Kislinsko-bazično stanje. Klinični pomen in sodobni metodološki vidiki določanja ravni karboksi- in methemoglobina v krvi

Določitev karboksihemoglobina v krvi je dragocen pokazatelj, ki pojasnjuje diagnozo in določa racionalna terapija. Torej, v primerih, ko se po določenem času v krvi žrtve vzpostavi ravnovesje med nastajanjem in odstranjevanjem ogljikovega monoksida, lahko kisikova terapija izgubi svoj pomen.

Kvalitativna reakcija na prisotnost karboksihemoglobina v krvi:

1. Iz prsta z iglo odvzamemo kri v količini 0,01 ml in jo 100-krat razredčimo z destilirano vodo (do 1 ml). Epruveto z razredčeno krvjo postavimo pred spektroskop in pod naravno ali umetno osvetlitvijo opazimo dva absorpcijska pasova v rumeno-zeleni (A. \u003d 579-564 nm) in zeleni (k \u003d 548 - 530 nm) deli spektra, ki sovpadajo s spektrom oksihemoglobina (A \u003d 598-577 in 556-536 nm).

Za razlikovanje izvedemo kvalitativno reakcijo: v epruveto dodamo snov, ki hitro reagira s kisikom in pretvori krvni oksihemoglobin v reduciran hemoglobin (1–2 kapljici amonijevega sulfida NH4S ali 4–5 mg natrijevega ditionita Na2S204). Epruveto pretresemo in ponovno postavimo pred spektroskop.

V odsotnosti karboksihemoglobina je viden samo en širok absorpcijski pas, ki ustreza zmanjšanemu hemoglobinu in se nahaja v rumeno-zelenem delu spektra (A = 596-543 nm). V prisotnosti karboksihemoglobina v spektru ni sprememb, ponovljena spektroskopija pa še naprej določa dva absorpcijska pasova - v rumeno-zelenem in zelenem delu spektra. Občutljivost spektroskopskega vzorca ustreza 15 - 20 % karboksihemoglobina glede na polna kri. Natančnejše rezultate dobimo s plinometričnimi in predvsem spektroskopskimi metodami.

2. Spektroskopska metoda za določanje karboksihemoglobina temelji na sposobnosti karboksihemoglobina in reduciranega hemoglobina na različne stopnje absorbirajo svetlobne žarke pri valovni dolžini 534-563 nm. Izračunana je razlika med svetlobno absorpcijo karboksihemoglobina in svetlobno absorpcijo reduciranega hemoglobina, ki ga dobimo z dodatkom natrijevega ditionita.

Za analizo se iz prsta vzame 0,1 ml krvi. Kri odsesamo z mikropipeto, ki smo jo predhodno splaknili z raztopino natrijevega citrata; damo v merilno epruveto s prostornino 10 ml in dovedemo prostornino do oznake 0,005 N. raztopina natrijevega hidroksida. V 5 ml bistre raztopine dodajte redukcijsko sredstvo - 8 mg natrijevega ditionita - in izvedite spektrometrično meritev optične gostote raztopine pri valovnih dolžinah 534 in 536 nm. Vsebnost COHb v krvi se izračuna po formuli:

kjer je E1 - optična gostota pri valovni dolžini 534 nm; E2 - enako pri valovni dolžini 536 nm.

O fiziološko sprejemljivih vrednostih karboksihemoglobina v krvi ni enotnega mnenja. Tako lahko pri mestnih prebivalcih vsebnost karboksihemoglobina v krvi doseže 4-7%.

Treba je opozoriti, da pri bolnikih s kronično zastrupitvijo z ogljikovim monoksidom raven karboksihemoglobina v krvi običajno ustreza normalnim vrednostim. Določanje karboksihemoglobina v njih se lahko pojavi pri motnjah v delovanju pljuč in srca z odstopanji v presnovi ogljikove kisline, pa tudi pri stritremiji, sladkorni bolezni, silikozi in bolezni srca.

