Aki átadta az RV immunblot módszerrel végzett elemzését. Immunoblot (bizonyos kórokozó antigénekkel szembeni antitestek kimutatása a betegek szérumában)

Az MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 reagenskészlet célja a HIV-1 és/vagy HIV-1 O és/vagy HIV-2 csoportba tartozó egyedi fehérjék (antigénjei) elleni antitestek kimutatásának megerősítése humán szérumban, ill. plazma immunblot módszerrel.

Megkülönböztető jellegzetességek:

• Az "MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2" reagenskészlet HIV 1 tisztított lizátum vírusfehérjéket és HIV-2 gp36 antigén-determinátumot tartalmaz;
• Egy csíkon biztosítja a HIV-1, HIV-1 O csoport, HIV 2 elleni antitestek kimutatását;
• Egyszerű eljárás az elemzések elkészítéséhez és lefolytatásához;
• A reakció belső minőségellenőrzése*
• Az elemzés maximális sebessége (3 óra);
• A vizsgálati minta kis térfogata - 20 µl;
• Nem igényel további felszerelést a kutatáshoz;
• A készlet minőségét az orosz és nemzetközi szabványos minták használata garantálja**

* A belső minőségellenőrzést a következők jelenléte biztosítja:

• belső kontrollcsíkok, szérum- vagy plazmaminta bejuttatásának ellenőrzését biztosítja;
• kontroll negatív szérum (K-);
• kontroll pozitív szérum (K+), amely lehetővé teszi a csíkon észlelt sávok azonosítását;
• kontroll gyengén pozitív szérum (K + cl), amely biztosítja a reagenskészlet érzékenységének szabályozását.

**Minőségbiztosítás:

Az MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 reagenskészlet jellemzőit donorok, HIV-fertőzéssel diagnosztizált betegek véletlenszerű mintájából, kereskedelmi szerokonverziós panelekből, standard panelekből és „potenciálisan befolyásoló elhatározás” komponenseket.

A reagenskészlet nem ad hamis pozitív eredményt a standard panel szérumainak vizsgálatakor, amelyek nem tartalmaznak HIV 1.2 és HIV-1 antigén elleni antitesteket ("Standard AT (-) HIV", FSR 2007/00953, 10/ 25/2007). Specificitás - 100%.

A diagnosztikai specifitást úgy határozták meg, hogy véletlenszerű mintát vettek 200 donorból, különböző vérközpontokból és klinikákból, akiknél előzetesen megerősítették a HIV-1, HIV-2 fertőzés hiányát. A donorok véletlenszerű mintájának vizsgálata során a specifitás 100% volt;

A reagenskészlet specifitását 250 minta vizsgálata során határozták meg, köztük terhes nőktől, kórházi betegektől, hepatitis C-ben és E-ben szenvedő betegektől vett szérum- vagy plazmamintákat, valamint "potenciálisan zavaró meghatározást" tartalmazó mintákat. Az MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 kit használatakor ezeknél a mintáknál nem találtunk álpozitív eredményt.

A diagnosztikai érzékenységet a következők segítségével határoztuk meg:
- Boston Biomedica, Inc. HIV-1 panel plazmaminták (WWRB 301) különböző régiókból, amelyek különböző HIV-1 altípusokat tartalmaznak: M csoport (A, B, C, D, E, F altípusok) és O csoport; a reagenskészlet érzékenysége 100% volt;

A reagenskészlet érzékenységét a Boston Biomedica, Inc. (SeraCare Life Sciences), kat. nrs. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 930

A reagenskészlet kimutatja a HIV-1 elleni antitesteket egy standard panel szérumában, amely HIV-1 elleni antitesteket tartalmaz ("Standard AT (+) HIV-1", FSR 2007/00953 sz., 2007. október 25.), kimutatja az antitesteket. HIV-2-re a HIV-2 elleni antitesteket tartalmazó standard panel szérumában ("Standard AT (+) HIV-2", No. FSR 2007/00953, 2007.10.25.). Érzékenység - 100%.

