Kiselo-bazno stanje. Klinički značaj i savremeni metodološki aspekti određivanja nivoa karboksi- i methemoglobina u krvi

Određivanje karboksihemoglobina u krvi je vrijedan pokazatelj koji pojašnjava dijagnozu i utvrđuje racionalna terapija. Dakle, u slučajevima kada nakon određenog vremena u krvi žrtve dođe do ravnoteže između stvaranja i uklanjanja ugljičnog monoksida, terapija kisikom može izgubiti svoj značaj.

Kvalitativna reakcija na prisustvo karboksihemoglobina u krvi:

1. Krv u količini od 0,01 ml uzima se iz prsta ubodom igle i razblažuje destilovanom vodom 100 puta (do 1 ml). Epruveta s razrijeđenom krvlju postavlja se ispred spektroskopa i, pod prirodnim ili umjetnim osvjetljenjem, uočavaju se dvije apsorpcijske trake u žuto-zelenoj (A. = 579-564 nm) i zelenoj (k = 548 - 530). nm) dijelovi spektra, koji se podudaraju sa spektrom oksihemoglobina (A = 598-577 i 556-536 nm).

Da bi se razlikovalo, provodi se kvalitativna reakcija: u epruvetu se dodaje tvar koja brzo reagira s kisikom i pretvara oksihemoglobin krvi u reducirani hemoglobin (1-2 kapi amonijevog sulfida NH4S ili 4-5 mg natrijevog ditionita Na2S204). Epruveta se protrese i ponovo stavi ispred spektroskopa.

U nedostatku karboksihemoglobina, vidljiva je samo jedna široka apsorpciona traka, koja odgovara redukovanom hemoglobinu i nalazi se u žuto-zelenom dijelu spektra (A = 596-543 nm). U prisustvu karboksihemoglobina nema promjena u spektru, a ponovljenom spektroskopijom se nastavljaju određivati ​​dvije apsorpcijske trake - u žuto-zelenom i zelenom dijelu spektra. Osetljivost spektroskopskog uzorka odgovara 15 - 20% karboksihemoglobina u odnosu na puna krv. Precizniji rezultati se dobijaju gasometrijskim i posebno spektroskopskim metodama.

2. Spektroskopska metoda za određivanje karboksihemoglobina zasniva se na sposobnosti karboksihemoglobina i redukovanog hemoglobina da različitim stepenima apsorbuju svetlosne zrake na talasnoj dužini od 534-563 nm. Izračunava se razlika između apsorpcije svjetlosti karboksihemoglobina i apsorpcije svjetlosti reduciranog hemoglobina, koja se dobija dodavanjem natrijum ditionita.

Iz prsta se uzima 0,1 ml krvi za analizu. Krv se usisava mikropipetom, prethodno ispranom rastvorom natrijum citrata; stavite u mjernu epruvetu kapaciteta 10 ml i dovedite volumen do oznake od 0,005 N. rastvor natrijum hidroksida. U 5 ml bistrog rastvora dodajte redukciono sredstvo - 8 mg natrijum ditionita - i izvršite spektrometrijsko merenje optičke gustine rastvora na talasnim dužinama od 534 i 536 nm. Sadržaj COHb u krvi izračunava se po formuli:

gdje je E1 - optička gustina na talasnoj dužini od 534 nm; E2 - isto na talasnoj dužini od 536 nm.

Ne postoji konsenzus o fiziološki prihvatljivim nivoima karboksihemoglobina u krvi. Dakle, u urbanim stanovnicima sadržaj karboksihemoglobina u krvi može doseći 4 - 7%.

Treba napomenuti da kod pacijenata sa hroničnom intoksikacijom ugljen monoksidom nivo karboksihemoglobina u krvi obično odgovara normalnim vrednostima. Određivanje karboksihemoglobina u njima može nastati kod kršenja funkcije pluća i srca s odstupanjima u razmjeni ugljične kiseline, kao i kod stritremije, dijabetesa, silikoze i srčanih bolesti.