3. V primerih, ko pri roki ni spektroskopa, se lahko uporabi približna, tehnično preprosta metoda za določanje karboksihemoglobina z bakrovim sulfatom. Kapljica krvi žrtve se nanese na kos belega papirja (steklo, fajansa, porcelan) s sumom na zastrupitev z ogljikovim monoksidom. Zraven je postavljena kapljica krvi zdrava oseba. Vsaki kapljici krvi dodamo kapljico 2% raztopine bakrovega sulfata in premešamo z leseno palčko (vžigalice). Po 30 s - 1 min v krvi, ki vsebuje karboksihemoglobin, nastane mastna masa sivkasto rjave ali čokoladne barve. Čez nekaj časa postane rdeče-rjave barve. Pri zelo visokem nivoju SONY v krvi (blizu 100 %) ima mazilo podobna masa škrlatno rdeče barve, ki po stoji potemni in pridobi rjav ton. Zastrupitev z ogljikovim monoksidom se pojavi s povečanjem vsebnosti hemoglobina in rdečih krvnih celic v periferni krvi.

Določanje methemoglobina. Z zastrupitvijo z anilinom, nitro- in dinitrobenzenom, Berthollet sol in druge spojine, ki lahko oksidirajo železo v hemoglobinu, nastane methemoglobin s prehodom železa iz dvovalentne v trivalentno spojino.

Obstaja mnenje, da je v krvi zdrave osebe in živali vedno določena (fiziološko sprejemljiva) količina methemoglobina. V telesu toplokrvnih živali nenehno potekajo procesi nastajanja in redukcije methemoglobina v hemoglobin oksid. AT normalne razmere ti procesi so dobro uravnoteženi. Raven methemoglobina pri zdravi osebi ne presega 1% glede na skupni hemoglobin v krvi:

1. Kakovostna reakcija na methemoglobin se izvede s spektralno analizo. Methemoglobin daje značilen spekter s širokim absorpcijskim pasom v rdečem delu spektra (k = 630 nm) in dvema pasovoma v oranžnem in rumenem delu spektra.

2. Velik pomen za oceno resnosti zastrupitve ima kvantitativno določitev methemoglobina. Proizvaja se na spektrofotometru. V tem primeru se methemoglobin po predhodni določitvi z absorpcijskim pasom svetlobe pri valovni dolžini 633 nm pretvori v cianmethemoglobin, ki na tej točki spektra sploh ne daje absorpcijskega pasu. Metoda temelji na fotometriji methemoglobina in cianmethemoglobina v rdečem delu spektra pri valovni dolžini 630 nm, v katerem imata različne absorpcijske spektre. Sprememba intenzivnosti absorpcije svetlobe po dodatku kalijevega cianida (za pretvorbo MtHb v cianmethemoglobin) je premo sorazmerna s koncentracijo MtHb.

Za testiranje se vzameta dva vzorca krvi. Hemoglobin enega vzorca pretvorimo v methemoglobin z dodatkom kapljice nasičene raztopine KjFe (CN)6. V drugem vzorcu je hemoglobin oksidiran zaradi kisika, raztopljenega v mediju. Nato se določi stopnja absorpcije svetlobe z valovno dolžino 619 nm v obeh vzorcih, čemur sledi izračun razlike v absorpciji svetlobe med methemoglobinom in oksihemoglobinom. Ob prisotnosti znanih skupnih vrednosti razlike za normalna kri njegovo zmanjšanje se obravnava kot izguba dela hemoglobina zaradi njegovega prehoda v methemoglobin.

3. kvantifikacija methemoglobin lahko merimo tudi z ročnim spektroskopom. Kri, 5-krat razredčeno z destilirano vodo (0,2 ml krvi in ​​0,8 ml vode), damo v valj in opazujemo skozi ročni spektroskop. Če je v rdečem delu spektra absorpcijski pas, raztopino razredčimo z vodo, dokler pas ne postane komaj viden. Zabeleži se skupni volumen krvne soli K3Fe(CN)6, ki povzroči prehod preostalega oksihemoglobina v methemoglobin. V rdečem delu spektra se ponovno pojavi absorpcijski pas. Raztopino ponovno, kot prvič, razredčimo z vodo in ponovno dobimo vrednost skupnega volumna (Vi). Izračun se izvede po formuli:

kjer je V prvi volumen v mililitrih; Vx je drugi volumen v mililitrih.

