

Muziejinės salmonelių padermės - 98,07% -100%;

Iš pacientų klinikinės medžiagos išskirtos salmonelių kultūros – 98,25% -100%.

ATSARGUMO PRIEMONĖS

Rinkinys yra biologiškai saugus, tačiau tiriamieji mėginiai turi būti tvarkomi kaip potencialiai užkrečiama medžiaga.

Atsargumo priemonės dirbant su rinkiniu – taisyklių „Infekcinių ligų plitimo prevencijos priemonių, dirbant medicinos įstaigų klinikinės diagnostikos laboratorijose, instrukcijos“ (Patvirtinta SSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1991 m. sausio 17 d.), GOST laikymasis. R 52905–2007 (ISO 15190: 2003).

Reagentų rinkinys pagal SanPiN 2.1.7.2790-10 „Medicininių atliekų tvarkymo sanitariniai ir epidemiologiniai reikalavimai“ priklauso B klasei (epidemiologiškai pavojingos atliekos).

Reagentų rinkinių perdirbimas arba sunaikinimas, dezinfekavimas turi būti atliekamas pagal SanPiN 2.1.7.2790-10 „Medicininių atliekų tvarkymo sanitariniai ir epidemiologiniai reikalavimai“ ir MU 287-113 „Dezinfekavimo, valymo prieš sterilizaciją ir sterilizavimo gairės. Medicininiai prietaisai."

TAIKYMO BŪDAS

Įranga ir medžiagos („rankiniam“ nustatymui)

Chronometras;

Šaldymo kamera su temperatūros režimu 2-8 0 С;

Pusiau automatinės pipetės, kurių veikimo diapazonas: 5-50 µl, 20-200 µl;

Nurodytų pipečių vienkartiniai antgaliai;

Skystų ir kietų atliekų konteineriai;

Gumines arba lateksines pirštines, dezinfekavimo priemones;

Kilpa yra bakteriologinė;

Stiklinės skaidrės;

Didintuvas su padidinimu (2x);

0,9% natrio chlorido tirpalas;

Sauso oro termostatas, palaikantis temperatūrą (37 ± 1) °С;

70 % etilo alkoholio tirpalo ir 6 % vandenilio peroksido tirpalo (dezinfekavimo tirpalai) arba kitų dezinfekcinių medžiagų tirpalų, patvirtintų naudoti pagal SP 1.32322-08.

TAIKYMO BŪDAS

RA nustatymas ant stiklo

Salmonella polivalentinis O serumas

Sausos išrūgos ištirpinamos 2 ml 0,9% vandeninio natrio chlorido tirpalo

Ant stiklelio užlašinamas vienas lašas (apie 50 μl) serumo ir vienas lašas 0,9 % vandeninio natrio chlorido tirpalo. Atpažįstama kultūra, auginama mėgintuvėliuose ant pasvirusio maistinio agaro 18–20 valandų 37 °C temperatūroje, kilpa pašalinama iš viršutinės agaro dalies ir uždedama ant stiklelio šalia lašelio 0,9% vandeninio natrio chlorido tirpalo. tirpalas ir emulsintas (kontrolė, ar nėra savaiminės agliutinacijos). Nesant spontaniškos agliutinacijos, manipuliavimas kartojamas lašeliu O-serumo, suformuojant vienodą nepermatomą suspensiją. Rezultatai registruojami 1-2 minutes, švelniai purtant stiklinę. Vienalytė suspensija rodo neigiamą rezultatą.
Esant tiriamai padermei agliutininų, serumo laše per 1-2 minutes atsiranda sluoksniuotas agliutinatas.

Apskaitos rezultatas RA gaminti vizualiai naudojant padidinamąjį stiklą (2x) pagal keturių ginklų sistemą

Į RA rezultatus atsižvelgiama ir jie vertinami taip:

++++ - ryškus agliutinatas, visiškai išvalantis skystį lašelyje (100%).

+++ - ryškus agliutinatas drumsto skysčio fone (75%)

++ - nedidelis agliutinatas drumsto skysčio fone (50%)

+ - agliutinato pėdsakai, skystis lašelyje drumzlinas (25%)

(–) – neigiamas rezultatas, vienalytis drumstas skystis laše (0%).

Į RA su diagnostiniu serumu atsižvelgiama tik tuo atveju, jei spontaninės agliutinacijos kontrolės rezultatas yra neigiamas.

Tirta kultūra priskiriama atitinkamai O grupei, jei ant stiklo gaunamas bent (+++) RA su šios grupės polivalentiniu serumu.