2011. július 13-án kelt FSR 2010/07958 számú regisztrációs bizonyítvány (érvényessége nincs korlátozva)

Összetett:

• Immunszorbens. Fehér nitrocellulóz membráncsíkok egyedi HIV-1 fehérjékkel (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) elektrotranszfer módszerrel adszorbeálva és szintetikus HIV-2 peptiddel a csíkra felvitve, a gp36 fehérje és anti-IgG humán analógja (belső kontroll) - 18 db;
• K- - kontroll negatív szérum. A HIV-1,2, HCV, HIV antigén, HBsAg elleni antitesteket nem tartalmazó humán vérszérum inaktiválódik 560 °C-on történő melegítéssel; átlátszó világossárga folyadék - 1 kémcső (0,08 ml). Tartósítószereket tartalmaz: timerosalt és nátrium-azidot;
• K+ - kontroll pozitív szérum. HIV-1,2 elleni antitesteket tartalmazó humán vérszérum (titer legalább 1:10000), nem tartalmaz HBsAg-t, HIV antigént, HCV elleni antitesteket, 560 C-on történő melegítéssel inaktiválva; átlátszó világossárga folyadék - 1 kémcső (0,08 ml) Tartósítószert tartalmaz: timerosál és nátrium-azid;
• K+sl - kontroll gyengén pozitív szérum. HIV-1,2 elleni antitesteket tartalmazó humán vérszérum (titer legfeljebb 1:200), nem tartalmaz HBsAg-t, HIV antigént, HCV elleni antitesteket, 560 °C-on melegítéssel inaktiválva; átlátszó világossárga folyadék - 1 kémcső (0,08 ml). Tartósítószereket tartalmaz: timerosalt és nátrium-azidot;
• RROKk (x10) - oldat a minták és a konjugátum hígításához. Koncentrátum – előkezelt normál kecskeszérumot tartalmazó Tris puffer; átlátszatlan szürke folyadék - 1 injekciós üveg (10 ml). Tartósítószert tartalmaz: timerosal;
• PRk (x20) - mosóoldat. Koncentrátum - Tween-20-at tartalmazó Tris-puffer; tiszta, színtelen folyadék - 1 injekciós üveg (70 ml). Tartósítószert tartalmaz: timerosal;
• Konjugált. Humán IgG elleni kecske antitestek, alkalikus foszfatázzal konjugálva; tiszta színtelen folyadék - 1 kémcső (0,06 ml);
• Szubsztrátum (színező oldat). 5-bróm-4-fluor-indolil-foszfát (BCIP) és nitrozin-tetrazólium (NBT) oldata; átlátszó világossárga folyadék - 1 injekciós üveg (50 ml);
• Por immunblothoz. Sovány tejpor - amorf fehér vagy világossárga por - 5 csomag x 1g;
• Egy tabletta fedővel a reakció beállításához - 2 darab;
• Műanyag csipesz - 1 db.

Immunblot (immunblot, Western blot, Western blot)- egyesíti az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatot (ELISA) a vírusantigének előzetes elektroforetikus átvitelével egy nitrocellulóz csíkra (csíkra).

Ebben a gyönyörű tudományos névben a „blot” valószínűleg „blot”-nak fordítja, a „western” pedig „western” ennek a „foltnak” az eloszlásának irányát tükrözi a papíron balról jobbra, vagyis egy földrajzi térképen. ez megfelel a nyugatról keletre irányuló iránynak." Az "immunblot" módszer lényege, hogy az immunenzimatikus reakciót nem antigének keverékével, hanem HIV antigénekkel hajtják végre, amelyeket korábban immunoforézissel szétosztottak a molekulatömeg szerint a nitrocellulóz membrán felületén elhelyezkedő frakciókra. Ennek eredményeként a HIV fő fehérjéi, az antigén-determinánsok hordozói külön sávok formájában oszlanak el a felszínen, amelyek az enzim immunoassay során jelennek meg.

Az immunblot több szakaszból áll:

Csík előkészítése. Az előzőleg megtisztított és alkotóelemeire bontott immunhiányos vírust (HIV) elektroforézisnek vetik alá, míg a HIV-t alkotó antigéneket molekulatömeg alapján választják el. Ezután blottolással (hasonlóan a felesleges tinta "blotter"-en történő kipréseléséhez) az antigéneket egy nitrocellulózcsíkra visszük át, amely immár a HIV-re jellemző, szem számára láthatatlan antigénsávok spektrumát tartalmazza.

