бактериологично изследване. Бактериологично изследване на урината

БАКТЕРИОЛОГИЧЕН АНАЛИЗ, у- кробиологич. анализ, служи за откриване различни видовемикроорганизми и определя техния вид в материала, който ще се изследва (в почва, вода, продукти различен вид, отдели за животни и др.); се състои в изучаване на биологията на микроба (неговите морфологични, биологични и имунологични свойства), а за патогенните микроби - също и в определяне на способността им да причиняват специфични характеристики при експериментални животни. Потупване. процеси. Изследването на морфологията на микробите се извършва с помощта на микроскоп, за който изследваният материал се подлага на предварителна обработка, за да се направят микробите ясно видими сред неорганизираното гниене, в което обикновено се намират. Това се постига чрез оцветяване на препарати от изследвания материал с различни естествени или изкуствени оцветители. Като петна от мъртви микроби 6"1по-добре, тогава препаратите се подлагат предварително на т.нар. фиксиране, т.е. обработка на различни видове физически. и хим. агенти, които бързо убиват протоплазмата - с топлина, алкохол и др. Понякога материалът се микроекокопира и без предварителна обработка, когато е необходимо да се изследват живи микроби под микроскоп в хода на анализа (наблюдение на тяхната подвижност, връзката им). до O и т.н.). В такива случаи се приготвя препарат под формата на т.нар. висяща капка. Наблюдението се извършва или по обичайния начин, или със затъмнено зрително поле на микроскопа. При изследване на наличието на протозои, целият анализ е ограничен до една микроскопия, което се счита за достатъчно, тъй като методите за култивиране на протозои са много сложни и все още не са навлезли в широката практика. В бактериологията анализът не спира до изследване на формата на микроба. Изключително широка вариабилност на бактериите с най-малки промени околен свят, най-вече отразени във формата им; изследването само на една форма на микроби би довело до груби грешки при определянето на вида им. Следователно, за да се прецени вида на микроба, е необходимо познаване освен морфологията и на цялата му биол. характеристики, неговата биохим. и имунологични свойства, а за патогенни - и резултат от опит върху животно; само съвкупността от всички тези данни го прави възможно b. или м. за точно идентифициране на този или онзи микроб, за определяне на вида и вида му. За това служи цялата бактериологична технология. Култивиране на микроби върху изкуствени хранителни субстрати за изследване на тяхната биохимия. свойства е Основната точкаБ. а. Понастоящем такова отглеждане среща редица трудности. Много микроби все още не могат да бъдат получени в изкуствени култури. Пречка са редица условия, състоящи се в изключителното разнообразие на микробния свят, в изразената специфичност на биохим. функциите на микробите и произтичащата от тях променливост. Нашето непознаване на много от тези условия прави невъзможно избора на такива хранителни среди, които винаги биха били подходящи. Въпреки това, култивирането на достъпни за нас микроби е основният метод за тяхното Б. и. В кора, времето на Б. и. започва с получаване на отделни микроби, които да бъдат изследвани в чисти култури, т.е. в култури, състоящи се от един вид микроби, без примеси на други. Това се постига чрез факта, че изследваният материал се разпределя върху повърхността на твърди хранителни среди. Това разпределение има за цел да отдели микробите един от друг. През известен периодвреме, най-често за денонощие, върху онези места от субстрата, върху които са разположени микробните клетки, се образуват натрупвания от микроби, т.нар. колонии от обрасли микроби. Тези колонии в много видове микроби са много характерна форма, който служи за първа ориентация в състава на микробната флора. Индивидуалните колонии се отстраняват и се прехвърлят в подходящи хранителни среди за по-нататъшно култивиране. Предполага се, че всяка колония расте от една клетка; но това не винаги е така и последно време все повече практика включва метод за получаване на колонии от известна микробна клетка. Това отделяне на микроба се извършва под контрола на окото в микроскоп с помощта на устройство, наречено микроманипулатор. защото материалът, който ще се изследва, съдържа огромен брой различни микроби, но е необходимо да се изолира един специфичен от тях, след което в такива случаи се използват специални хранителни среди. Последните или съдържат хим. вещества, които взаимодействат помежду си под въздействието на микробен растеж, което се открива чрез някакво лесно достъпно проявление, например промяна в цвета, утаяване или разтваряне на утайка (ендо, среда на Дригалски, среда с тебешир, с кръв), или тези среди очевидно благоприятстват растежа на желания микроб и потискат растежа на микроби, свързани с, например, обогатителни среди за тиф, дифтерия. Само след такава предварителна обработка се получават чисти култури. В случаите, когато желаният микроб е в изходния материал в много малки количества и е трудно да се култивира директно, се прибягва до тестване върху