GERIAUSIAS IKI DATA

Rinkinys Nr.1/1, Nr.1/2. Salmonella polivalentinis O-serumas, sausas – 3 metai nuo gamintojo OPF priėmimo datos.

Serumai diagnostiniai salmonelės adsorbuoti agliutinuojantys sausai RA PETSAL O - tipiški: 1, 2, 3,10, 4, 5, 6,1, 6,2, 627, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,22, 14,24, 6,17 , 18, 19, 20, 21, 23, 24, 25, 28, 30, 34, 35, 38, 40, 41, 42, 43 ,44, 45, 46, 47, 48, 50, 52, 43 , 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 65, 66, 67, Vi

Serumo diagnostikos salmonelės PETSAL O tipo

PETSAL® polivalentinis O serumas, adsorbuotas agliutinacijos reakcijai (RA), gaunamas iš triušių kraujo, turintis O antikūnų prieš pagrindinių salmonelių grupių antigenus

Serumo diagnostikos salmonelės PETSAL O tipo Funkcinė paskirtis

Serologinis Salmonella spp. pagal Kauffman-White schemą agliutinacijos reakcijoje ant stiklo be tolesnio skiedimo.
Pagrindinių grupių (A, B, C, D, E) daugiavalenčiuose serumuose yra O-antikūnų prieš 1 antigenus; 2; 3; keturi; 5; 61; 62; 7; aštuoni; 9; dešimt; 12; vi. Specifinių antikūnų titras ne mažesnis kaip 1:40.
Adsorbuotuose serumuose yra antikūnų, kurie agliutinuoja salmonelių kultūras, turinčias homologinių O ir H antigenų, ir neagliutinuoja salmonelių kultūrų, kuriose yra heterologinių O ir H antigenų. Reakcijos rezultatų apskaita atliekama pagal keturių kryžių sistemą 1-2 minutes

Serumo diagnostikos salmonelės PETSAL O tipo specifikacijos

Serumai, 2 ml, liofilizuoti.
Vienalytės kreminės spalvos milteliai, higroskopiški.
Supakuota į 5 ml talpos ampules, hermetiškai uždarytas. Pakavimas ir ženklinimas pagal TU 9389-008-01895016-07 5 arba 10 to paties pavadinimo ampulių pakuotėje arba kartoninėje dėžutėje. Kiekvienoje dėžutėje yra naudojimo instrukcijos, sutrumpinta Salmonella genties bakterijų antigeninės struktūros schema, ampulės peilis.
Vaistas laikomas sausoje, tamsioje patalpoje +4–10°C temperatūroje.
Tinkamumo laikas - 3 metai nuo pagaminimo datos, nurodytos ant pakuotės.
Registruotas FS SZ.

Gaukite taip pat, kaip ir kitus diagnostinius serumus. Naudojamas salmonelių serotipams nustatyti agliutinacijos reakcijoje.

Salmonella O- ir H-monodiagnosticums. Tai salmonelių suspensijos, nužudytos kaitinant (O-diagnosis-we) arba gydant formalinu (H-diagnosticums). Naudojamas vidurių šiltinės serodiagnostikai Vidal reakcijos metu.

Tipiški salmonelių bakteriofagai. Naudojamas Salmonella pha-tipo nustatymui.

Vienkartinė vidurių šiltinės vakcina ir vidurių šiltinės alkoholio vakcina, praturtinta Vi-antigenu. Taikoma specifinei aktyviajai vidurių šiltinės profilaktikai.

Daugiavalentis vidurių šiltinės bakteriofagas. Galima įsigyti tablečių pavidalu su rūgštims atsparia danga. Naudojamas neatidėliotinai vidurių šiltinės profilaktikai.

Kolibakterinas. Sudėtyje yra liofilizuotų gyvų ląstelių E.coli padermė M17, kuri turi ryškių antagonistinių savybių prieš daugelį patogeninių žarnyno bakterijų. Vartojamas žarnyno mikroflorai normalizuoti sergant disbakterioze ir dizenterijai gydyti, daugiausia vaikams.

Bifidumbakterinas. Sudėtyje yra liofilizuotos gyvų ląstelių suspensijos B. bifidum. Vartojamas lėtinėms neaiškios etiologijos žarnyno infekcijoms gydyti vaikams ir dizenterija.

Bifikol. Sudėtyje yra džiovintų gyvų bakterijų mišinio E.coli padermė M17 ir B. bifidum. Naudojimo indikacijos yra tos pačios.

Laktobakterinas. Sudėtyje yra laktobacilų atliekų. Galima įsigyti tablečių pavidalu. Vartojamas vaikų disbakteriozei gydyti.