Minta vizsgálat. A vizsgálati anyagot (szérum, beteg vérplazmája stb.) a nitrocellulóz csíkra visszük fel, és ha a mintában specifikus antitestek vannak, akkor azok a szigorúan megfelelő (komplementer) antigén sávokhoz kötődnek. A későbbi manipulációk eredményeként ennek az interakciónak az eredménye vizualizálódik – láthatóvá válik.

Az eredmény értelmezése. A sávok jelenléte a nitrocellulóz lemez bizonyos területein megerősíti a szigorúan meghatározott HIV antigének elleni antitestek jelenlétét a vizsgált szérumban.

A sáv – Pozitív vezérlés

B sáv – Gyenge pozitív kontroll

C sáv – negatív kontroll

D csík – Pozitív minta (HIV-1 elleni antitesteket észleltek)

Jelenleg az immunblot (immunoblot) a fő módszer a vírusspecifikus antitestek vizsgálati szérumban való jelenlétének megerősítésére. A HIV-fertőzés egyes esetekben a szerokonverziót megelőzően a specifikus antitesteket hatékonyabban lehet kimutatni immunoblottal, mint ELISA-val. Egy immunblot vizsgálat kimutatta, hogy a gp 41 elleni antitesteket leggyakrabban AIDS-betegek szérumában mutatják ki, és a p24 kimutatása a profilaktikus célból vizsgált személyeknél további vizsgálatokat igényel a HIV-fertőzés jelenlétére vonatkozóan. A genetikailag módosított rekombináns fehérjéken alapuló immunblot tesztrendszerek specifikusabbnak bizonyultak, mint a tisztított víruslizátumon alapuló hagyományos rendszerek. Rekombináns antigén alkalmazásakor nem egy diffúz, hanem egy jól körülhatárolható keskeny antigénsáv képződik, amely könnyen hozzáférhető elszámoláshoz és értékeléshez.

A HIV-1-vel fertőzött személyek széruma a következő főbb fehérjék és glikoproteinek ellenanyagokat mutat ki - strukturális burokfehérjék (env) - gp160, gp120, gp41; magok (gag) - p17, p24, p55, valamint vírusenzimek (pol) - p31, p51, p66. A HIV-2 esetében az env elleni antitestek jellemzőek - gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol-p68.

A reakció specifitásának megállapításához szükséges laboratóriumi módszerek közül a HIV-1 burokfehérjék - gp41, gp120, gp160, valamint HIV-2 - gp36, gp105, gp140 ellenanyagainak kimutatása a legismertebb.

A WHO akkor tekinti pozitívnak a szérumot, ha bármelyik két HIV-glikoprotein elleni antitestet immunblot-vizsgálattal kimutatják. Ezen ajánlások szerint, ha a burokfehérjék közül csak az egyik (rp 160, rp 120, rp 41) reakció lép fel más fehérjékkel kombinálva vagy anélkül, hogy reakcióba lépne más fehérjékkel, az eredmény kétségesnek minősül, és egy második teszt elvégzése javasolt egy kit segítségével. egy másik sorozatból vagy egy másik cégtől. Ha ezt követően is kétséges az eredmény, 6 hónapig tartó megfigyelés javasolt (3 hónap utáni kutatás).

A p24 antigénnel végzett pozitív reakció jelenléte szerokonverziós periódusra utalhat, mivel e fehérje elleni antitestek néha először jelennek meg. Ebben az esetben a klinikai és epidemiológiai adatoktól függően javasolt a vizsgálat megismétlése legalább 2 héttel később vett szérummintával, és pontosan ez az eset, amikor HIV-fertőzésben páros szérum szükséges.

A gag és pol fehérjékkel végzett pozitív reakciók env fehérjékkel való reakció nélkül a korai szerokonverzió stádiumát tükrözhetik, és HIV-2 fertőzést vagy nem specifikus reakciót is jelezhetnek. Azokat a személyeket, akiknél ilyen eredmények születtek a HIV-2-teszt után, 3 hónap elteltével (6 hónapon belül) újra megvizsgálják.