Ena od obetavnih metod laboratorijske diagnostike je plinsko-tekočinska kromatografija. Od drugih se razlikuje predvsem po visoki specifičnosti in občutljivosti, pa tudi po hitrosti analize (5-15 minut), majhni količini proučevanega materiala, primerljivi preprostosti raziskav in njihovi zadostni objektivnosti. S to metodo jih je mogoče kvantificirati in kvalitativno določiti strupene snovi, kot so dikloroetan, ogljikov tetraklorid, kloroform, aceton, etilni in metilni alkoholi, organofosfatni pesticidi.

Nujna pomoč pri poklicnih zastrupitvah, Artamonova V.G., 1981

- krvni pigment, katerega vloga je prenašanje kisika do organov in tkiv. Zunaj eritrocitov (v krvni plazmi) hemoglobin praktično ni zaznan.

Kemično hemoglobin spada v skupino kromoproteinov. Njegovo prostetično skupino, ki vključuje železo, imenujemo hem, beljakovinsko komponento pa globin. Molekula hemoglobina vsebuje 4 heme in en globin. Hem je metaloporfirin, kompleks železa s protoporfirinom. Protoporfirin temelji na štirih pirolnih obročih, ki so povezani preko metilnih mostov (CH), da tvorijo porfirinski obroč. Hem je enak za vse vrste človeškega hemoglobina.

v krožečih eritrocitih hemoglobin je v stanju neprekinjene reverzibilne reakcije bodisi tako, da veže molekulo kisika (v pljučnih kapilarah) ali pa jo oddaja (v kapilarah tkiva).

Ko je kri popolnoma nasičena s kisikom, 1 g hemoglobina veže 1,34-1,36 ml kisika. Pri visoki vsebnosti kisika v okolju(v pljučih) zmanjšan hemoglobin zlahka in hitro preide v oksihemoglobin, medtem ko pri nizkih koncentracijah kisika v okolju (v tkivih, kjer se kisik izkorišča) oksihemoglobin zlahka odcepi kisik od sebe. V primeru poslabšanja pogojev krvne arterilizacije zaradi kršitve difuzije kisika skozi alveolarno membrano ali povečanja hitrosti krvnega pretoka v pljučnem obtoku, pa tudi s povečano porabo kisika v tkivih, se vsebnost oksihemoglobina v krvi se zmanjša, količina reduciranega hemoglobina pa se ustrezno poveča. Normalno v arterijske krvi vsebnost oksihemoglobina je 95-96% celotne količine hemoglobina. AT venske krvi ta vrednost se zmanjša na 60 %.

karboksihemoglobin (HbCO)

- oksikarbonski hemoglobin - disociira nekaj stokrat počasneje kot oksihemoglobin, zato že majhna koncentracija (0,07%) v zraku ogljikov monoksid(CO), ki veže približno 50 % hemoglobina, prisotnega v telesu, in mu odvzame sposobnost prenašanja kisika, je usoden.

izobraževanje karboksihemoglobin se začne na periferiji eritrocitov, ki so v stiku s CO v pljučnih kapilarah. Med naslednjim krvnim obtokom ni prerazporeditve CO med eritrociti. Z naraščanjem koncentracije CO v zraku se tvorba karboksihemoglobina širi od periferije eritrocitov do njihovega središča. Vsak gram globina je sposoben vezati 1,33-1,34 ml O2 ali CO. Ta vrednost se imenuje Huefnerjeva konstanta. Vendar pa je afiniteta za CO 200-290-krat večja kot za O2-

Ravnotežna konstanta za to reakcijo je:

V zvezi s tem se tudi pri nizki vsebnosti CO v vdihanem zraku ustvari konkurenčno razmerje med temi plini pri zajemanju hemoglobina s pomembno prednostjo CO.

Določanje vsebnosti karboksihemoglobina

(po L.E. Gornu). Metoda temelji na fotometričnem določanju razlike v absorpciji svetlobe raztopin oksihemoglobina in karboksihemoglobina po njihovi denaturaciji z alkalijami.

Oprema in reagenti. Univerzalni fotometer FM ali horizontalni fotometer; 0,04% raztopina amoniaka; 0,2 n. raztopina hidratov natrijevega ali kalijevega oksida (kavstična pepelika ali natrijev hidroksid).