Antibiotikai: sulfonamidai, pusiau sintetiniai penicilinai, 2-4 kartos cefalosporinai, chloramfenikolis, tetraciklinai, fluorochinolonai, polimiksinas.

13.3 tema. MAISTO PATOGENAI

TOKSINĖS INFEKCIJOS, INDOKSIKOCIJOS, CHOLERA

IR KITOS BATERINĖS ŽARNYNO INFEKCIJAS

Planuoti

Programa

1. Choleros, maisto toksinių infekcijų ir intoksikacijų sukėlėjų biologinės savybės. Jų patogeniškumas, ekologija, infekcijos ypatumai ir sukeltų ligų epidemiologija.

2. Laboratorinė diagnostika.

3. Diagnostiniai, profilaktiniai ir gydomieji vaistai.


Demonstracija

1. Tepinėliai iš grynųjų žarnyno infekcijų apsinuodijimo maistu patogenų kultūrų: Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Vibrio cholerae. Gramo dažymas.

2. Diagnostiniai ir gydomieji-profilaktiniai preparatai.

Užduotis studentams

1. Mikroskopu ir paimkite tepinėlį iš grynų žarnyno infekcijų sukėlėjų kultūrų.

2. Bakteriologinė choleros diagnostika.

2.1. Nurodykite medžiagą tyrimui.

2.2. Iš paciento išskirtos grynos vibrio kultūros identifikavimas:

1) ištirti morfologines ir tinktūrines savybes: mikroskopiškai tepinėti iš paciento išskirtos grynosios kultūros;

2) tirti antigenines savybes: pasižymėti ekstensyvios agliutinacijos reakcijos su diagnostiniu O1 serumu rezultatus;

3) tirti biochemines savybes: pasižymėti heksamininio tyrimo rezultatą;

4) nustatyti išskirtos kultūros jautrumą diagnostiniams bakteriofagams;

5) atkreipkite dėmesį į galimybę augti terpėje su polimiksinu;

6) pateikti išvadą.

3. Botulizmo diagnozė:

1) nurodyti tyrimo medžiagą;

2) analizuoti RIGA rezultatus, siekiant nustatyti botulino toksiną paciento kraujo serume (Boydeno reakcija). Pateikite išvadą.

4. Susipažinkite su diagnostikos ir gydymo specialistais
pieno preparatai.

Gairės

BATERINIŲ MAISTO TOKSINIŲ INFEKCIJŲ MIKROBIOLOGINĖ DIAGNOSTIKA

Maistui toksinių infekcijų, kurias sukelia Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., mikrobiologinė diagnostika.

MEDŽIAGA TYRIMAI: išmatos, vėmalai, ligonio skrandžio plovimai, maisto likučiai – galimi infekcijos perdavimo šaltiniai ir veiksniai.

DIAGNOZĖS METODAI:

Gaminamas sėjant


Medžiaga diferencinei diagnostikai ir pasirenkamoms terpėms (Endo, bismuto sulfito agaras ir kt.), skirta Salmonella ir Escherichia grynai kultūrai išskirti, taip pat kondensaciniam vandeniui mėgintuvėlyje su pasvirusiu maistiniu agaru genties bakterijoms identifikuoti. Proteusas. Po 20–24 valandų inkubacijos 37 °C temperatūroje kolonijų spalva lėkštelėse su skirtinga terpe ir „šliaužiantis“ augimas, būdingas Proteus spp., mėgintuvėlyje su pasvirusiu maistinių medžiagų agaru. Įtartinos kolonijos persodinamos ant maistinių medžiagų agaro, kad būtų gautos grynos kultūros, ir kartu su jomis atliekamas apytikslis agliutinacijos tyrimas ant stiklo, naudojant diagnostinių serumų mišinį. Kitą dieną su gryna kultūra atliekama išsami agliutinacijos reakcija su atitinkamu monoreceptorių serumu ir sėjama ant „margos“ serijos terpės. Kai iš sergančių žmonių organizmo ir maisto produkto išskiriamas tas pats Salmonella ar Escherichia serovaras, daroma galutinė išvada apie apsinuodijimo maistu etiologiją – ligos šaltinį. Esant „šliaužiančiam“ augimui ant pasvirusio maistinio agaro, iš kondensacinio vandens paimama kilpa „kabančio“ lašo preparato paruošimui, kad būtų nustatytas judrumas, ir tepinėliui, kuris dažomas Gramo metodu. ir mikroskopiškai. Tada išskiriama grynoji kultūra, nustatomi biocheminiai ir kiti požymiai bei nustatoma forma: P.vulgaris, P.mirabilis, P.morganii ir P. rettgeri.