животни (tbc). Материалът се инжектира в животното и след това се развиват пътищата, характерни за този микроб. промени, изолирайте чиста култура. След като са получили чиста култура, те започват да изучават биохимия. характеристики на този микроб. Тъй като съставът на хранителните среди е много сложен, за да се изследва биохимията, към средата се добавят различни, химически по-прости вещества, промените в които под въздействието на микробния растеж могат лесно да бъдат открити чрез добавяне на всеки индикатор - лакмус, неутрална компания , и др. За целта служат различни въглехидрати, моно-, ди-, полизахариди и многовалентни алкохоли, както и желатин и кръв (еритроцити). Въз основа на промяна в едно или друго от тези вещества се прави биохимичен извод. характеристики на този микроб. Голямо значение за определяне на вида на микроба има имунологичният метод, основан на способността на животинския организъм да реагира изключително специфично на парентералното приложение на чужди белтъци чрез образуване и натрупване в кръвта на различни т.нар. антитела. Кръвният серум на такива животни служи като реагент. В него наличието на тези антитела може лесно да се открие чрез поредица от прости реакции. Някои от тези реакции се използват широко и са незаменими при идентифицирането на микробни видове. Тези реакции са аглутинация, преципитация и отхвърляне на комплемента. За непатогенни микроби B. a. това може да се свърши. За патогенните микроби също е необходим експеримент върху животно, особено когато се открие нов вид. Идеалното определение за всеки патогенен микроб е да се получи патологичен от подходящо животно. промени, причинени от този микроб в природата. условия. Нашите познания за условията, необходими за такъв експеримент обаче, далеч не са пълни, поради което експериментите често са неуспешни. След това, пат.-анат. данните, получени в резултат на опит, не винаги могат да бъдат надеждни, тъй като видимите здраво състояниеживотното не казва нищо за инфекциите и другите заболявания, които е претърпяло; откритите промени могат да бъдат резултат от предишни заболявания. Всички тези съображения карат човек да бъде много внимателен относно резултатите, получени в експеримента, и никога да не се задоволява с един успешен експеримент. Въпреки това, в случаите, когато реакцията от страна на опитно животно по отношение на даден микроб е строго определена и постоянна (както например съотношението морско свинчеза дифтерия или tbc, или заек за едра шарка и бяс), където експериментите с животни са задължителни. Б. а. без такъв експеримент не е достатъчно убедително. В някои случаи при успешен експеримент е необходимо микробът, който е послужил за експеримента, да се изолира в чиста култура и да се идентифицира с оригиналната. Това е необходимо, тъй като често въвеждането на животински организъмчуждият материал събужда латентни патогенни процеси там и причинява генерализиране на ограничено страдание, повишавайки активността на микробите, разположени там. Следователно, когато се изолира чиста култура, трябва да се има предвид, че е възможно да се изолира не оригиналният микроб, а микроб, който случайно присъства в тялото. Освен това кръвта на много привидно здрави животни съдържа различни микроби, които също могат да бъдат изолирани и могат да подведат изследователя. Обща схемаКурсът на Б. и. може да се представи в следната форма: 1) подготовка на препарати от материала за изследване; фиксирането им; 2) микроскопия а) неоцветени, б) оцветени; 3) засяване върху агарови плочи за изолиране на чиста култура; при необходимост след предварителна сеитба върху селективна или обогатителна среда; 4) биохим. анализ; 5) имунни реакции; 6) експеримент върху животни. Освен за определяне на вида на една бактерия, целта на B. a. е и установяването на нейното място в систематиката на микробите. Въпреки това, систематиката на микробите все още не е достатъчно развита, или по-скоро има няколко систематики, много непълни, изградени на различни основи. Всичко това усложнява точността на анализа. През 1917 г. американските микробиолози създадоха специална комисия, която също разработи таксономия на бактериите, базирана на гл. arr., върху техните имунобиологични характеристики и свойства, открити в културите. Тази комисия тества характеристиките на всички известни микроби в горния смисъл и резултатите от тяхната работа са публикувани. Всички публикации вече са на английски език. език работи вече се придържат към номенклатурата, приета в това ръководство. Лит.:Златогоров С. И., Учението за микроорганизмите, П., 1914; Т а р а с е в и ч Л. А., Медицинска микробиология, Киев, 1910; Омелян-с и В. Л., Основи на микробиологията, М.-Л., 1926; K o 1 I e W. u. Wassermann A., Handbuch d. път. Mikroorg., B. I, 2 Ausg., Йена, 1912; K o 1 m e r J., Инфекция, имунитет a. биологична терапия, L., 1924; Bergey H., Ръководство по определяща бактериология, L., 1927; P a r k W. a. Williams A., Патогенни микроорганизми, N. Y., 1925; In es s o n A., Technique microbiologique, P., 1925; Wadsworth A., Стандартни методи, N. Y., 1927.A. Челиш.