Metodologija. 4,9 in 5,9 ml 0,04% raztopine amoniaka vlijemo v 2 epruveti, nato pa v vsako dodamo 0,1 ml krvi. 5 ml 0,2 n. raztopino alkalije hitro premešamo z dvojnim obračanjem in fotometriramo vzorec 1 minuto po vnosu alkalije (50-70 s, ne več!) s svetlobnim filtrom št. 5 (M-55 ali M-52, efektivna valovna dolžina prepuščene svetlobe). 550 ali 520 nm). Vsebino druge epruvete, v kateri določamo skupno količino hemoglobina, neposredno fotometriramo s svetlobnim filtrom št. 5 (M-50, 496 nm). Fotometrija se izvaja v skladu s splošno sprejetimi pravili v 10 mm kivetah z destilirano vodo. Pri uporabi svetlobnega filtra št. 5 (M-55) se vsebnost karboksihemoglobina izračuna po formuli:

kjer je E ekstinkcija.

Če ima filter št. 5 oznako M-52 in ne M-55, se koeficient 132 nadomesti s 123.

Norma in ocena rezultatov študije karboksihemoglobina

V krvi oseb, ki med proizvodnjo ne pridejo v stik z ogljikovim monoksidom, je karboksihemoglobin praviloma prisoten v določeni količini, kar je posledica skoraj stalnega onesnaženja ozračja s produkti nepopolnega zgorevanja vseh vrst goriva. Po mnenju različnih avtorjev kri mestnih prebivalcev, ki niso povezani z izpostavljenostjo ogljikovemu monoksidu, vsebuje do 15% karboksihemoglobina. Njegova povprečna koncentracija po različnih podatkih niha od 2-4 do 6-8%. Kajenje povzroči povečanje te vrednosti za 2-3%. Vir tvorbe karboksihemoglobina ni le eksogeni ogljikov monoksid, temveč tudi do neke mere ogljikov monoksid, ki nastane v telesu kot posledica nepopolne oksidacije nekaterih presnovnih produktov, zlasti hemoglobina. Ker pri prenosu ponesrečenca v čisto atmosfero, zlasti ob vdihavanju kisika, pride do disociacije karboksihemoglobina relativno hitro (vsebnost karboksihemoglobina se v prvi uri prepolovi), se rezultati laboratorijske raziskave kri, odvzeta za analizo nekaj časa po prvi pomoči, lahko daje napačen vtis o začetni največji koncentraciji karboksihemoglobina, ki se je zgodila, in s tem izkrivlja predstavo o resnosti klinična slika zastrupitev. To je utemeljitev potrebe po zmanjšanju intervalov med odstranitvijo žrtve iz zastrupljenega ozračja in odvzemom krvi za analizo. pri kronična zastrupitev ogljikov monoksid znatno upočasni disociacijo karboksihemoglobina v krvi.

Klinični krvni test - preprost in informativni študij. Dobro je, ker se kri vzame iz prsta, saj je potrebna minimalna količina, posebna priprava ni potrebna: edini pogoj je, da se analiza opravi na prazen želodec. Tehnika vam omogoča, da ocenite hemogram, to je število in razmerje celic, pa tudi številne druge ključni kazalci, med katerimi ni zadnje mesto za krvni test za hemoglobin. Kaj določa njegovo koncentracijo v krvi? Koliko hemoglobina mora biti normalno? Kaj še morate vedeti o tem indikatorju?

Glavna funkcija hemoglobina je transport. Veže se s kisikom, ki je prišel v kri iz pljučnih alveolov, ga prenese in nato preda tkivom. Toda vloga hemoglobina se tu ne konča: ogljikov dioksid sprejme in ga prenese nazaj v pljuča, od koder se odstrani v okolje. Tako je ta protein velikega pomena za dihanje: brez njega celice Človeško telo ni možnosti za popolno izvedbo presnove.