Vertinant oportunistinių mikroorganizmų vaidmenį apsinuodijimo maistu etiologijoje, reikėtų griežtai argumentuoti: a) bakteriologinis, serologinis, epidemiologinis ir klinikinis salmoneliozės, dizenterijos, choleros pašalinimas; b) identiškų oportunistinių bakterijų padermių išskyrimas iš vėmalų, skrandžio plovimo, išmatų, produktų.

BAKTERINĖS PRIGŪBĖS MAISTO INDOKSIKOCIJŲ MIKROBIOLOGINĖ DIAGNOSTIKA

Stafilokokinio apsinuodijimo maistu mikrobiologinė diagnostika

MEDŽIAGA TYRIMAI: vėmimas, skrandžio plovimas, įtartini maisto produktai.

DIAGNOZĖS METODAI:

Ekspresinės diagnostikos metodai: imunocheminiai, biocheminiai ir molekuliniai biologiniai tyrimai. Imunocheminiai tyrimai. Diagnozė pagrįsta enterotoksino aptikimu tiriamojoje medžiagoje. Enterotoksinas Staphylococcus spp. ekstrahuojamas izotoniniu tirpalu


natrio chlorido romo, tada jo buvimas ir serologinis specifiškumas nustatomas pagal nusodinimo reakciją gelyje su imuniniais antitoksiniais serumais A, B, C. Reakcijos technika aprašyta aukščiau (žr. 10.1.6 pav.). Taip pat taikoma latekso agliutinacija, ELISA, RIA ir kt.

bakteriologiniai tyrimai. Norint išskirti gryną stafilokokų kultūrą, tiriamoji medžiaga, kurioje gali būti gyvybingų bakterijų, pasėjama į plokšteles su JSA. Grynosios kultūros, gautos pagal schemą (žr. 12.1 temą), tiriamos dėl gebėjimo gaminti enterotoksinus. Masinės stafilokokų intoksikacijos epidemiologinei analizei atliekamas izoliuotų kultūrų fagų tipas, naudojant stafilokokų fagų rinkinį.

Biologinis tyrimas. Enterotoksinui nustatyti galite naudoti biologinį tyrimą – tirtą medžiagą šerkite žindomiems kačiukams, kuriuose stafilokokinis enterotoksinas sukelia vėmimą ir viduriavimą praėjus 30-60 minučių po šėrimo.


Panaši informacija.


Vaistas yra liofilizuotas imuniniu būdu adsorbuotas triušių arba avių kraujo serumas. Adsorbuotuose serumuose yra antikūnų, kurie agliutinuoja salmonelių kultūras, turinčias homologinių O ir H antigenų, ir neagliutinuoja salmonelių kultūrų, kuriose yra heterologinių O ir H antigenų.

Paskirtis: Salmonella genties bakterijų serologinis identifikavimas agliutinacijos bandyme ant stiklelio.

1. Atidarius ampulę, vaistą ištirpinkite 1 arba 2 ml 0,9 % natrio chlorido tirpalo. Ištirpusius serumus galima laikyti tūbelėse, užkimštuose guminiais kamščiais, 7 laipsnių temperatūroje 1 mėnesį.

2. Ant stiklelio pipete užlašinkite lašelį ištirpusio serumo, šalia jo – kultūros kilpą, 18-24 valandas augintą ant maistinių medžiagų pasvirusio agaro 37 laipsnių temperatūroje, sumalkite serume. Norint nustatyti O-antigeną, kultūrą reikia paimti iš agaro viršaus, o H-antigenui nustatyti – iš agaro apačios.

3. Rezultatai registruojami:

++++ -ryškus agliutinatas su visišku skysčio nušvitimu

+++ - ryškus agliutinatas drumsto skysčio fone

++ - nedidelis agliutinatas drumsto skysčio fone

+ - nedidelis agliutinato kiekis drumsto skysčio fone

Homogeniškas drumstas skystis

Agliutinacijos reakcija, kurios intensyvumas ne mažesnis kaip +++, laikoma teigiama.

8. Diferenciacija (RA su Salmonella bakteriofagu).

9. Rezultatų pristatymas.

10.05 - darbas serologijoje - atlikta RPHA (Heddelsono reakcija dėl bruceliozės).

Stiklinių indų paruošimas serologiniam tyrimui.

Planšetinio kompiuterio apdorojimas: 1. Mirkykite 1% druskos rūgšties tirpale mažiausiai 1 valandą.

2. Skalbiamas šiltame muiluotame vandenyje, kiekvieną šulinį nuvalant vatos tamponu.

3. 20 kartų nuplaukite tekančiu vandeniu.