3. U slučajevima kada pri ruci nema spektroskopa, može se koristiti približna, tehnički jednostavna metoda za određivanje karboksihemoglobina pomoću bakar sulfata. Kap krvi žrtve nanese se na komad bijelog papira (staklo, fajansa, porculan) uz sumnju na trovanje ugljičnim monoksidom. Pored se stavlja kap krvi zdrava osoba. U svaku kap krvi dodaje se kap 2% rastvora bakar sulfata i meša sa drvenim štapićem (šibicama). Nakon 30 s - 1 min u krvi koja sadrži karboksihemoglobin nastaje masna masa sivkasto-smeđe ili čokoladne boje. Nakon nekog vremena postaje crveno-braon boje. Pri vrlo visokom nivou SONY-a u krvi (blizu 100%), masa nalik na mast ima grimizno-crvenu boju, koja pri stajanju potamni, poprima smeđi ton. Do trovanja ugljičnim monoksidom dolazi povećanjem sadržaja hemoglobina i crvenih krvnih stanica u perifernoj krvi.

Određivanje methemoglobina. Kod intoksikacije anilinom, nitro- i dinitrobenzenom, Bertholletova so i drugih spojeva sposobnih da oksidiraju željezo iz hemoglobina, do stvaranja methemoglobina dolazi s prijelazom željeza iz njegovog dvovalentnog u trovalentno jedinjenje.

Postoji mišljenje da u krvi zdrave osobe i životinja uvijek postoji određena (fiziološki prihvatljiva) količina methemoglobina. U tijelu toplokrvnih životinja neprestano se odvijaju procesi stvaranja i redukcije methemoglobina u hemoglobin oksid. AT normalnim uslovima ovi procesi su dobro izbalansirani. Nivo methemoglobina kod zdrave osobe ne prelazi 1% u odnosu na ukupan hemoglobin u krvi:

1. Kvalitativna reakcija na methemoglobin se provodi spektralnom analizom. Methemoglobin daje karakterističan spektar sa širokom apsorpcionom trakom u crvenom dijelu spektra (k = 630 nm) i dvije trake u narandžastom i žutom dijelu spektra.

2. Velika važnost za procjenu ozbiljnosti intoksikacije potrebno je kvantitativno određivanje methemoglobina. Proizvodi se na spektrofotometru. U ovom slučaju, methemoglobin se nakon njegovog preliminarnog određivanja apsorpcionom trakom svjetlosti na talasnoj dužini od 633 nm pretvara u cijanmethemoglobin, koji uopće ne daje apsorpcionu traku u ovoj tački spektra. Metoda se zasniva na fotometriji methemoglobina i cijanmethemoglobina u crvenom dijelu spektra na talasnoj dužini od 630 nm, u kojoj imaju različite apsorpcione spektre. Promjena intenziteta apsorpcije svjetlosti nakon dodavanja kalijevog cijanida (za pretvaranje MtHb u cijanmethemoglobin) je direktno proporcionalna koncentraciji MtHb.

Za analizu se uzimaju dva uzorka krvi. Hemoglobin jednog uzorka se pretvara u methemoglobin dodavanjem kapi zasićenog rastvora KjFe (CN)6. U drugom uzorku, hemoglobin je oksidiran zbog kisika otopljenog u mediju. Zatim se utvrđuje stepen apsorpcije svetlosti talasne dužine od 619 nm u oba uzorka, a zatim se izračunava razlika u apsorpciji svetlosti između methemoglobina i oksihemoglobina. U prisustvu poznatih zajedničkih vrijednosti razlike za normalna krv njegovo smanjenje se smatra gubitkom dijela hemoglobina zbog njegovog prijelaza u methemoglobin.

3. kvantitacija methemoglobin se takođe može meriti pomoću ručnog spektroskopa. Krv razrijeđena 5 puta destilovanom vodom (0,2 ml krvi i 0,8 ml vode) stavlja se u cilindar i gleda kroz ručni spektroskop. Ako postoji apsorpciona traka u crvenom dijelu spektra, otopina se razrjeđuje vodom sve dok traka ne postane jedva vidljiva. Zabilježen je ukupni volumen krvne soli K3Fe(CN)6, što uzrokuje transfer preostalog oksihemoglobina u methemoglobin. U crvenom dijelu spektra ponovo se pojavljuje apsorpciona traka. Rastvor se ponovo, kao i prvi put, razblaži vodom i ponovo se dobije vrednost ukupne zapremine (Vi). Obračun se vrši prema formuli:

gdje je V prvi volumen u mililitrima; Vx je drugi volumen u mililitrima.