Obstaja več vrst normalnega hemoglobina:

• HbA1,
• HbA2,

Od teh sta A1 in A2 značilna za odrasle (poleg tega je HbA1 96-98% skupnega), hemoglobin F pa za novorojenčke. V prvih dneh življenja je ta številka do 60-80%, do četrtega ali petega meseca življenja pa se zmanjša na 10%. V človeški krvi je normalni hemoglobin prisoten v treh kemične oblike: oksihemoglobin (spojina s kisikom, oznaka - HbO 2), karbhemoglobin (spojina z ogljikovim dioksidom, oznaka - HHbCO 2) in reducirani hemoglobin (oznaka kot HHb). Vendar pa je ta protein sposoben tvoriti tudi patološke spojine, kot sta karboksihemoglobin in methemoglobin.

Karboksihemoglobin je spojina z ogljikovim monoksidom. Ni sposoben prenašati kisika in ogljikovega dioksida, kar vodi do zaključka, da ko je prisoten v krvi, začnejo tkiva najmočneje doživljati kisikovo stradanje. Zato obstaja veliko večja verjetnost, da bodo ljudje v požaru umrli zaradi zadušitve kot zaradi samega ognja.

Methemoglobin nastane pri oksidaciji hemoglobina, železo v methemoglobinu je trivalentno (običajno je dvovalentno). Takšna spojina močno veže kisik in ga zelo nerada daje tkivom. Zato med tvorbo methemoglobina tudi tkiva doživijo hudo hipoksijo. Methemoglobin se pojavi v krvi pri zastrupitvi z oksidanti (kalijev permanganat, anilin itd.), Nitrati in nitriti.

Sam krvni test za hemoglobin ne vključuje določanja prisotnosti karboksihemoglobina in methemoglobina v krvi. To je nepotrebno. Podobna študija se izvede, če obstajajo simptomi zastrupitve: nato se kri odpelje v toksikološki laboratorij, kjer se s posebnimi tehnikami odkrije prisotnost methemoglobina ali karboksihemoglobina.

Metoda izvajanja krvnega testa za hemoglobin

Za merjenje krvi ni treba vzeti iz vene, vzame se iz prsta. To je pravilno, saj je takšna ograja manj travmatična in vključuje odstranitev minimalna količina krvi, kar je povsem dovolj za določitev preučevanega indikatorja. Analiza ne zahteva posebne priprave: diete ali dodatne manipulacije niso potrebne. Edina omejitev je odvzem krvi na prazen želodec. Spet dejstvo, da je vzeta iz prsta, pomaga preprečiti lačno sinkopo, ki se včasih pojavi, ko kri vzamemo iz vene na prazen želodec.

Trenutno obstaja več skupin metod, ki omogočajo čim bolj natančno določitev. Do nedavnega je bila metoda Sali priljubljena, vendar ni dovolj zanesljiva in ne ustreza sodobnim zahtevam. Zato so namesto nje predlagane kolorimetrične in gasometrične metode ter metoda za merjenje vsebnosti železa v molekuli hemoglobina. Tako je: čas teče naprej in sodobne tehnologije postopoma zamenjati starejše.

Poleg klasičnega odvzema krvi iz prsta za merjenje hemoglobina v laboratoriju obstaja ekspresna tehnika. Če želite to narediti, obstaja posebna naprava - hemoglobinometer. Načelo delovanja naprave je kolorimetrično. Krv se vzame tudi iz prsta: za merjenje je potrebnih zelo malo: približno 10 mikrolitrov.

Postopek traja zelo malo časa: naprava traja manj kot minuto od trenutka prebadanja prsta do rezultata. Poleg tega imajo sodobne naprave vgrajen sistem, ki preverja, kako dobro delujejo vsi elementi.

Takšna naprava je precej draga, zato, če morate darovati kri za hemoglobin nekajkrat na leto, potem je ne smete kupiti: lažje je brezplačno opraviti analizo v laboratoriju. Toda za tiste, ki so prisiljeni nenehno spremljati koncentracijo hemoglobina, mora biti ta naprava na voljo. V tem primeru se meritve lahko izvajajo večkrat na dan, kar je preprosto potrebno za nekatere bolezni krvi.

Seveda se ta naprava ne uporablja tako pogosto kot recimo naprave za določanje ravni sladkorja in holesterola, kar je po eni strani povezano z neozaveščenostjo javnosti, po drugi strani pa ne s tako visoka incidenca takšnih patologij. Seveda uporaba takšnih naprav ne odpravlja popolnoma potrebe po opravljanju analize v laboratoriju, kjer dobimo natančnejše rezultate.