A fertőző betegségek laboratóriumi diagnosztikájának gyakorlatában időnként nem egy kórokozó ellen általában, hanem bizonyos fehérjéi (antigénjei), azaz specifikus antitestek spektruma ellen kell antitesteket meghatározni. Ha erre a célra az enzimkapcsolt immunszorbens vizsgálati módszert alkalmazzák, akkor ebben az esetben szükséges a szükséges antigének izolálása és tisztítása a kórokozótenyészetből. A kapott fehérjéket külön visszük fel a szilárd fázisra. 96 lyukú lemez használata esetén - minden lyukban egy típusú antigén. A specifikus antitesteket ezután közvetett módszerrel határozzák meg.

Az egyik vagy másik antigénnel végzett pozitív reakció jelenléte alapján meg lehet ítélni a megfelelő specifikus antitestek jelenlétét. Ezt a fajta enzim immunoassay tesztrendszert a gyártók kínálják, azonban magának a vizsgálatnak a nagyobb információtartalma és egyszerűbb kivitelezése miatt az immunblot módszer (Western blot) elterjedtté vált.

Az immunblot vizsgálat lehetővé teszi az antitestek kimutatását a vérszérumban az összes diagnosztikailag jelentős kórokozó fehérjétől eltérően. A Western blot angol fordítása western átvitelt jelent (szó szerint - blot). Ennek a szokatlan kifejezésnek a története a következő.

Egy Southern (E. Southern) nevű tudós 1975-ben javasolt először egy módszert elektroforetikusan elválasztott DNS-fragmensek gélről membránra való átvitelére. A szerző szerint a módszert Southern blotnak hívták, ami „déli transzfert” jelent. Az RNS-molekulák átvitelének módszerét a szakemberek Northern blot-nak nevezték el - „északi transzfer”. Eleinte viccből, majd ezt a nevet rögzítették a hivatalos tudományos irodalomban.

G. Toubin 1979-ben publikálta az első fehérjeblot-kísérletek eredményeit. A biológiai makromolekulák átvitelére szolgáló módszerek „földrajzi” elnevezésének hagyományait folytatva ez a módszer „Western” transzfer - Western blot néven vált ismertté.

Ennek a módszernek az első szakaszában a kórokozó fehérjék keverékének elektroforetikus elválasztását végezzük poliakrilamid gélben nátrium-dodecil-szulfát (SDS) jelenlétében. Az SDS felületaktív anyagként egyenletesen beburkolja a fehérjemolekulákat, és mindegyiknek megközelítőleg azonos nagyságú negatív töltést ad. Ezért a molekulák elektromos térben egy irányban mozognak, és a mozgás sebessége csak a fehérje molekula méretétől (molekulatömegétől) függ.

Az elektroforetikus eljárás eredményeként egy géllemezt kapunk, amelynek vastagságában a fehérjék különálló vékony lineáris zónák formájában helyezkednek el. A mozgás irányában a következő sorrendben oszlanak meg: a nagy molekulatömegű, körülbelül 120-150 kDa tömegű fehérjék közelebb állnak a rajthoz, az 5-10 kDa tömegű fehérjék pedig továbbjutottak a célba. A második lépésben a géllemezt nitrocellulóz lapra helyezzük, és ezt a szerkezetet az egyenáramforrás elektródái közé helyezzük. Elektromos tér hatására a fehérjék a porózus gélből egy sűrűbb membránba áramlanak, ahol szilárdan rögzülnek.

A kapott blot antigén-közömbös fehérjéket és/vagy nem ionos detergenseket (Tween 20) tartalmazó blokkolóoldattal kezeljük, amelyek blokkolják a membrán antigénmentes helyeit. A membránlapot ezután keskeny csíkokra vágják úgy, hogy mindegyik csík tartalmazza az összes antigénfrakciót. A leírt lépéseket a gyártó hajtja végre.

Az antitestek immunblottal történő kimutatására szolgáló kereskedelmi tesztrendszerek elemzésre kész blotokat (csíkokat vagy csíkokat) tartalmaznak. A felhasználó meghatározza a kórokozó fehérjék elleni specifikus antitestek teljes spektrumát az indirekt módszer szerint. Színes (enzimatikus) reakció végrehajtásához kromogénként oldható színtelen anyagot használnak, amelynek terméke elszíneződik, oldhatatlanná válik és nitrocellulózra ülepedik (kicsapódik).

