Patogeninės korinebakterijos – F.K
Korinebakterijos yra gramteigiamos lazdelės formos mikroorganizmai, plačiai paplitę gamtoje ir gyvenantys žmogaus organizme. Dauguma šios genties atstovų nėra patogeniški žmonėms. Pavyzdžiui, kai kurios rūšys sukelia sunkias infekcines ligas.
Corynebacterium gentis susideda iš privalomų patogenų ir tipiškų oportunistinių infekcijų patogenų. Kiekvienas mikroorganizmų tipas turi specifinių biologinių savybių ir sukelia įvairias patologijas. Dažniausiai pažeidžiama oda ir vidaus organai. Įvedus nesterilius kateterius ir sumontavus infekuotus protezus, išsivysto bakteriemija.
Korinebakterijos – patogenai:
- Šlapimo takų infekcijos – uretritas, prostatitas, inkstų pažeidimas;
- Kvėpavimo takų ligos -,;
- Pūlingi-septiniai procesai - bakteriemija, septicemija, smegenų abscesas, osteomielitas, endokarditas, septinis artritas,
- Odos ligos – pseudomikozė;
- Su kateteriu susijusios ir žaizdų infekcijos.
Kai kurios korinebakterijos yra įvairių žmogaus kūno normocinozių atstovės. Jie gyvena ant odos viršutiniai skyriai kvėpavimo takai, vizualinis analizatorius, Urogenitalinis traktas. Taigi, C. striatum turi tropizmą oda, C. durum - į kvėpavimo organų kvėpavimo epitelį, C. glucuronoliticam - į epiteliocitus šlapimo takų vyrams. Daugelis rūšių išsiskiria iš objektų aplinką.
Atoksigeninės C. diphtheriae paprastai kolonizuoja odą ir ryklę, nesukeldamos ligos. Nepatogeniškos korinebakterijų rūšys priimtinu kiekiu yra storosios žarnos normocenozės dalis. Tačiau kartais šie mikrobai sukelia infekcijų ir net epidemijų protrūkius. Ši savybė atsiranda dėl to, kad šiuose mikroorganizmuose yra kitų virulentiškumo faktorių.
Visos korinebakterijos sąlyginai skirstomos į grupes:
- Mikroorganizmai, pavojingi šiltakraujams gyvūnams
- Mikrobai, kurie užkrečia augalus
- Sąlygiškai patogeniškos bakterijos, kurios nekelia žalos sveikatai.
Vaikai, pagyvenę žmonės ir žmonės, turintys imunodeficito ir daugelio organų patologijų, yra jautriausi infekcijai. Daugeliu atvejų corynebacterium spp rūšių identifikavimas sukelia didelių sunkumų dėl jų morfobiologinių savybių.
Korinebakterijų savybės
Korinebakterija difterija
Corynebacterium diphtheriae yra pavojingos žmonių ligos – difterijos – sukėlėjas. Šiuo metu patologija fiksuojama itin retai ir tik tiems asmenims, kurie greičiausiai nebuvo laiku paskiepyti.
Infekcija plinta oro lašeliniu būdu arba kontaktuojant bendraujant su sergančiais žmonėmis arba per užkrėstus daiktus. Maisto užteršimo atveju tampa aktualus mitybos būdas. Epidemiologine prasme didžiausią pavojų kelia sveikų bakterijų nešiotojai.
Priklausomai nuo pirminio infekcijos židinio vietos, įvairių formų ligų. Po 7-10 inkubacijos dienų pirmasis Klinikiniai požymiai. Patologinio židinio lokalizacijos vietoje išsivysto fibrininis uždegimas. Tai veda prie epiteliocitų ir kraujagyslių sunaikinimo. Palaipsniui susidariusiame eksudate yra daug fibrinogeno, kuris koaguliuoja ir formuoja apnašas ant gleivinės pilkai balta. Jis tvirtai prilimpa prie poodinio sluoksnio ir negali būti pašalintas. Kai bandote pašalinti apnašas, prasideda kraujavimas. Išskyrus vietiniai ženklai uždegimas dėl infekcijos įėjimo vartų lokalizacijos, sunkus apsinuodijimas pasireiškia karščiavimu, šaltkrėtis, hiperhidroze, kūno skausmais, vangumu, odos blyškumu, adinamija, hipotenzija ir kitais požymiais.