4 .Užpilkite dist. vandens ir palikite iki ryto.

5. Ryte nupilkite vandenį iš tabletės.

6. Išdžiovinkite kambario temperatūroje.

7. Prieš nustatant reakciją, kiekvienas šulinys nuvalomas tamponu su vata, suvilgyta fiziologiniame tirpale.

Iškrovimų apdorojimas dozatoriuje

1. Sudėkite purkštukus į stiklinį indą ir užpilkite 3-6% vandenilio peroksido tirpalu.

2. Indą su antgaliais įstatykite į termostatą, įkaitintą iki 50 laipsnių temperatūros, ir palaikykite šioje temperatūroje 3 valandas.

3. Purkštukus perkelkite į indą su distiliuotu vandeniu, uždarykite dangtį ir 5 minutes palaikykite kambario temperatūroje.

4. Purkštukus džiovinkite 50 laipsnių temperatūroje 15 minučių.

Druskos tirpalo pH patikrinau indikatoriaus juostele (normalus pH = 7,2-7,4)

Plokštelės metodas (agliutinacijos reakcija ant stiklo)

1. Uždėjau kaukę ir pirštines, reakciją uždėjau ant paprastos, kruopščiai nuplautos, neriebios stiklinės.

2. Stiklas piešiu į kvadratus, kurių kiekvienas yra 4x4 cm dydžio.

3. Viršuje užsirašau bandomojo serumo numerius

4 .Tolimesniuose kvadratuose mikropipete pilu tirtą serumą tokiomis dozėmis: 0,04; 0,02; 0,01 mm, serumo ir antigeno kontrolė.

5. Serumą atsargiai sumaišau su antigenu stikline lazdele, pradedant nuo minimalios dozės.

6 .Stiklas šiek tiek įkaitinamas virš degiklio liepsnos, kad visas stiklo paviršius įkaistų tolygiai. Esant teigiamai reakcijai, serumo su antigenu lašeliuose pirmosiomis minutėmis atsiranda dribsnių.

7 .Apdorojo stalą dezinfekavimo priemone

8. Ji nusiėmė kaukę, pirštines ir nusiplovė rankas.

skaitmeninė ataskaita

Serumo paruošimas-6

Hedelsono ir Wrighto reakcijos-1

Imunologinių reakcijų apskaita-1

Rezultatų išdavimas-1

Protokolų išrašas-1

Dvyliktoji praktikos diena.

Sanitarinis-bakteriologinis vandens tyrimas.

Tikslas: Vandens iš čiaupo mėginių ėmimas ir sėja pagal GOST membraninių rezultatų metodu. Maisto mėginių ėmimas. Oro mėginių ėmimas dėžėje dėl bakterijų užteršimo. Apskaita ir rezultatų išdavimas.

Membraninio filtro metodas.

Pirmoji tyrimo diena

Išmatuotas bandomojo vandens tūris supilamas į sumontuoto ir sterilizuoto Seitz filtro įrenginio piltuvą. Naudojant siurblį, priimamajame inde sukuriamas vakuumas (dažniausiai vanduo filtruojamas per filtrus Nr. 2 ir 3). Pasibaigus filtravimui, išimkite filtrą steriliu arba degintu pincetu ir padėkite ant Endo terpės Petri lėkštelėje taip, kad paviršius, kuriame yra apsigyvenusių mikrobų, būtų nukreiptas į viršų (ant vienos lėkštelės galima uždėti 3-4 membraninius filtrus). ). Pasėliai inkubuojami termostate 37 ° C temperatūroje 18-24 valandas.

Antroji tyrimo diena

Puodeliai su pasėliais (filtrais) išimami iš termostato. Įtartinų kolonijų nebuvimas suteikia teisę duoti neigiamą atsakymą. Visos raudonos ir rausvos kolonijos su metaliniu blizgesiu arba be jos turi būti registruojamos. Iš užaugintų kolonijų daromi tepinėliai, dažomi pagal gramą (56 pav.).


Ryžiai. 56. Vandens colio indekso nustatymas membraninių filtrų metodu

Esant gramneigiamiems strypams, atliekamas oksidazės testas. Teigiamas oksidazės testas suteikia teisę duoti neigiamą atsakymą. Jei oksidazės testas yra neigiamas, inokuliacija atliekama pusiau skystoje terpėje su gliukoze ir indikatoriumi arba HPS terpėje su fermentacijos vamzdeliais, siekiant nustatyti angliavandenių fermentaciją į rūgštį ir dujas. Esant rūgščiai ir dujoms, apskaičiuojamas colių indeksas. Pavyzdžiui, ant visų filtrų ant Endo terpės išaugo 3 kolonijos, per filtrą buvo praleista 300 ml vandens.