A szekvenciális immun- és enzimreakciók eredményeként a vizsgált mintában kórokozó fehérjék elleni antitestek jelenlétében a bloton sötét keresztirányú csíkok jelennek meg, amelyek elhelyezkedése bizonyos kórokozó fehérjék zónájában található. Minden ilyen sáv a megfelelő antigén elleni specifikus antitestek jelenlétét jelzi. Az immunblot módszerrel végzett vizsgálat eredményét a kórokozó specifikus fehérjéi elleni antitestek listája formájában adják ki. Például: "p17 és p24 fehérjék elleni antitesteket észleltek."

A nitrocellulóz blot kifejlesztés után szárított formában sokáig tárolható. A szín intenzitása azonban jelentősen gyengül. A nedves foltok lefényképezhetők, vagy szkennerek segítségével grafikus képük bevihető a személyi számítógépek memóriájába. A speciális számítógépes programok lehetővé teszik az eredmények feldolgozását és az antitestek spektrumának dinamikájának gyors nyomon követését a dinamikus megfigyelés során

IMMUNOBLOT(western blot) - a vérszérum laboratóriumi vizsgálatának módszere a HIV-ellenes antitestek jelenlétére; ez egy pontosabb teszt, mint az ELISA, és az ELISA eredmények megerősítésére szolgál. ELISA - enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat (ELISA) - laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi a HIV-antitestek vérben való jelenlétének meghatározását; HIV antitest teszt.

A WHO ajánlása szerint a HIV-fertőzés diagnosztizálásában kiegészítő szakértői módszerként az immunoblot (western blot) módszert alkalmazzák, amely az ELISA eredményeit igazolja. Ezt a módszert általában a pozitív ELISA eredmény kétszeres ellenőrzésére használják, mivel érzékenyebbnek és specifikusabbnak tartják, bár összetettebb és drágább.

Az immunoblot az enzim immunoassay-t (ELISA) kombinálja a vírusfehérjék gélben történő előzetes elektroforetikus elválasztásával és nitrocellulóz membránra való átvitelével. Az immunblot eljárás több szakaszból áll (). Először is, az előtisztított és alkotóelemeire bontott HIV-t elektroforézisnek vetik alá, miközben a vírust alkotó összes antigént molekulatömeg szerint választják el. Ezután blottolással az antigéneket a gélből egy nitrocellulóz csíkra vagy egy nejlonszűrőre visszük át, amely immár a HIV-re jellemző, szem számára láthatatlan fehérjespektrumot tartalmaz. Ezt követően a tesztanyagot (a páciens szérumát, plazmáját stb.) felvisszük a csíkra, és ha specifikus antitestek vannak a mintában, akkor azok a nekik szigorúan megfelelő antigénfehérjék csíkjaihoz kötődnek. A későbbi manipulációk (például ELISA) eredményeként ennek a kölcsönhatásnak az eredménye láthatóvá válik – láthatóvá válik. A csíkok bizonyos területein a csíkok jelenléte megerősíti a szigorúan meghatározott HIV antigének elleni antitestek jelenlétét a vizsgált szérumban.

Az immunblot vizsgálatot leggyakrabban a HIV-fertőzés diagnózisának megerősítésére használják. A WHO akkor tekinti a szérumot pozitívnak, ha a HIV-burok bármely két fehérjével szembeni ellenanyagot immunblot-vizsgálattal kimutatnak. Ezen ajánlások szerint, ha a burokfehérjék közül csak az egyikkel (gp160, gp120, gp41) lép fel reakció más fehérjékkel való reakcióval kombinálva vagy anélkül, az eredmény kétségesnek tekinthető, és egy második vizsgálat elvégzése javasolt egy készletből különböző sorozatok vagy másik cégtől. Ha ezt követően az eredmény kétséges marad, a vizsgálatokat 3 havonta folytatják.

Az immunoblothoz az első szakaszban a vérszérumban lévő fehérjéket a gélben molekulatömegük és töltésük alapján elektromos térrel (gélelektroforézis módszer) választják el. Ezután nitrocellulóz vagy nejlon membránt viszünk fel a gélre és "nedvesítjük" (ez a blottolás). Ez egy speciális kamrában történik, amely lehetővé teszi az anyag teljes átvitelét a gélből a membránba. Ennek eredményeként a gélen lévő fehérjeelrendezés mintázata reprodukálódik a membránon (blot), amely ezután könnyen manipulálható. Kezdetben a membránt a kívánt antigén elleni antitestekkel kezelik, majd a meg nem kötött anyag lemosása után radioaktívan jelölt konjugátumot adnak hozzá, amely specifikusan kötődik az antitestekhez (mint az ELISA-ban). A kapott antigén-antitest-jelölt konjugátum komplex helyét autoradiográfiával határozzuk meg röntgenfilm segítségével. Megnyilvánulása után minden világossá válik, hogy vannak-e antigének a vérben vagy sem.