Gerklės difterija yra pavojingiausia infekcijos forma, kuri gali sukelti vystymąsi, o tai yra priežastis mirtingumas. Ją sukelia gerklų gleivinės patinimas ir sunki asfiksija.
Pagrindinis difterijos diagnostikos metodas yra mikrobiologinis. Atsiradus tankioms fibrino plėvelėms ir patinus ryklei ar kitoms kūno dalims, būtina iš paciento paimti tepinėlį dėl difterijos ir pradėti šį tyrimą. Išskyros iš gerklės, nosies gleivės, apnašos iš tonzilių – biomedžiaga, kuri pristatoma į bakteriologinę laboratoriją analizei. Ant terpės, kurioje yra serumo ar kraujo, pasėjama kalio telurito, kuris stabdo antrinės mikrofloros augimą. Po inkubacijos išaugusios kolonijos mikroskopuojamos, kaupiama grynoji kultūra ir galutinai identifikuojama rūšis. Gydytojams sero ir fagų tipavimo rezultatai yra svarbūs. Išskirtos kultūros toksiškumo nustatymas turi didelę diagnostinę reikšmę.
Difterijos etiotropinis gydymas susideda iš antitoksinio serumo, antibiotikų ir sulfonamidų įvedimo pacientams. Pagerėja simptominė ir patogenezinė terapija bendra būklė pacientams, palengvinant jų simptomus. Pašalinus ūmias patologijos apraiškas, nurodoma dezinfekuojanti fizioterapija - ultragarsas ir lazerio terapija tiesiai į židinį.
Siekiant išvengti tokios sunkios ligos kaip difterija išsivystymo, pagal Nacionalinį skiepų kalendorių atliekama bendra gyventojų imunizacija DPT vakcina. Dabar masinė vakcinacija žymiai sumažino sergamumą difterija ir mirtingumą nuo jos.
Corynebacterium non diphtheriae yra išorinės aplinkos gyventojai. Jie randami ant odos ir vidaus organų gleivinės, nes yra normocenozių atstovai. Susilpnėjusiems rizikos grupės asmenims šie mikrobai gali sukelti uždegiminius procesus, kurie yra tokie pat sunkūs kaip ir besąlyginių patogenų sukeltos ligos. Norint pasirinkti tinkamą etiotropinį gydymą ir išgydyti pacientą, būtina tiksliai ir greitai nustatyti mikrobą.
Corynebacterium glucuronolyticum
Corynebacterium glucuronolyticum – mikroorganizmai, išskirti iš žmonių, sergančių Urogenitalinės sistemos ligomis. Jie yra vyrų prostatito ir uretrito sukėlėjai, bet gali gyventi optimaliu kiekiu organizme sveikų žmonių, kaip šios biocenozės atstovai.
Neigiamų veiksnių įtakoje aktyvus augimas ir Corynebacterium glucuronolyticum dauginimasis. Bakterijos pradeda įgyti patogeninių savybių, sukelia vietinį uždegimą. Prostatos parenchima išsipučia, padidėja, į ją įsiskverbia limfocitai. Uždegimas plinta į liaukinį audinį, pakinta organo struktūra, sunaikinami epiteliocitai, prarandama sekrecinė liaukos funkcija.
Difteroidai yra vyrų urogenitalinio trakto normocinozės dalis kartu su stafilokokais, enterokokais, pavienėmis mikoplazmomis ir ureaplazmomis. Lytinio aktyvumo metu šlaplę kolonizuoja potencialios uropatogeninės bakterijos. Su hipotermija, nervine įtampa, ilgalaikis naudojimas Antibiotikai sukelia prostatos uždegimą, kurį sukelia oportunistinės bakterijos. Tuo pačiu metu pažeidžiamos vietinių apsauginių organizmo veiksnių funkcijos.