Skaičiavimas. 300 ml - 3 kolonijos

x = 1; jei indeksas 1

Vandens mėginių ėmimas

Vandens mėginiams imti naudojami specialiai šiems tikslams sukurti vienkartiniai indai arba daugkartiniai indai iš medžiagų, kurios neturi įtakos gyvybinei mikroorganizmų veiklai. Talpyklos turi būti su sandariai uždarytais (silikono, gumos ar kitų medžiagų) kamščiais ir apsauginiu dangteliu (pagaminta iš aliuminio folijos, storo popieriaus). Daugkartiniai indai, įskaitant kamščius, turi atlaikyti sterilizavimą sausu karščiu arba autoklave.

Mėginys imamas į sterilius indus, laikantis sterilumo taisyklių. Talpykla atidaroma prieš pat mėginio ėmimą, nuimant kamštį kartu su steriliu dangteliu. Mėginio ėmimo metu kamštiena ir talpyklos kraštai neturi nieko liesti. Skalauti indus draudžiama.

Tiriant vandenį iš skirstomųjų tinklų, mėginiai iš čiaupo imami po jo išankstinės sterilizacijos kūrenant ir vėlesniu vandens nuleidimu mažiausiai 10 minučių visiškai atidarius čiaupą. Jei vanduo imamas po dezinfekcijos cheminiais reagentais, tada, norint neutralizuoti likusį dezinfekavimo priemonės kiekį, į indą, skirtą mėginiams imti prieš sterilizavimą, įpilama natrio sulfato kristalų pavidalu arba koncentruoto tirpalo 10 mg/500 ml. vandens.

Užpildžius talpyklą uždaroma steriliu kamščiu ir dangteliu. Pasirinktas mėginys pažymimas ir prie jo pridedamas vandens mėginio paėmimo aktas, kuriame nurodomas mėginio pavadinimas, ėmimo vieta, data (metai, mėnuo, diena, valanda), tyrimo tikslas, kur mėginys siunčiamas tyrimams. , ir mėginį paėmusio asmens parašas.

Reagentų rinkinys „Diagnostinis salmonelių serumas, adsorbuotas O-polivalentas agliutinacijos reakcijai“ skirtas identifikuoti naudojant agliutinacijos reakciją (RA) ant stiklinio Salmonella genties bakterijų, išskirtų iš žmogaus biologinės medžiagos (šlapimo, išmatų, skrandžio plovimo, vėmimas).

Aprašyta daugiau nei 2400 patogeninių Salmonella serovarų, sukeliančių ūminį žmonių gastroenteritą, į vidurių šiltinę panašias ir septikopiemines ligos formas, kurios vienijamos salmoneliozės pavadinimu. Pagrindiniai salmoneliozės sukėlėjai yra Salmonella serovars enteritidis, typhi murium, cholerae-suis, haifa ir kt.

Reagentų rinkinys „Diagnostic salmonella sera adsorbed O-polyvalent for agliutination response“ skirtas tokioms bakterijoms identifikuoti, kad būtų paskirtas teisingas paciento gydymas.

Rinkinį galima įsigyti 4 konfigūracijų:

Rinkinys Nr. 1 Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių (A, B, C, D, E):

Rinkinys Nr.1/1 - Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių O-serumas, sausas;

Rinkinys Nr.1/2 - Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių O-serumas, skystas;

Rinkinys Nr. 2 Salmonella polivalentinis retų grupių O serumas:

Rinkinys Nr.2/1 - Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas, sausas;

Rinkinys Nr.2/2 - Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas, skystas.

Kiekvienas pilno komplekto variantas 2 egzekucijomis.

SUDĖTIS IR PILNAS KOMPLEKTAS

1 versija

2 vykdymas

Rinkinys Nr. 1 Salmonella polivalentinis pagrindinių grupių (A, B, C, D, E) O-serumas

Rinkinys №1/1

sausas imuniniu būdu adsorbuotas triušio ar avino kraujo serumas, turintis O-agliutininų prieš antigenus 1;2;3.4;5;6.1;6.2;7;8;9;10;12,Vi; inaktyvuotas; amorfinė baltos arba kreminės spalvos masė

5 buteliukai (po 2,0 ml)

1 buteliukas (po 2,0 ml)