Ако получените резултати от изследването на изолираната култура съответстват на горните данни, полученият бактериален щам се определя като бактериална култура от вида Yersinia enterocolitica.

Ако изследваната бактериална култура не е типизирана като бактерия от вида Yersinia enterocolitica, възможно е повторно използване на бактериалната суспензия със средата за натрупване, съхранявана в хладилник при +4°C.

Оптималното решение е да се постави на изследването не една проба от тестовата проба, а цяла серия от проби.

Общите условия за бактериологично изследване на материала - в рамките на 7 дни.

Видовата идентификация се извършва чрез биохимични и серологични методи.

Чумният бактериофаг може да се използва за ускорено диагностициране на заболяването. Бактериофагът Y. pestis се изолира от различни източници, включително тъкан от болни хора и животни, както и от бълхи. Много автори свързват естественото бързо изчезване на болестта във фокуса с наличието на бактериофаг. Неговата висока специфичност и вирулентност за чумния бацил позволява използването му за идентифициране на чума чрез въвеждането му в тестовия материал преди инокулация или чрез повишаване на титъра на бактериофага в средата.

За бързо откриване се използват също АТ, белязани с флуоресцин (позволяващи откриването на Y. pestis в различни обекти през първите 2 часа от изследването), реакцията на неутрализация на АТ, реакцията на утаяване в стандартни агарови плаки и методът на ускорено растеж на Y. pestis върху хранителна среда за обогатяване.

Разработени са и методи, които ускоряват биологичния тест, например прилагане на глюкокортикоиди или пилешки жълтък на заразени животни, което позволява да се ускори диагностицирането на чума в случаи на намалена вирулентност или когато се използва малка инфекциозна доза .

Основните биохимични свойства, които разграничават Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, са представени в таблици 15 и 16. Допълнителни признаци могат да бъдат резултатите от реакцията на Voges-Proskauer: винаги отрицателни при Y. pseudotuberculosis и положителни при 22-28°C при Y ентероколитика. Наскоро беше предложена селективна среда, съдържаща цефсулодин, иргазан и новобиоцин (CIN-агар) за изолиране на Y.enterocolitica от изпражненията.

Хранителна среда за култивиране на Yersinia Phosphate буферен разтвор (fbr)

Разтвор А: KH 2 PO 4 - 9,08 g в 1,0 l дестилирана вода; разтвор B: Na 2 HPO 4  2H 2 O - 11,87 g в 1 литър дестилирана вода (pH 7,6-7,8). Комбинирайте 150 ml от разтвор А с 850 ml от разтвор B. Изсипете 5 ml в епруветки, стерилизирайте при 1 atm. в рамките на 1 час.