Jedna od obećavajućih metoda laboratorijske dijagnostike je plinsko-tečna kromatografija. Od ostalih se razlikuje prvenstveno po visokoj specifičnosti i osjetljivosti, kao i brzini analize (5-15 minuta), maloj količini materijala koji se proučava, uporednoj jednostavnosti istraživanja i njihovoj dovoljnoj objektivnosti. Koristeći ovu metodu moguće je kvantificirati i kvalitativno odrediti takve toksične supstance, kao što su dihloretan, ugljen-tetrahlorid, hloroform, aceton, etil i metil alkoholi, organofosfatni pesticidi.

Hitna pomoć za profesionalne intoksikacije, Artamonova V.G., 1981

- pigment krvi čija je uloga transport kiseonika do organa i tkiva. Izvan eritrocita (u krvnoj plazmi), hemoglobin se praktički ne otkriva.

Hemijski hemoglobin pripada grupi hromoproteina. Njegova protetička grupa, koja uključuje željezo, naziva se hem, a proteinska komponenta se naziva globin. Molekul hemoglobina sadrži 4 hema i jedan globin. Hem je metaloporfirin, kompleks gvožđa sa protoporfirinom. Protoporfirin se zasniva na četiri pirolna prstena povezana preko metilnih mostova (CH) kako bi se formirao porfirinski prsten. Hem je identičan za sve vrste ljudskog hemoglobina.

u cirkulirajućim eritrocitima hemoglobin je u stanju kontinuirane reverzibilne reakcije, bilo pričvršćivanjem molekule kisika (u plućne kapilare), ili odavanjem (u kapilarama tkiva).

Kada je krv potpuno zasićena kiseonikom, 1 g hemoglobina veže 1,34-1,36 ml kiseonika. Kod visokog sadržaja kiseonika u okruženje(u plućima) smanjeni hemoglobin lako i brzo prelazi u oksihemoglobin, dok pri niskim koncentracijama kiseonika u okolini (u tkivima u kojima se kiseonik koristi) oksihemoglobin lako odvaja kiseonik od sebe. U slučaju pogoršanja uslova arterijalizacije krvi zbog narušavanja difuzije kiseonika kroz alveolarnu membranu ili povećanja brzine protoka krvi u plućnoj cirkulaciji, kao i kod povećane potrošnje kiseonika u tkivima, sadržaj oksihemoglobina u krv se smanjuje, a količina smanjenog hemoglobina u skladu s tim se povećava. Normalno u arterijske krvi sadržaj oksihemoglobina je 95-96% ukupne količine hemoglobina. AT venska krv ova vrijednost je smanjena na 60%.

karboksihemoglobin (HbCO)

- oksiugljični hemoglobin - disocira nekoliko stotina puta sporije od oksihemoglobina, pa čak i mala koncentracija (0,07%) u zraku ugljen monoksid(CO), koji vezuje oko 50% hemoglobina prisutnog u telu i lišava ga njegove sposobnosti da prenosi kiseonik, je fatalan.

Obrazovanje karboksihemoglobin počinje periferijom eritrocita, koji su u kontaktu sa CO u plućnim kapilarama. Tokom naknadne cirkulacije krvi, nema preraspodjele CO između eritrocita. Kako se koncentracija CO u zraku povećava, formiranje karboksihemoglobina se širi od periferije eritrocita do njihovog centra. Svaki gram globina je sposoban da veže 1,33-1,34 ml O2 ili CO. Ova vrijednost se zove Huefnerova konstanta. Međutim, afinitet za CO je 200-290 puta veći nego za O2-

Konstanta ravnoteže za ovu reakciju je:

U tom smislu, čak i uz nizak sadržaj CO u udahnutom zraku, između ovih plinova se stvara konkurentski odnos u hvatanju hemoglobina sa značajnom prednošću za CO.

Određivanje sadržaja karboksihemoglobina

(prema L.E. Gornu). Metoda se zasniva na fotometrijskom određivanju razlike u apsorpciji svjetlosti otopina oksihemoglobina i karboksihemoglobina nakon njihove denaturacije alkalijom.

Oprema i reagensi. Univerzalni fotometar FM ili horizontalni fotometar; 0,04% rastvor amonijaka; 0,2 n. otopina hidrata natrijuma ili kalijevog oksida (kaustična potaša ili natrijev hidroksid).