Leírás

Meghatározási módszer Immunblot.

Vizsgált anyag Szérum

Házi látogatás lehetséges

Az antinukleáris antitestek olyan autoantitestek családját jelentik, amelyek ribonukleinsavakhoz és a hozzájuk kapcsolódó fehérjékhez kötődnek. A diffúz kötőszöveti betegségekben szenvedő betegek több mint 90%-ánál fordulnak elő, és gyakran megfigyelhetők autoimmun májbetegségekben és számos más betegségben is. A mai napig ennek az autoantitest-családnak mintegy 200 fajtáját jellemezték, de nem mindegyik használható a klinikai gyakorlatban.

Az antinukleáris antitestek immunblotja lehetővé teszi az antinukleáris antitestek 15 fő típusának egyidejű vizsgálatát egy tesztben, amely biztosítja a főbb szisztémás reumás betegségek differenciáldiagnózisát. Az immunblottal kimutatott autoantitestek mindegyik típusát általában jellegzetes klinikai képpel rendelkező betegeknél figyelik meg, így az autoantitestek spektruma nemcsak a betegség diagnosztizálását teszi lehetővé, hanem bizonyos klinikai megnyilvánulások kialakulásának kockázatának megállapítását is.

A szerológiai vizsgálat második szakaszában az antinukleáris antitestek immunblot-vizsgálatát célszerű alkalmazni, más tesztek pozitív eredményével, amelyek antinukleáris antitestek jelenlétét jelzik az alany szérumában. Ezek a vizsgálatok magukban foglalják az antinukleáris antitestek meghatározását (ELISA szűrés), az antinukleáris faktor (ANF) kimutatását Hep2 sejteken (), az antinukleáris antitestek és az extrahálható nukleáris antigén (ENA,) elleni antitestek kimutatását.

Az antinukleáris antitestek immunblot módszerét a szisztémás reumás betegségek diagnosztikájában magas klinikai specifitás jellemzi. De az antinukleáris antitestek specifitása még magas ANF () titerek esetén sem mindig állapítható meg, mivel számos antinukleáris antitest antigén továbbra is jellemzetlen marad. A negatív immunblot eredmény ebben az esetben nem zárja ki a szisztémás reumás betegségek diagnózisát. Számos antinukleáris antitest kimutatható immunblot segítségével - myositis-specifikus autoantitestek panelje () és immunblot - autoantitestek panelje sclerodermában ().

Irodalom

1. Lapin S.V. Totolyan A.A. Autoimmun betegségek immunológiai laboratóriumi diagnosztikája / "Chelovek" kiadó, Szentpétervár - 2010. 272. o.
2. Nasonov E.L., Aleksandrova E.N. A reumás betegségek laboratóriumi diagnosztikájának modern szabványai. Klinikai irányelvek / BHM, M - 2006.
3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantitestek szervspecifikus autoimmun betegségekben: Diagnosztikai referencia/ PABST, Drezda - 2011. 300 p.
4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantitestek szisztémás autoimmun betegségekben: Diagnosztikai referencia/ PABST, Drezda - 2007. 300 p.
5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science - 2006. 862 p.
6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases / Humana Press - 2008. 598 p.
7. A reagenskészlet használati útmutatója.

Kiképzés

Az utolsó étkezés után 4 órát célszerű kibírni, nincs kötelező előírás.

Az előjegyzés jelzései

A vizsgálat a következő állapotok diagnosztizálására és differenciáldiagnózisára szolgál:

• szisztémás lupus erythematosus;
• szubakut bőr lupus és más típusú bőr lupus;
• vegyes kötőszöveti betegség;
• Sjögren-szindróma és kapcsolódó betegségek;
• diffúz és lokalizált szkleroderma, CREST szindróma;
• gyulladásos myopathiák (polymyositis és dermatomyositis);
• fiatalkori krónikus ízületi gyulladás;
• autoimmun hepatitis;
• primer biliaris cirrhosis és szklerotizáló cholangitis;
• ennek a tesztnek a használata antinukleáris faktor, antinukleáris antitestek, extrahálható nukleáris antigén elleni antitestek, DNS ellenanyagok, nukleoszómák elleni antitestek és antifoszfolipid antitestek magas titereinek kimutatására szolgál.