Буфер-казеин-дрождева среда (bcd)

Казеинов хидролизат със средна степен на разцепване - 2,0 ml (Дагестански изследователски институт по хранителни среди); екстракт от хлебна мая - 5,0 ml; фосфатен буферен разтвор (pH 7,6-7,8) - до общ обем 1 литър. Екстракт от хлебна мая: към 500 g мая, предварително стрита до хомогенна маса в порцеланово хаванче, се добавя до 1 литър дестилат в малко количество дестилирана вода. Суспензията се изсипва в колба и се вари 60 минути на слаб огън при разбъркване. Охладете суспензията при 5°C за 16-18 часа. След това супернатантата се изхвърля и се филтрува през хартиен филтър с широки пори. Изсипете готовия екстракт от дрожди във флакони, стерилизирайте под налягане от 0,5 atm. 30 минути; съхранявайте при 5-8°C за 12 месеца.

Към 0,5 L PBS добавете 2,0 g казеинов хидролизат (предварително приготвен според указанията на етикета) и 5,0 ml екстракт от дрожди. Разбъркайте чрез разклащане, добавете разтвор на фосфатен буфер до общ обем от 1 литър и проверете pH на готовата среда (трябва да бъде 7,6-7,8). След това изсипете сместа в епруветки от 5,0 ml и автоклавирайте под налягане от 0,5 atm. в рамките на 20 минути. Средата може да се използва в рамките на 7-10 дни, ако се съхранява в хладилник.

Изследването, използвано за идентифициране патогенни бактериив материала от болни животни или техните трупове, откриване на микроби в предмети външна среда, фураж, месо и др. Естеството и методът на вземане на проби, методът на изпращане на материал за различни инфекциозни заболявания не са еднакви, но има общи разпоредби, които трябва да се вземат предвид независимо от обекта на изследване и свойствата на материала. Материалът за изследване, ако е възможно, се събира при асептични условия в стерилни съдове и се доставя възможно най-скоро с придружаващ документ в лабораторията (посочва датата на вземане, естеството и източника на материала, основните Клинични признацизаболявания и патологични промени, целта на изследването). B. i. включва 3 основни метода: микроскопия (бактериоскопия) на натривки от патологичен или друг изследван материал; изолиране на чиста култура от бактерии с последващо изследване на морфологични, културно-биохимични, антигенни и патогенни свойствабактерии.

Бактериологични изследвания започнете с микроскопия, която ви позволява да откривате микроби в материала, да изучавате тяхната морфология (форма, размер, структура). По време на микроскопия на патологичен материал се приготвят отпечатъци от органи, тъкани или тънки петна от друг материал за изследване, изсушават се на въздух, фиксират се (обикновено чрез пламък) и се оцветяват по един или друг метод в зависимост от посоката на изследването (вижте Оцветяване на микроорганизми). За откриване на определени бактерии (например причинителя на туберкулозата) патологичният материал се обработва предварително с един от методите за обогатяване, за да се увеличи концентрацията на бактерии в него и да се отървете от чужди микроби. Флуоресцентната микроскопия се използва за ускоряване на откриването на бактерии. За изследване на подвижността на бактериите поради наличието на камшичета се използва микроскопия на млада (12-24 h) жива култура с помощта на висящи капки или натрошени препарати от капки. Подвижността на бактериите може да се установи и на базата на характеристиките на растежа на културата в полутечна MPA. Изолирането на бактериална култура се извършва чрез засяване на материала върху хранителни среди. За улесняване и ускоряване на изолирането на бактериите се използват диференциално диагностични и елективни хранителни среди (твърди и течни), върху които определени видове бактерии дават своя характерен растеж (докато растежът на чужди микроби се забавя). Засяването върху плътна хранителна среда в бактериологични чинии се извършва чрез втриване на няколко капки от материала върху повърхността на средата с шпатула. При изследване на паренхимните органи на мъртви или умрели животни парче от органа се изгаря или фламбира, след което се нарязва със стерилна ножица и с помощта на пинсети се минава по разреза върху хранителната среда в чашата. В течна среда инокулацията на материала се извършва с пастьорова пипета. За да се получи растеж на изолирани колонии от микроби върху твърда среда и да се отделят изследваните бактерии от свързаните микроорганизми, се извършва фракционна инокулация по метода на Дригалски. Засяващи чаши и епруветки се инкубират в термостат при оптимална температура за растеж на всеки вид бактерии (обикновено 37°C) за 1-2 дни, в някои случаи (туберкулозни бактерии) - до 3-4 седмици. Най-дългият и труден етап от Б. и. - Генерична и видова идентификация на изолирани култури. Изследват се само чисти култури, получени след субкултивиране от една колония и имащи идентични морфологични и тинкториални свойства (виж Идентификация на микроби). Антигенните свойства на културата се изследват в реакцията на аглутинация. Определянето на патогенните свойства на бактериите се извършва чрез заразяване на лабораторни животни с култура или културален филтрат (при определяне на образуването на токсини).