Rinkinys №1/2

skystas imuniniu būdu adsorbuotas triušio ar avino kraujo serumas, turintis O-agliutininų prieš antigenus 1;2;3.4;5;6.1;6.2;7;8;9;10;12,Vi; inaktyvuotas; bespalvis arba rausvai gelsvas skystis

5 buteliukai (po 2,0 ml)

1 buteliukas (po 2,0 ml)

Rinkinys №2 Salmonella polivalentinis retų grupių O-serumas

Rinkinys №2/1

sauso imuninio adsorbuoto triušio ar avino kraujo serumas iš šių grupių (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V , X, Y , Z,52,53,54" 55,57, 58, 59, 60, 61), kurių sudėtyje yra O-agliutininų prieš antigenus 11; 13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; 18; inaktyvuota; amorfinė baltos arba kreminės spalvos masė

5 buteliukai (po 2,0 ml)

1 buteliukas (po 2,0 ml)

Rinkinys №2/2

skystas imuniniu būdu adsorbuotas šių grupių triušių arba avinų kraujo serumas (F; G; H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, W, V, X, Y , Z, 52, 53, 54" 55,57, 58, 59, 60, 61), kurių sudėtyje yra O-agliutininų prieš antigenus 11; 13, 22; 14, 24; 23; 24; 25; 16; 17; 18 ; inaktyvuotas; bespalvis arba rausvai gelsvas skystis

5 buteliukai (po 2,0 ml)

1 buteliukas (po 2,0 ml)

Rinkinio komponentai supakuoti į dėžutę, dėžutėje pridedama naudojimo instrukcija.Salmonella bakterijų antigeninės struktūros sutrumpinta schema. .

PAGRINDINĖS VARTOTOJŲ CHARAKTERISTIKOS

Pagrindinės rinkinių versijos skirtos 200 (1 versija) arba 40 mėginių (2 versija) tyrimui.

VEIKIMO PRINCIPAS

Adsorbuotuose serumuose yra antikūnų, kurie agliutinuoja salmonelių kultūras, turinčias homologinių O antigenų, ir neagliutinuoja salmonelių kultūrų, kuriose yra heterologinių O antigenų.

TYRIMO PAVYZDŽIAI

Tiriama bakteriologinių tyrimų metu iš biologinės medžiagos (šlapimo, išmatų, skrandžio plovimo, vėmalų) išskirta kultūra, auginama mėgintuvėliuose ant pasvirusio maistinio agaro 18-20 valandų 37 0 C temperatūroje.

Išskirtą kultūrą leidžiama laikyti ant maistinių medžiagų agaro +2 - +8 temperatūroje 2 dienas.

Žmogaus biologinės medžiagos rinkimas, saugojimas ir paruošimas turi būti atliekamas pagal GOST R 53079.4-2008 „Klinikinių laboratorinių tyrimų kokybės užtikrinimas“, MU 4.2.2723-10 „Laboratorinė salmoneliozės diagnostika, salmonelių nustatymas maisto ir aplinkos objektuose“. “.

ANALITINĖS IR DIAGNOSTINĖS CHARAKTERISTIKOS

Konkreti veikla:

Analitinis jautrumas: nustatytas su homologinėmis salmonelių testo padermėmis ir yra 100 proc.

Analitinis specifiškumas : nustatytas su heterologinėmis muziejaus salmonelių testo padermėmis ir yra 100 proc.

Rezultatų atkuriamumas yra 100%.

Diagnostinis jautrumas (su 95 %) patikimumo lygiu buvo:

Diagnostinis specifiškumas (su 95 %) patikimumo lygiu buvo:

Muziejinės salmonelių padermės - 98,07% -100%;

Iš pacientų klinikinės medžiagos išskirtos salmonelių kultūros – 98,25% -100%.

ATSARGUMO PRIEMONĖS

Rinkinys yra biologiškai saugus, tačiau tiriamieji mėginiai turi būti tvarkomi kaip potencialiai užkrečiama medžiaga.

Atsargumo priemonės dirbant su rinkiniu – taisyklių „Infekcinių ligų plitimo prevencijos priemonių, dirbant medicinos įstaigų klinikinės diagnostikos laboratorijose, instrukcijos“ (Patvirtinta SSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1991 m. sausio 17 d.), GOST laikymasis. R 52905-2007 (ISO 15190: 2003).

Reagentų rinkinys pagal SanPiN 2.1.7.2790-10 „Medicininių atliekų tvarkymo sanitariniai ir epidemiologiniai reikalavimai“ priklauso B klasei (epidemiologiškai pavojingos atliekos).