Metodologija. U 2 epruvete sipa se 4,9 i 5,9 ml 0,04% rastvora amonijaka, nakon čega se u svaku doda po 0,1 ml krvi. 5 ml 0,2 n. alkalni rastvor, brzo promešati dvostrukom inverzijom i fotometrom uzorak 1 min nakon uvođenja alkalije (50-70 s, ne više!) sa svetlosnim filterom br. 5 (M-55 ili M-52, efektivna talasna dužina propuštene svetlosti 550 ili 520 nm). Sadržaj druge epruvete, u kojoj se utvrđuje ukupna količina hemoglobina, direktno se fotometrira svetlosnim filterom br. 5 (M-50, 496 nm). Fotometrija se provodi prema općeprihvaćenim pravilima u kivetama od 10 mm korištenjem destilovane vode. Kada se koristi svetlosni filter br. 5 (M-55), sadržaj karboksihemoglobina se izračunava po formuli:

gdje je E izumiranje.

Ako filter br. 5 ima marku M-52, a ne M-55, tada se koeficijent 132 zamjenjuje sa 123.

Norma i ocjena rezultata istraživanja karboksihemoglobina

U krvi osoba koje tokom proizvodnje ne dolaze u kontakt sa ugljičnim monoksidom, karboksihemoglobin je po pravilu prisutan u određenoj količini, što je posljedica gotovo stalnog zagađenja atmosfere produktima nepotpunog sagorijevanja svih vrsta gorivo. Prema različitim autorima, krv urbanih stanovnika koji nisu povezani s izlaganjem ugljičnom monoksidu sadrži do 15% karboksihemoglobina. Njegova prosječna koncentracija varira, prema različitim podacima, od 2-4 do 6-8%. Pušenje dovodi do povećanja ove vrijednosti za 2-3%. Izvor stvaranja karboksihemoglobina nije samo egzogeni ugljični monoksid, već u određenoj mjeri i ugljični monoksid, koji nastaje u tijelu kao rezultat nepotpune oksidacije nekih metaboličkih proizvoda, posebno hemoglobina. Budući da kada se žrtva prebaci u čistu atmosferu, posebno kada se udahne kiseonik, dolazi do relativno brzog rasta karboksihemoglobina (sadržaj karboksihemoglobina se prepolovi u prvom satu), rezultati laboratorijska istraživanja krv uzeta za analizu neko vrijeme nakon prve pomoći može dati lažan utisak o početnoj maksimalnoj koncentraciji karboksihemoglobina koja se dogodila i time iskriviti ideju o ozbiljnosti kliničku sliku intoksikacija. Ovo je opravdanje potrebe da se minimiziraju intervali između uklanjanja žrtve iz zatrovane atmosfere i uzimanja krvi za analizu. At hronična intoksikacija ugljen monoksid značajno usporava disocijaciju karboksihemoglobina u krvi.

Klinički test krvi - jednostavan i informativna studija. Dobro je jer se krv uzima iz prsta, pošto je potrebna njena minimalna količina, nije potrebna posebna priprema: jedini uslov je uzimanje analize na prazan želudac. Tehnika vam omogućava da procenite hemogram, odnosno broj i odnos ćelija, kao i niz drugih ključni indikatori, među kojima ne posljednje mjesto zauzima test krvi na hemoglobin. Šta određuje njegovu koncentraciju u krvi? Koliko hemoglobina treba da bude normalno? Šta još trebate znati o ovom indikatoru?

Glavna funkcija hemoglobina je transport. Veže se sa kiseonikom koji je iz plućnih alveola ušao u krv, prenosi ga i potom daje tkivima. Ali uloga hemoglobina se tu ne završava: on uzima ugljični dioksid i vraća ga u pluća, odakle se uklanja u okoliš. Dakle, ovaj protein je od velike važnosti za disanje: bez njega ćelije ljudsko tijelo ne postoji način da se u potpunosti izvrši metabolizam.