Interpretacija rezultatov študije

Pri ženskah znaša 115-145 g/l, pri moških pa 130-160 g/l. Dešifriranje rezultatov analize ne vključuje samo primerjave dobljenih številk s ciljnimi indikatorji, temveč tudi njihovo oceno v kombinaciji z določanjem števila rdečih krvnih celic. Za to obstaja poseben indeks, ki se imenuje barvni indikator, ki odraža koncentracijo hemoglobina v eritrocitu. Običajno je v območju od 0,85 do 1,05.

Nizek hemoglobin je znak anemije. Če hkrati barvni indeks je tudi zmanjšana v primerjavi z normo, potem je takšna anemija hipokromna. Obstaja več razlogov, ki prispevajo k znižanju hemoglobina, vendar jih lahko vse razdelimo na dva velike skupine: kršitev sinteze in povečan razpad. Tvorba hemoglobina je lahko motena zaradi pomanjkanja njegovih glavnih sestavin - železa in aminokislin, kar je povezano z podhranjenost, bolezni prebavila, dolgotrajna vročina itd. Če so vse komponente prisotne v zadostnih količinah, je lahko posledica kršitve sinteze genetski razlogi ali na primer zastrupitev s svincem.

Povečano razgradnjo hemoglobina opazimo pri izgubi krvi (to je lahko eden od znakov okultne krvavitve), hemolizi rdečih krvničk (z malarijo, zastrupitvijo s hemolitičnimi strupi, avtoimunska lezija itd.), dedne motnje. Na žalost dekodiranje kliničnega krvnega testa ne daje pojma o razlogih, ki so privedli do znižanja ravni hemoglobina. To bo zahtevalo dodatne raziskave.

Zvišanje hemoglobina je lahko posledica povečanega nastajanja rdečih krvničk zaradi hipoksije, zvišanja ravni glukokortikoidov oz. tumorski proces. Drugi razlog je strjevanje krvi, ki je lahko posledica stresa, dehidracije in nekaterih bolezni.

Obstajajo tudi posebni testi za določanje odstotka posameznih frakcij hemoglobina, ugotavljanje patološke oblike(methemoglobin, karboksihemoglobin). Vsako od teh študij predpiše zdravnik glede na določene indikacije. Če ni motenj hemoglobina v klinična analiza krvi (oziroma ni znakov zastrupitve v primeru karboksi- in methemoglobina), potem praviloma ni razlogov za dodatne preiskave.

Hemoglobin je bistvenega pomena za človeka. Brez njega se začne stradanje tkiv s kisikom, kar lahko privede do največ resne posledice, vključno s smrtjo (to ni neobičajno pri zastrupitvah, povezanih s tvorbo karboksihemoglobina in methemoglobina). Dešifriranje krvnega testa za hemoglobin lahko pokaže obstoječa odstopanja od norme, ki jih je treba odpraviti. Dobra vrednost ni boj s samim simptomom, temveč prepoznavanje vzroka in ustrezno zdravljenje.

Opis

Snovi, ki jih vdihavamo z zrakom, lahko človeku resno škodujejo. Če velika količina ogljikovega monoksida vstopi v pljuča, se veže na hemoglobin in ga nepovratno blokira. Takšen protein za razliko od običajnega ni sposoben opravljati svoje funkcije.

Karboksihemoglobin ne prenaša kisika iz pljuč v organe in tkiva. Posledično se razvije hipoksija telesa. To se kaže z vrtoglavico, slabostjo in bruhanjem. Če je vsebnost patološkega globulina v krvi majhna, se razgradi sam in ne škoduje bolniku. Ko so norme snovi večkrat presežene, jih je mogoče odstraniti le z medicinskimi sredstvi.

Zastrupitev z ogljikovim monoksidom se ne pojavi le pri požarih in drugih izrednih dogodkih. Njegova količina v vdihanem zraku presega vse možne norme dolgoletni kadilci. Hkrati si lahko zdravnik in bolnik napačno razlagata simptome zastrupitve, so nespecifični, spominjajo na bolezen dihal.