Sergantieji Corynebacterium glucuronolyticum sukeltu prostatitu ar uretritu skundžiasi tarpvietės, kapšelio, varpos skausmais, paūmėjančiais pasibaigus šlapinimuisi; dizuriniai sutrikimai: poliurija, nikturija, nepilnas ištuštinimas Šlapimo pūslė, silpna srovė; seksualinis silpnumas – erekcijos disfunkcija ir ejakuliacija.
Diagnostinės priemonės:- Prostatos liaukos apčiuopa tiesiojoje žarnoje - liaukos dydžio pasikeitimas, nevienalytė konsistencija, tankių ir minkštų vietų kaitaliojimas, skausmingi pojūčiai.Hemogramoje - uždegimo požymiai.
- Šlapimo ir prostatos sekrecijos bakteriologinis tyrimas atliekamas mikrobiologinėje laboratorijoje. Biomedžiaga sėjama į standartines terpes pirminiam identifikavimui, išaugusios kolonijos tiriamos mikroskopu, o tada tiriama izoliuoto patogeno struktūra, fiziologija, fermentinis ir biocheminis aktyvumas. Corynebacterium glucuronolyticum gerai auga ant kraujo agaro. Po 24 valandų ant jo atsiranda išgaubtos balkšvai gelsvo atspalvio kolonijos be hemolizės zonų.
- PGR diagnostika – korinebakterijų genetinės medžiagos nustatymas tiriamajame mėginyje.
Prostatito ir uretrito gydymas yra antimikrobinis. Pacientams skiriami fluorokvinolonai, makrolidai ir tetraciklinai.
Corynebacterium glucuronolyticum yra vyrų urogenitalinio trakto ligų sukėlėjas. Šiandien infekcinis prostatitas ir uretritas yra gana dažni ir rimti negalavimai medicininė problema. Konkretūs diagnostikos metodai ir gydymo principai vis dar nėra visiškai suprantami. Pacientai, „užsidirbę“ tokią ligą, kenčia visą gyvenimą. Tik veiksmingas antimikrobinis gydymas padės jiems susidoroti su patologija.
Difteroidai yra Corynebacterium genties mikroorganizmai, kurie šiuo metu menkai suprantami. Tai ir šis mikrobas, turintis kitą pavadinimą – Hoffmano lazdelė. Jo korinebakterija buvo gauta atradėjo garbei.
Corynebacterium pseudodiphtheriticum
Difteroidai yra visur: jie randami ore, dirvožemyje, vandenyje ir maiste. Mikrobai atsparūs aplinkos veiksniams – temperatūrai, saulės šviesai, drėgmei. Chloraminas ir kitos chloro turinčios dezinfekcijos priemonės jas sunaikina per porą minučių. Difteroidai gyvena įvairiose sveiko žmogaus organizmo biocenozėse – nosiaryklėje, odoje, šlaplėje, lytiniuose organuose, spermatozoiduose.
Požymiai, skiriantys šią rūšį nuo patogeninių korinebakterijų:
- Trūksta volutino
- Chaotiškas išdėstymas tepinėlyje,
- Masinis augimas paprastose maistinėse terpėse 37 laipsnių temperatūroje.
Corynebacterium pseudodiphtheriticum sukelia pūlingus-uždegiminius procesus, kai makroorganizmą nusilpsta virusinės infekcijos, stresas, onkopatologijos, antrinis imunodeficitas. Šiuo atveju liga nesivysto įprastose bakterijų buveinėse. Jie nesugeba susidaryti toksinų. Į kraują prasiskverbiančios korinebakterijos prisideda prie bakteriemijos vystymosi. Žinomi atvejai sunkus bronchitas ir pneumonija dėl ilgalaikės imunosupresijos. Šie mikrobai gali sukelti endokarditą, limfadenitą, dermatologines ligas, šlapimo takų infekcijas.
Organizme vystosi disbiotiniai pokyčiai, kai 5 ar 6 laipsnio mikrobų ląstelėse padaugėja difteroidų iki 10. Tokiu atveju atsiranda būdingų klinikinių apraiškų.
Corynebacterium pseudodiphtheriticum sukeliamų ligų gydymas susideda iš bakteriofagų, antibiotikų, plazmaferezės ir kitų kraujo valymo metodų atlikimas.