Postoji nekoliko tipova normalnog hemoglobina:

• HbA1,
• HbA2,

Od njih, A1 i A2 su tipični za odrasle (štaviše, HbA1 je 96-98% ukupnog broja), a hemoglobin F je za novorođenčad. U prvim danima života ova brojka je do 60-80%, a do četvrtog ili petog mjeseca života smanjuje se na 10%. U ljudskoj krvi normalan hemoglobin je prisutan u tri hemijski oblici: oksihemoglobin (spoj sa kiseonikom, oznaka - HbO 2), karbhemoglobin (spoj sa ugljendioksidom, oznaka - HHbCO 2), i redukovani hemoglobin (označen kao HHb). Međutim, ovaj protein je takođe sposoban da formira patološka jedinjenja kao što su karboksihemoglobin i methemoglobin.

Karboksihemoglobin je spoj sa ugljičnim monoksidom. Nije u stanju da prenosi kiseonik i ugljični dioksid, što navodi na zaključak da kada je prisutan u krvi, tkiva počinju da doživljavaju najjače gladovanje kiseonikom. Zato je u požaru mnogo veća vjerovatnoća da će ljudi umrijeti od gušenja nego od samog požara.

Methemoglobin nastaje tokom oksidacije hemoglobina, gvožđe u methemoglobinu je trovalentno (normalno je dvovalentno). Takav spoj snažno veže kiseonik i krajnje nevoljko ga daje tkivima. Zbog toga, prilikom stvaranja methemoglobina, tkiva doživljavaju i tešku hipoksiju. Methemoglobin se pojavljuje u krvi kada se otrova oksidirajućim agensima (kalijev permanganat, anilin, itd.), nitratima i nitritima.

Sam po sebi, krvni test na hemoglobin ne uključuje određivanje prisustva karboksihemoglobina i methemoglobina u krvi. To je nepotrebno. Slična studija se provodi ako postoje simptomi trovanja: tada se krv uzima u toksikološki laboratorij, gdje se posebnim tehnikama otkriva prisutnost methemoglobina ili karboksihemoglobina.

Metoda provođenja krvnog testa na hemoglobin

Za merenje nije potrebno vađenje krvi iz vene, ona se uzima iz prsta. To je točno, jer je takva ograda manje traumatična i uključuje uklanjanje minimalna količina krvi, što je sasvim dovoljno za određivanje proučavanog pokazatelja. Analiza ne zahtijeva posebnu pripremu: nisu potrebne dijete ili dodatne manipulacije. Jedino ograničenje je da se krv uzima na prazan želudac. Opet, činjenica da se uzima iz prsta pomaže da se izbjegne gladna sinkopa koja se ponekad javlja kada se krv uzima iz vene na prazan želudac.

Trenutno postoji nekoliko grupa metoda koje omogućavaju da se određivanje učini što preciznijim. Sali metoda je donedavno bila popularna, ali nije dovoljno pouzdana i ne ispunjava savremene zahtjeve. Stoga se umjesto njega predlažu kolorimetrijska i gasometrijska metoda, kao i metoda mjerenja sadržaja željeza u molekulu hemoglobina. Tako je: vrijeme ide naprijed, i moderne tehnologije postepeno zamijeniti starije.

Osim klasičnog uzimanja krvi iz prsta za mjerenje hemoglobina u laboratoriji, postoji i ekspresna tehnika. Da biste to učinili, postoji poseban uređaj - hemoglobinometar. Princip rada uređaja je kolorimetrijski. Krv se takođe uzima iz prsta: potrebno je vrlo malo da se izmeri: oko 10 mikrolitara.

Procedura traje vrlo malo vremena: uređaju traje manje od minute od trenutka probijanja prsta do rezultata. Osim toga, moderni uređaji imaju ugrađen sistem koji provjerava koliko dobro svi elementi rade.

Takav uređaj je prilično skup, pa ako trebate donirati krv za hemoglobin nekoliko puta godišnje, onda ga ne biste trebali kupiti: lakše je besplatno uzeti analizu u laboratoriju. Međutim, za one koji su prisiljeni stalno pratiti koncentraciju hemoglobina, ovaj uređaj mora biti dostupan. U ovom slučaju mjerenja se mogu vršiti nekoliko puta dnevno, što je jednostavno neophodno za neke bolesti krvi.