След изучаване на свойствата на бактериите, получените данни се сравняват с характеристиките на бактериите, налични в класификационните схеми или детерминантите на микробите (D. Bergey, 1974; N. A. Krasilnikov, 1949 и др.), И тяхната родова и видова диференциация се извършва. В съмнителни случаи се извършва повторно изследване на материала. Резултатите на Б. и. се записват в регистрационен дневник или във формуляр за лабораторно изследване, в заключението на който се посочва кой микроб е изолиран от изследвания материал. Диагнозата на инфекциозно заболяване може да се постави само като се вземат предвид епизоотологичните, клиничните и патологичните данни.

БАКТЕРИОЛОГИЧНО ИЗСЛЕДВАНЕ - изследване, използвано за откриване на патогенни бактерии в материал от болни животни или техните трупове, откриване на микроби в обекти на околната среда, фураж, месо и др. Естеството и методът на вземане на проби, методът за изпращане на материал за различни инфекции. болестите не са еднакви, но има общи положения, които трябва да се вземат предвид независимо от обекта на изследване и свойствата на материала. Тестовият материал се събира асептично, ако е възможно. условия в стерилни съдове и доставени в близко бъдеще с придружаващ документ в лабораторията (посочва датата на вземане, естеството и източника на материала, основните клинични признаци на заболяването и патологоанатомичните промени, целта на изследването) . B. i. включва 3 осн метод: микроскопия (бактериоскопия) на намазки от патол. или друг тестов материал; изолиране на чиста култура от бактерии с последващо изследване на морфологичните, културно-биохимичните, антигенните и патогенните свойства на бактериите.

B. i. започнете с микроскопия, която ви позволява да откривате микроби в материала, да изучавате тяхната морфология (форма, размер, структура). При микроскопия патол. приготвят се петна-отпечатъци от органи, тъкани или тънки петна от друг изследван материал, изсушават се на въздух, фиксират се (обикновено чрез пламък) и се оцветяват по един или друг метод в зависимост от посоката на изследването (виж. Оцветяване микроорганизми ). За откриване на nek-ry бактерии (напр. Причинителят на туберкулозата) patol. материалът е предварително обработен с един от методите за обогатяване, за да се увеличи концентрацията на бактерии в него и да се отървете от външни микроби. Флуоресцентната микроскопия се използва за ускоряване на откриването на бактерии. За изследване на подвижността на бактериите поради наличието на флагели се използва микроскопия на млада (12-24 h) жива култура с помощта на препарати висяща капка или смачкана капка . Подвижността на бактериите може да се установи и на базата на характеристиките на растежа на културата в полутечна MPA.