V teh pogojih postane analiza vsebnosti karboksihemoglobina v telesu zelo pomembna. Za to se pregleda človeška venska kri.

Interpretacija rezultatov

Preveri se odstotek patološke frakcije glede na skupni hemoglobin pri bolniku. Zdravnik se ukvarja z dekodiranjem, saj lahko oceni bolnikove simptome in jih primerja s prejetimi podatki.

Možne možnosti testiranja:

· Norma je do 2,3% karboksihemoglobina.

· V telesu kadilcev je opaziti do 4,2% beljakovin. Te vrednote zahtevajo opustitev slabe navade.

· 8% ali več - močno pozitiven rezultat. Kaže na verjetno zastrupitev ali dolgo zgodovino kajenja.

S starostjo se raven beljakovin poveča, zato so pri starejših možni lažno pozitivni testi.

Indikacije

• Sum na zastrupitev z ogljikovim monoksidom.
• Dolgotrajno kajenje veliko število cigarete.

Pravila priprave

SPLOŠNA PRAVILA ZA PRIPRAVO NA KRVI

Za večino študij je priporočljivo darovati kri zjutraj na prazen želodec, kar je še posebej pomembno, če se izvaja dinamično spremljanje določenega indikatorja. Vnos hrane lahko neposredno vpliva tako na koncentracijo proučevanih parametrov kot fizične lastnosti vzorec (povečana motnost - lipemija - po zaužitju mastne hrane). Če je potrebno, lahko darujete kri čez dan po 2-4 urah posta. Priporočljivo je, da tik pred odvzemom krvi popijete 1-2 kozarca negazirane vode, kar bo pomagalo zbrati količino krvi, potrebno za študijo, zmanjšati viskoznost krvi in ​​zmanjšati verjetnost strdkov v epruveti. Treba je izključiti fizično in čustveno preobremenitev, kajenje 30 minut pred študijo. Krv za raziskave se vzame iz vene.

Hemoglobin (Hb)

- krvni pigment, katerega vloga je prenašanje kisika do organov in tkiv. Zunaj eritrocitov (v krvni plazmi) hemoglobin praktično ni zaznan.

Kemično hemoglobin spada v skupino kromoproteinov. Njegovo prostetično skupino, ki vključuje železo, imenujemo hem, beljakovinsko komponento pa globin. Molekula hemoglobina vsebuje 4 heme in en globin. Hem je metaloporfirin, kompleks železa s protoporfirinom. Protoporfirin temelji na štirih pirolnih obročih, ki so povezani preko metilnih mostov (CH), da tvorijo porfirinski obroč. Hem je enak za vse vrste človeškega hemoglobina.

v krožečih eritrocitih hemoglobin je v stanju neprekinjene reverzibilne reakcije bodisi tako, da veže molekulo kisika (v pljučnih kapilarah) ali pa jo oddaja (v kapilarah tkiva).

Ko je kri popolnoma nasičena s kisikom, 1 g hemoglobina veže 1,34-1,36 ml kisika. Pri visoki vsebnosti kisika v okolju (v pljučih) zmanjšan hemoglobin zlahka in hitro preide v oksihemoglobin, pri nizkih koncentracijah kisika v okolju (v tkivih, kjer se kisik izkorišča) pa oksihemoglobin zlahka odcepi kisik od sebe. V primeru poslabšanja pogojev krvne arterilizacije zaradi kršitve difuzije kisika skozi alveolarno membrano ali povečanja hitrosti krvnega pretoka v pljučnem obtoku, pa tudi s povečano porabo kisika v tkivih, se vsebnost oksihemoglobina v krvi se zmanjša, količina reduciranega hemoglobina pa se ustrezno poveča. Običajno je vsebnost oksihemoglobina v arterijski krvi 95-96% celotne količine hemoglobina. V venski krvi se ta vrednost zniža na 60 %.

karboksihemoglobin (HbCO)

- oksikarbonski hemoglobin - disociira nekaj stokrat počasneje kot oksihemoglobin, zato že majhna koncentracija (0,07%) ogljikovega monoksida (CO) v zraku veže okoli 50% v telesu prisotnega hemoglobina in mu odvzame sposobnost prenašanja kisik, je smrtonosen.