Az eredmények értelmezése

A vizsgálati eredmények értelmezése információkat tartalmaz a kezelőorvos számára, és nem minősül diagnózisnak. Az ebben a részben található információkat nem szabad öndiagnózisra vagy önkezelésre használni. A pontos diagnózist az orvos állítja fel, felhasználva mind ennek a vizsgálatnak az eredményeit, mind a szükséges információkat más forrásokból: anamnézis, egyéb vizsgálatok eredményei stb.

Mértékegységek: kvalitatív teszt, az eredmény "észlelve" vagy "nem található" formában jelenik meg.

Ha bármilyen típusú ellenanyag jelenlétét jellemző sávot detektálunk, a sáv színintenzitását az egyes azonosított antitesttípusok pluszjai ("keresztezései") is leírják. A pozitivitás mértékének növekedése közvetve tükrözi az autoantitestek tartalmát és affinitását.

Referenciaértékek: Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kDa), SS-A (52 kDa), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENP-B, dsDNS, hiszton, nukleoszóma elleni antitestek , Rib P, AMA-M2, Jo-1 nem található.

Az autoantitestek meghatározásának eredményét minden megfelelő antigén esetében „keresztben” mutatjuk be. A szeropozitivitás mértékének növekedése közvetve tükrözi az autoantitestek tartalmát és affinitását. Az alábbiakban felsoroljuk a szeropozitivitási pontszám opciókat:

1. Antitesteket nem találtak.
2. +/- - határvonal eredmény;
3. + - egy specifikus antigén elleni autoantitestek alacsony tartalma;
4. ++ egy specifikus antigén elleni autoantitestek átlagos tartalma;
5. +++ - egy specifikus antigén elleni autoantitestek magas tartalma.

Az antinukleáris antitestek kimutatásával kapcsolatos fő betegségek:

Antigén	Jelentése
Sm (Smith)	A szisztémás lupus erythematosus specifikus markere (az American College of Rheumatology, ACR SLE 10. kritériumában szerepel)
SS-A (Ro52)	Különféle autoimmun betegségekben, gyakrabban szisztémás lupus erythematosusban és bőrformáiban, szisztémás reumás betegségekben, rheumatoid arthritisben, autoimmun májbetegségekben stb.
SS-A (Ro60)	Szisztémás lupus erythematosus, a lupus erythematosus bőrformái, fényérzékenység szisztémás lupus erythematosusban, a veleszületett lupus erythematosus és a magzati szívbetegség magas kockázata. A fő szerológiai indikátor Sjögren-szindrómában. Gyakran az SS-A (Ro52) antigén elleni antitestekkel együtt észlelik.
SS-B	Sjögren-szindróma, szisztémás lupus erythematosus.
PCNA	Szisztémás lupus erythematosus, lupus nephritis kockázata.
Riboszómák (Ribo P)	Szisztémás lupus erythematosus, a központi idegrendszer károsodásának veszélye.
Nukleoszómák	Szisztémás lupus erythematosus, nagy a lupus glomerulonephritis kockázata.
kétszálú DNS	A szisztémás lupus erythematosus specifikus markere (az SLE ACR 10. kritériumában szerepel), a lupus nephritis magas kockázata.
snRNP/Sm	Vegyes kötőszöveti betegség, szisztémás lupus erythematosus alacsony vesekárosodás kockázatával, szkleroderma.
Hisztonok	Szisztémás lupus erythematosus, gyógyszer által kiváltott lupus, szkleroderma.
Scl-70	Szisztémás szklerózis a bőr és a belső szervek diffúz elváltozásaival.
PM-Scl	Szkleroderma polimiozitisszel.
CENP-B	CREST szindróma sclerodactyliával, telangiectasias, subcutan meszesedés, Raynaud-szindróma, nyelőcsőgyulladás.
Jo-1	Polimiozitisz antiszintetáz szindróma formájában.
AMA-M2	Primer biliaris cirrhosis, Sjögren-szindróma.