Naravno, ovaj aparat se ne koristi tako često kao recimo uređaji za određivanje nivoa šećera i holesterola, što se povezuje, s jedne strane, sa nedostatkom svesti javnosti, as druge strane, ne sa takvim visoka učestalost ovakvih patologija. Naravno, korištenje ovakvih uređaja ne eliminira u potpunosti potrebu za uzimanjem analize u laboratoriju, gdje se dobijaju precizniji rezultati.

Interpretacija rezultata studije

Kod žena je 115-145g/l, a kod muškaraca 130-160g/l. Dešifriranje rezultata analize uključuje ne samo poređenje dobijenih brojeva sa ciljnim pokazateljima, već i njihovu procjenu u kombinaciji s određivanjem broja crvenih krvnih zrnaca. Za to postoji poseban indeks, koji se naziva indikator boje koji odražava koncentraciju hemoglobina u eritrocitu. Obično se nalazi u rasponu od 0,85 do 1,05.

Nizak hemoglobin je znak anemije. Ako u isto vreme indeks boja je također smanjena u odnosu na normu, tada je takva anemija hipohromna. Postoji niz razloga koji doprinose smanjenju hemoglobina, ali se svi mogu podijeliti na dva velike grupe: kršenje sinteze i povećano propadanje. Stvaranje hemoglobina može biti poremećeno zbog nedostatka njegovih glavnih komponenti - gvožđa i aminokiselina, što je povezano sa pothranjenost, bolesti gastrointestinalnog trakta, produžena groznica itd. Ako su sve komponente prisutne u dovoljnim količinama, može doći do kršenja sinteze genetski razlozi ili, na primjer, trovanje olovom.

Povećana razgradnja hemoglobina se opaža kod gubitka krvi (ovo može biti jedan od znakova skrivenog krvarenja), hemolize crvenih krvnih zrnaca (kod malarije, trovanja hemolitičkim otrovima, autoimune lezije itd.), nasljedni poremećaji. Nažalost, dekodiranje kliničkog testa krvi ne daje ideju o razlozima koji su doveli do smanjenja razine hemoglobina. To će zahtijevati dodatna istraživanja.

Povećanje hemoglobina može biti posljedica povećanja proizvodnje crvenih krvnih zrnaca zbog hipoksije, povećanja nivoa glukokortikoida ili tumorski proces. Drugi razlog je zgrušavanje krvi, što može biti uzrokovano stresom, dehidracijom i određenim bolestima.

Postoje i posebni testovi za određivanje procenta pojedinačnih frakcija hemoglobina, identifikaciju patoloških oblika(methemoglobin, karboksihemoglobin). Svaku od ovih studija propisuje ljekar prema određenim indikacijama. Ako nema abnormalnosti hemoglobina u klinička analiza krvi (ili nema znakova trovanja u slučaju karboksi- i methemoglobina), tada, po pravilu, nema osnova za dodatne pretrage.

Hemoglobin je vitalan za osobu. Bez toga počinje gladovanje tkiva kiseonikom, što može dovesti do najviše ozbiljne posledice, uključujući smrt (ovo nije neuobičajeno za trovanja povezana s stvaranjem karboksihemoglobina i methemoglobina). Dešifriranje krvnog testa za hemoglobin može pokazati postojeća odstupanja od norme, koja se moraju eliminirati. Velika vrijednost nema borbu sa samim simptomom, već identifikaciju uzroka i kompetentan tretman.

Opis

Supstance koje se udišu sa vazduhom mogu ozbiljno naštetiti osobi. Ako velika količina ugljičnog monoksida uđe u pluća, onda se veže za hemoglobin i nepovratno ga blokira. Takav protein, za razliku od normalnog, nije u stanju da obavlja svoju funkciju.

Karboksihemoglobin ne prenosi kiseonik iz pluća do organa i tkiva. Kao rezultat, razvija se hipoksija tijela. To se manifestuje vrtoglavicom, mučninom i povraćanjem. Ako je sadržaj patološkog globulina u krvi mali, on se sam razgrađuje i ne šteti pacijentu. Kada se norme neke supstance prekorače nekoliko puta, onda se može povući samo medicinskim putem.

Trovanje ugljičnim monoksidom se događa ne samo u požarima i drugim hitnim slučajevima. Njegova količina u udahnutom vazduhu premašuje sve moguće norme dugogodišnji pušači. Istovremeno, simptomi intoksikacije mogu biti pogrešno protumačeni od strane liječnika i pacijenta, oni su nespecifični, podsjećaju na respiratornu bolest.