Jei difteroidai buvo išskirti iš kraujo, smegenų skysčio, šlapimo ir kitų sterilių substratų, jie turi būti laikomi potencialiais patogenais ir turi būti atitinkamai gydomi. Mikrobiologinėje laboratorijoje tai atliekama tiriant išskirto mikrobo jautrumą antibiotikams.
Video: paskaita – korinebakterijos, difterijos infekcijos stadijos
Korinebakterijos difterija
Corynsbacterium genčiai priklauso sukėlėjas Corynebacterium diphtheriae ir sąlyginai natogeninės korinebakterijos. pseudodiphtheria corynebacterium C. pseudodiphtheriticum, C. xerosis ir C. ulcerans, gyvenantys žmogaus organizme.
Corynehactcrium diphtheriae 1883 metais atrado E. Klsbs. 1884 metais skyrė F. Leffleris.
Morfologija, kultūrinės, biocheminės savybės. Difterijos korinebakterijos yra plonos, šiek tiek išlenktos gramteigiamos 1–5 µm ilgio lazdelės, nesudaro žvynelių, sporų ar kapsulių. charakteristika morfologinės savybėsšių bakterijų: pagaliukų formos sustorėjimai galuose, kuriuose yra volutino grūdelių, pagaliukų išsidėstymas tepinėlyje vienas į kitą kampu, raidės V pavidalu. Volutino grūdeliai aptinkami, kai dažomas Leffler's blue (jie dažosi intensyviau nei bakterijos kūnas) arba pagal Psyser (bakterijos kūnas nudažytas geltona, voliutų grūdeliai - tamsiai mėlynos spalvos) (spalvinis intarpas 34 pav.).
Fakultatyvinis anaerobas. Optimali temperatūra augimui – 37°C, pH 7,6. Auga specialiose maistinėse terpėse: pasirenkamoje terpėje – krešulių išrūgų, Claubergo terpėje. kurių sudėtyje yra sutraukto serumo ir kalio telurito. Pagal biologines savybes išskiriami difterijos lazdelių biovarai: biovar gravis lazdelės sudaro dideles pilkas kolonijas su dantytais kraštais, radialiniu dryžuotumu, primenančiu ramunės žiedą Claubergo terpėje; biovar mitis - mažos, juodos, išgaubtos kolonijos lygiais kraštais; tarpinis - tarpinio tipo kolonijos. Gravis tipas turi didžiausią virulentiškumą. Būdingas augimas ant nuožulniai sulankstyto serumo - net ir gausiai sėjant, nenutrūkstamas ištisinis augimas, nesusilieja kolonijos, augimas primena trinkelių grindinį ar šagreeninę odą.
Fermentinių savybių skirtumai tam tikrų tipų korinebakterijos naudojamos jų diferencijavimui (10 lentelė).
Antigenai. Pagal O-atigeną C. diphtheriae skirstomas į 11 serovarų. Pagogeniniai veiksniai. Pagrindinė difterijos sukėlėjo savybė
Toksiškumas. Difterijos bacilų egzotoksinas sukelia vietinę uždegiminę reakciją ir bendrą organizmo intoksikaciją, pažeidžiant antinksčius, miokardą, nervų sistemą. Yra toksinių ir netoksigeninių C. diphtheriae padermių. Difteriją sukelia toksikogeninės padermės. Gebėjimas gaminti egzotoksiną yra susijęs su profago buvimu ląstelėje, turinčio toks + geną, atsakingą už toksinų sintezę.
Toksino stiprumas matuojamas Dim – mažiausias toksino kiekis, nuo kurio per 3-4 dienas žūva 250 g sverianti jūrų kiaulytė. Visų difterijos bacilų toksinas yra vienodas antigeniškai, serotipų nėra.
Be toksino, difterijos korinebakterijos gamina fermentus: hialuronidazę, neuraminidazę, fibrinoliziną, kurie užtikrina jų pasiskirstymą audiniuose, tačiau bakteriemija kliniškai nepasireiškia.