Изолирането на бактериална култура се извършва чрез инокулация на материал върху хранителни среди . За улесняване и ускоряване на изолирането на бактериите се използва диференциално диагностично и планово хранене. среди (плътни и течни), върху които определени видовебактериите дават своя характерен растеж (докато растежът на чужди микроби се забавя). Сеитба на плътно хранене. среди в бактериални. Чашките се извършват чрез втриване с шпатула на няколко капки материал върху повърхността на средата. При изследване на паренхимните органи на мъртви или мъртви животни парче от органа се изгаря или фламбира, след което се изрязва със стерилна ножица и с помощта на пинсети се прокарва нарязаната повърхност по ямката. среда в чаша. В течна среда инокулацията на материала се извършва с пастьорова пипета. За да се получи растеж на изолирани колонии от микроби върху твърда среда и да се отделят изследваните бактерии от свързаните микроорганизми, се извършва фракционна инокулация по метода на Дригалски. Засятите чаши и епруветките се инкубират в термостат при оптимална температура за растежа на всеки вид бактерии (обикновено 37 ° C) в продължение на 1-2 дни, в някои случаи (туберкулозни бактерии) - до 3-4 седмици. Най-дългият и труден етап от Б. и. е родовата и специфична идентификация на изолирани култури. Изследват се само чисти култури, получени след субкултивиране от една колония и имащи идентични морфологични характеристики. и тинкториални свойства (вж. Микробна идентификация ). В реакцията се изследват антигенните свойства на културата аглутинация . Определянето на патогенните свойства на бактериите се извършва чрез заразяване на лабораторни животни с култура или културален филтрат (при определяне на образуването на токсини).

След изучаване на свойствата на бактериите, получените данни се сравняват с характеристиките на бактериите, налични в класификационните схеми или детерминантите на микробите (D. Bergey, 1974; N. A. Krasilyshkov, 1949 и др.), И тяхната родова и видова диференциация се извършва. В съмнителни случаи се извършва повторно изследване на материала. Резултатите на Б. и. запишете в регистрационния дневник или във формуляра за лабораторно изследване, в заключението разрез посочете какъв микроб е отделен от изследвания материал. Диагнозата на инфекциозно заболяване може да се постави само като се вземат предвид епизоотологичните, клиничните. и патолог. данни.

Лит.: Лабораторни изследванияпо ветеринарна медицина, изд. Антонов В. Я., Блинов П. Н. М., 1971.

Ветеринарен енциклопедичен речник. - М.: "Съветска енциклопедия". Главен редактор V.P. Шишков. 1981 .

Вижте какво е "БАКТЕРИОЛОГИЧНО ИЗСЛЕДВАНЕ" в други речници:

скатологично изследване- лабораторно (макро и микроскопско, химично, бактериологично) изследване на изпражненията за диагностични цели ... Голям медицински речник

Изолиране на инфекциозно болни- противоепидемична мярка, насочена към отделяне на пациенти с инфекциозни заболявания от други хора, както и хора, които са подозрителни за тези заболявания или са имали контакт с пациенти, за да се предотврати по-нататъшното разпространение на инфекцията ... Медицинска енциклопедия

КОРЕМЕН ТИФ - – заразна болестот групата чревни инфекциихарактеризиращ се с улцеративни лезии на лимфния апарат тънко черво, циклично протичане, бактериемия, симптоми на интоксикация, кожен обрив. Причинителят е Salmonella typhi, ... ... Енциклопедичен речник по психология и педагогика

Име на болестта Патоген Източник на инфекциозния агент Пътища на предаване на инфекциозния агент Основни засегнати групи животни Продължителност инкубационен периодНосителство на патогена Най-важните клинични признаци Патологични анатомични ... ... Ветеринарен енциклопедичен речник- I Изследване на пациента Изследването на пациента е комплекс от изследвания, насочени към идентифициране индивидуални особеностипациент, установяване на диагнозата на заболяването, обосновка рационално лечение, дефиниция на прогноза. Обемът на изследванията в O ... Медицинска енциклопедия

ГОНОРЕЯ- ГОНОРЕЯ. Съдържание: Исторически данни .......... 686 Биология на гонокока в тялото ..... 6 87 Клиничен имунитети реинфекция.....689 Лабораторна диагностика D.............690 Ж. като общо заболяване.............695 Обща патология… … Голяма медицинска енциклопедия

Извънбелодробна туберкулоза- Извънбелодробната туберкулоза е условно понятие, което съчетава форми на туберкулоза от всякаква локализация, с изключение на белите дробове и други дихателни органи. В съответствие със клинична класификациятуберкулоза (Tuberculosis), приета в нашата страна, до Т. век. Препоръчай на... ... Медицинска енциклопедия