U ovim uslovima, analiza sadržaja karboksihemoglobina u organizmu postaje veoma važna. Za to se ispituje ljudska venska krv.

Interpretacija rezultata

Provjerava se postotak patološke frakcije u odnosu na ukupan hemoglobin kod pacijenta. Liječnik se bavi dekodiranjem, jer može procijeniti pacijentove simptome i uporediti ih s primljenim podacima.

Moguće opcije testiranja:

· Norma je do 2,3% karboksihemoglobina.

· Do 4,2% proteina nalazi se u tijelu pušača. Ove vrijednosti zahtijevaju napuštanje loše navike.

· 8% ili više - oštro pozitivan rezultat. Ukazuje na moguće trovanje ili dugu istoriju pušenja.

S godinama se povećava nivo proteina, pa su lažno pozitivni testovi mogući kod starijih osoba.

Indikacije

• Sumnja na intoksikaciju ugljičnim monoksidom.
• Dugotrajno pušenje veliki broj cigarete.

Pravila pripreme

OPŠTA PRAVILA ZA PRIPREMU ZA KRVI

Za većinu studija preporučuje se davanje krvi ujutro na prazan želudac, što je posebno važno ako se provodi dinamičko praćenje određenog pokazatelja. Unos hrane može direktno uticati i na koncentraciju proučavanih parametara i fizička svojstva uzorak (povećana zamućenost - lipemija - nakon konzumiranja masne hrane). Ako je potrebno, krv možete dati u toku dana nakon 2-4 sata gladovanja. Preporuča se popiti 1-2 čaše negazirane vode neposredno prije uzimanja krvi, to će pomoći da se prikupi količina krvi koja je potrebna za ispitivanje, smanji viskoznost krvi i smanji vjerojatnost nastanka ugrušaka u epruveti. Potrebno je isključiti fizičko i emocionalno prenaprezanje, pušenje 30 minuta prije studije. Krv za istraživanje uzima se iz vene.

hemoglobin (Hb)

- pigment krvi čija je uloga transport kiseonika do organa i tkiva. Izvan eritrocita (u krvnoj plazmi), hemoglobin se praktički ne otkriva.

Hemijski hemoglobin pripada grupi hromoproteina. Njegova protetička grupa, koja uključuje željezo, naziva se hem, a proteinska komponenta se naziva globin. Molekul hemoglobina sadrži 4 hema i jedan globin. Hem je metaloporfirin, kompleks gvožđa sa protoporfirinom. Protoporfirin se zasniva na četiri pirolna prstena povezana preko metilnih mostova (CH) kako bi se formirao porfirinski prsten. Hem je identičan za sve vrste ljudskog hemoglobina.

u cirkulirajućim eritrocitima hemoglobin je u stanju kontinuirane reverzibilne reakcije, bilo pričvršćivanjem molekule kisika (u plućne kapilare), ili odavanjem (u kapilarama tkiva).

Kada je krv potpuno zasićena kiseonikom, 1 g hemoglobina veže 1,34-1,36 ml kiseonika. Pri velikom sadržaju kiseonika u okolini (u plućima), redukovani hemoglobin lako i brzo prelazi u oksihemoglobin, dok pri niskim koncentracijama kiseonika u okolini (u tkivima u kojima se kiseonik koristi) oksihemoglobin lako odvaja kiseonik od sebe. U slučaju pogoršanja uslova arterijalizacije krvi zbog narušavanja difuzije kiseonika kroz alveolarnu membranu ili povećanja brzine protoka krvi u plućnoj cirkulaciji, kao i kod povećane potrošnje kiseonika u tkivima, sadržaj oksihemoglobina u krv se smanjuje, a količina smanjenog hemoglobina u skladu s tim se povećava. Normalno, sadržaj oksihemoglobina u arterijskoj krvi iznosi 95-96% ukupne količine hemoglobina. U venskoj krvi ova vrijednost je smanjena na 60%.

karboksihemoglobin (HbCO)

- oksiugljični hemoglobin - disocira nekoliko stotina puta sporije od oksihemoglobina, pa čak i mala koncentracija (0,07%) ugljičnog monoksida (CO) u zraku vezuje oko 50% hemoglobina prisutnog u tijelu i lišava ga njegove sposobnosti prijenosa kiseonik, smrtonosan.