izobraževanje karboksihemoglobin se začne na periferiji eritrocitov, ki so v stiku s CO v pljučnih kapilarah. Med naslednjim krvnim obtokom ni prerazporeditve CO med eritrociti. Z naraščanjem koncentracije CO v zraku se tvorba karboksihemoglobina širi od periferije eritrocitov do njihovega središča. Vsak gram globina je sposoben vezati 1,33-1,34 ml O2 ali CO. Ta vrednost se imenuje Huefnerjeva konstanta. Vendar pa je afiniteta za CO 200-290-krat večja kot za O2-

Ravnotežna konstanta za to reakcijo je:

V zvezi s tem se tudi pri nizki vsebnosti CO v vdihanem zraku ustvari konkurenčno razmerje med temi plini pri zajemanju hemoglobina s pomembno prednostjo CO.

Določanje vsebnosti karboksihemoglobina

(po L.E. Gornu). Metoda temelji na fotometričnem določanju razlike v absorpciji svetlobe raztopin oksihemoglobina in karboksihemoglobina po njihovi denaturaciji z alkalijami.

Oprema in reagenti. Univerzalni fotometer FM ali horizontalni fotometer; 0,04% raztopina amoniaka; 0,2 n. raztopina hidratov natrijevega ali kalijevega oksida (kavstična pepelika ali natrijev hidroksid).

Metodologija. 4,9 in 5,9 ml 0,04% raztopine amoniaka vlijemo v 2 epruveti, nato pa v vsako dodamo 0,1 ml krvi. 5 ml 0,2 n. raztopino alkalije hitro premešamo z dvojnim obračanjem in fotometriramo vzorec 1 minuto po vnosu alkalije (50-70 s, ne več!) s svetlobnim filtrom št. 5 (M-55 ali M-52, efektivna valovna dolžina prepuščene svetlobe). 550 ali 520 nm). Vsebino druge epruvete, v kateri določamo skupno količino hemoglobina, neposredno fotometriramo s svetlobnim filtrom št. 5 (M-50, 496 nm). Fotometrija se izvaja v skladu s splošno sprejetimi pravili v 10 mm kivetah z destilirano vodo. Pri uporabi svetlobnega filtra št. 5 (M-55) se vsebnost karboksihemoglobina izračuna po formuli:

kjer je E ekstinkcija.

Če ima filter št. 5 oznako M-52 in ne M-55, se koeficient 132 nadomesti s 123.

Norma in ocena rezultatov študije karboksihemoglobina

V krvi oseb, ki med proizvodnjo ne pridejo v stik z ogljikovim monoksidom, je karboksihemoglobin praviloma prisoten v določeni količini, kar je posledica skoraj stalnega onesnaženja ozračja s produkti nepopolnega zgorevanja vseh vrst goriva. Po mnenju različnih avtorjev kri mestnih prebivalcev, ki niso povezani z izpostavljenostjo ogljikovemu monoksidu, vsebuje do 15% karboksihemoglobina. Njegova povprečna koncentracija po različnih podatkih niha od 2-4 do 6-8%. Kajenje povzroči povečanje te vrednosti za 2-3%. Vir tvorbe karboksihemoglobina ni le eksogeni ogljikov monoksid, temveč tudi do neke mere ogljikov monoksid, ki nastane v telesu kot posledica nepopolne oksidacije nekaterih presnovnih produktov, zlasti hemoglobina. Ker pri prenosu ponesrečenca v čisto atmosfero, zlasti ob vdihavanju kisika, pride do disociacije karboksihemoglobina razmeroma hitro (vsebnost karboksihemoglobina se v prvi uri prepolovi), so rezultati laboratorijske preiskave krvi, odvzete za analizo, čez nekaj časa. po prvi pomoči lahko dajejo napačen vtis, da imajo prvotno največjo koncentracijo karboksihemoglobina in s tem izkrivljajo predstavo o resnosti klinične slike zastrupitve. To je utemeljitev potrebe po zmanjšanju intervalov med odstranitvijo žrtve iz zastrupljenega ozračja in odvzemom krvi za analizo. Pri kronični zastrupitvi z ogljikovim monoksidom se disociacija karboksihemoglobina v krvi znatno upočasni.