Reagentų rinkinių perdirbimas arba sunaikinimas, dezinfekavimas turi būti atliekamas pagal SanPiN 2.1.7.2790-10 „Medicininių atliekų tvarkymo sanitariniai ir epidemiologiniai reikalavimai“ ir MU 287-113 „Dezinfekavimo, valymo prieš sterilizaciją ir sterilizavimo gairės. Medicininiai prietaisai."

TAIKYMO BŪDAS

Įranga ir medžiagos („rankiniam“ nustatymui)

Chronometras;

Šaldymo kamera su temperatūros režimu 2-8 0 С;

Pusiau automatinės pipetės, kurių veikimo diapazonas: 5-50 µl, 20-200 µl;

Nurodytų pipečių vienkartiniai antgaliai;

Skystų ir kietų atliekų konteineriai;

Gumines arba lateksines pirštines, dezinfekavimo priemones;

Kilpa yra bakteriologinė;

Stiklinės skaidrės;

Didintuvas su padidinimu (2x);

0,9% natrio chlorido tirpalas;

Sauso oro termostatas, palaikantis temperatūrą (37 ± 1) °С;

70 % etilo alkoholio tirpalo ir 6 % vandenilio peroksido tirpalo (dezinfekavimo tirpalai) arba kitų dezinfekcinių medžiagų tirpalų, patvirtintų naudoti pagal SP 1.32322-08.

TAIKYMO BŪDAS

RA nustatymas ant stiklo

Salmonella polivalentinis O serumas

Sausos išrūgos ištirpinamos 2 ml 0,9% vandeninio natrio chlorido tirpalo

Ant stiklelio užlašinamas vienas lašas (apie 50 μl) serumo ir vienas lašas 0,9 % vandeninio natrio chlorido tirpalo. Atpažįstama kultūra, auginama mėgintuvėliuose ant pasvirusio maistinio agaro 18–20 valandų 37 °C temperatūroje, kilpa pašalinama iš viršutinės agaro dalies ir uždedama ant stiklelio šalia lašelio 0,9% vandeninio natrio chlorido tirpalo. tirpalas ir emulsintas (kontrolė, ar nėra savaiminės agliutinacijos). Nesant spontaniškos agliutinacijos, manipuliavimas kartojamas lašeliu O - serumo, suformuojant vienodą nepermatomą suspensiją. Rezultatai registruojami 1-2 minutes, švelniai purtant stiklinę. Vienalytė suspensija rodo neigiamą rezultatą.
Esant tiriamai padermei agliutininų, serumo laše per 1-2 minutes atsiranda sluoksniuotas agliutinatas.

Apskaitos rezultatas RA gaminti vizualiai naudojant padidinamąjį stiklą (2x) pagal keturių ginklų sistemą

Į RA rezultatus atsižvelgiama ir jie vertinami taip:

Išskirtinis agliutinatas su visišku skysčio nušvitimu lašeliu (100%).

Ryškus agliutinatas drumsto skysčio fone (75%)

Nereikšmingas agliutinatas drumsto skysčio fone (50%)

Agliutinato pėdsakai, drumstas skystis lašelyje (25%)

(-) - neigiamas rezultatas, vienalytis drumstas skystis laše (0%).

Į RA su diagnostiniu serumu atsižvelgiama tik tuo atveju, jei spontaninės agliutinacijos kontrolės rezultatas yra neigiamas.

Tirta kultūra priskiriama atitinkamai O grupei, jei ant stiklo gaunamas bent (+++) RA su šios grupės polivalentiniu serumu.

GERIAUSIAS IKI DATA

Rinkinys Nr.1/1, Nr.1/2. Salmonella polivalentinis O-serumas, sausas - 3 metai nuo gamintojo OPF priėmimo datos.

Rinkinys Nr.2/1, Nr.2/2. Salmonella polivalentinis O-serumas, skystas - 1 metai nuo gamintojo OPF priėmimo datos.

SANDĖLIAVIMAS IR TRANSPORTAVIMAS

Sandėliavimas

Gamintojo pakuotėje nuo 2 ° C iki 8 ° C temperatūroje. Užšaldymas neleidžiamas.

Atidarius pakuotes, nepanaudotus reagentus galima laikyti sandariai uždarytoje pakuotėje 2–8 °C temperatūroje 1 mėnesį.

Transportas

Esant temperatūrai nuo 2 iki 8 °C visų rūšių transportuojant dengtomis transporto priemonėmis pagal galiojančias šios rūšies transportavimo taisykles. Šaldymas neleidžiamas. Vežti leidžiama nuo 9 ° C iki 25 ° C temperatūroje 14 dienų.

ATOSTOGŲ SĄLYGOS

Sveikatos priežiūros įstaigoms.