Obrazovanje karboksihemoglobin počinje periferijom eritrocita, koji su u kontaktu sa CO u plućnim kapilarama. Tokom naknadne cirkulacije krvi, nema preraspodjele CO između eritrocita. Kako se koncentracija CO u zraku povećava, formiranje karboksihemoglobina se širi od periferije eritrocita do njihovog centra. Svaki gram globina je sposoban da veže 1,33-1,34 ml O2 ili CO. Ova vrijednost se zove Huefnerova konstanta. Međutim, afinitet za CO je 200-290 puta veći nego za O2-

Konstanta ravnoteže za ovu reakciju je:

U tom smislu, čak i uz nizak sadržaj CO u udahnutom zraku, između ovih plinova se stvara konkurentski odnos u hvatanju hemoglobina sa značajnom prednošću za CO.

Određivanje sadržaja karboksihemoglobina

(prema L.E. Gornu). Metoda se zasniva na fotometrijskom određivanju razlike u apsorpciji svjetlosti otopina oksihemoglobina i karboksihemoglobina nakon njihove denaturacije alkalijom.

Oprema i reagensi. Univerzalni fotometar FM ili horizontalni fotometar; 0,04% rastvor amonijaka; 0,2 n. otopina hidrata natrijuma ili kalijevog oksida (kaustična potaša ili natrijev hidroksid).

Metodologija. U 2 epruvete sipa se 4,9 i 5,9 ml 0,04% rastvora amonijaka, nakon čega se u svaku doda po 0,1 ml krvi. 5 ml 0,2 n. alkalni rastvor, brzo promešati dvostrukom inverzijom i fotometrom uzorak 1 min nakon uvođenja alkalije (50-70 s, ne više!) sa svetlosnim filterom br. 5 (M-55 ili M-52, efektivna talasna dužina propuštene svetlosti 550 ili 520 nm). Sadržaj druge epruvete, u kojoj se utvrđuje ukupna količina hemoglobina, direktno se fotometrira svetlosnim filterom br. 5 (M-50, 496 nm). Fotometrija se provodi prema općeprihvaćenim pravilima u kivetama od 10 mm korištenjem destilovane vode. Kada se koristi svetlosni filter br. 5 (M-55), sadržaj karboksihemoglobina se izračunava po formuli:

gdje je E izumiranje.

Ako filter br. 5 ima marku M-52, a ne M-55, tada se koeficijent 132 zamjenjuje sa 123.

Norma i ocjena rezultata istraživanja karboksihemoglobina

U krvi osoba koje tokom proizvodnje ne dolaze u kontakt sa ugljičnim monoksidom, karboksihemoglobin je po pravilu prisutan u određenoj količini, što je posljedica gotovo stalnog zagađenja atmosfere produktima nepotpunog sagorijevanja svih vrsta gorivo. Prema različitim autorima, krv urbanih stanovnika koji nisu povezani s izlaganjem ugljičnom monoksidu sadrži do 15% karboksihemoglobina. Njegova prosječna koncentracija varira, prema različitim podacima, od 2-4 do 6-8%. Pušenje dovodi do povećanja ove vrijednosti za 2-3%. Izvor stvaranja karboksihemoglobina nije samo egzogeni ugljični monoksid, već u određenoj mjeri i ugljični monoksid, koji nastaje u tijelu kao rezultat nepotpune oksidacije nekih metaboličkih proizvoda, posebno hemoglobina. Budući da kada se žrtva prebaci u čistu atmosferu, posebno kada se udahne kiseonik, dolazi do relativno brzog rasta karboksihemoglobina (sadržaj karboksihemoglobina se prepolovi u prvom satu), rezultati laboratorijskog testa krvi uzete na analizu neko vreme nakon pružanja prve pomoći može dati lažan utisak da je postavljena početna maksimalna koncentracija karboksihemoglobina i time iskriviti ideju o težini kliničke slike intoksikacije. Ovo je opravdanje potrebe da se minimiziraju intervali između uklanjanja žrtve iz zatrovane atmosfere i uzimanja krvi za analizu. Kod kronične intoksikacije ugljičnim monoksidom, disocijacija karboksihemoglobina u krvi značajno se usporava.