Tvarumas. Difterijos lazdelės yra atsparios džiūvimui, žemos temperatūros poveikiui. Patekę su seilėmis ir plėvelėmis ant indų, vaikiškus žaislus čia galima laikyti ilgą laiką. Jautrus dezinfekavimo priemonės, išvirus iš karto miršta.
Liga žmonėms. Infekcijos šaltinis yra sergantys žmonės ir nešiotojai. Pagrindinis perdavimo kelias yra oru, galimas ir kontaktinis-buitinis – per indus, žaislus. Ligos pasireiškia žmonėms, kurie neturi antitoksinio imuniteto. Asmenys, turintys antitoksinį imunitetą, nesant antimikrobinio imuniteto nuo korinebakterinės difterijos, gali suformuoti šių patogenų nešiklį, lokalizuotą ant ryklės ar nosies gleivinės.
Inkubacinis periodas liga 2-10 dienų. Įgyvendinimo vietoje išsivysto uždegimas, susidaro difterijos plėvelė. Egzotoksinas prasiskverbia į kraują, išsivysto toksinemija. Klinikinės difterijos formos: ryklės difterija (85-90% visų atvejų), nosies, gerklų, akių, išorinių lytinių organų, odos, žaizdų ir kt.
Imunitetas. Po ligos išliekame stabilus antitoksinis imunitetas, bet pasikartojantys atvejai Pse tas pats pastebėta Antitoksino kiekį kraujyje galima nustatyti naudojant RNGA su eritrocitų diapiustikumu, turinčiu eritrocitų su ant jų adsorbuotu difterijos toksoidu.
Laboratorinė diagnostika. Ankstyva diagnozė yra būtina skubiam gydymui. Medžiaga tyrimams paimama iš pažeidimų dviem steriliais vatos tamponėliais. Atliekant nešiojimo tyrimą, gleivės paimamos iš gerklės ir nosies. Labai svarbu nedelsiant nusiųsti medžiagą į laboratoriją.
Vienas iš tepinėlių naudojamas kultūrai, o iš kito tepinėlis daromas mikroskopiniam tyrimui, tačiau tai retai duos teigiamą rezultatą. Pagrindinis yra bakteriologinis tyrimas - sėja į lėkštę su maistine terpe, išaugusių kolonijų tyrimas: tepinėliai, morfologijos tyrimas, toksinų kiekio nustatymas nusodinant agare su antitoksiniu serumu. C. diphlheriae rūšis apibrėžiama pagal biochemines savybes. Rezultatuose bakteriologiniai tyrimai nurodyti: „izoliuotas toksinis C. diphtheriae“ arba „izoliuotas netoksigeniškas C. diphtheriae“. Kadangi gydymo efektyvumas priklauso nuo kuo ankstyvesnės pradžios, naudojamas pagreitintas difterijos toksino nustatymo metodas tiesiogiai tiriamojoje medžiagoje, naudojant RIGA uždelsimo reakciją. Reakcijos principas: tiriamoji medžiaga skirtingais praskiedimais dedama į tam tikrą kiekį antitoksinio serumo, tada pridedamas eritrocitų diagnostikos rinkinys, kuriame yra difterijos toksoidas. Kontrolinėje (be tiriamosios medžiagos) antitoksinis serumas išryškino eritrocitų agliutinaciją. Jei tiriamojoje medžiagoje yra toksino, jis susijungia su serumu ir sukelia PHHA vėlavimą.
Prevenciniai ir gydomieji preparatai. Difterijos prevencijai svarbu aktyvi imunizacija, kuri atliekama nuo trijų mėnesių amžiaus, vakcina, kurioje yra difterijos toksoidų: DPT, DTP. Ateityje revakcinacija bus atliekama vaikams, o vėliau ir suaugusiems. Kontraindikacijos skiepams yra labai ribotos.
Yra vakcinų su sumažintu antigenų kiekiu: DTP-m, ADS-m, AD-m. naudojamas imunizuoti žmones, kuriems draudžiama gauti visą vakcinos dozę.
Ligonių gydymui svarbiausia ankstyva specifinė seroterapija su antitoksiniu antidifterijos serumu, naudojant dozes priklausomai nuo proceso lokalizacijos. Serumas skiriamas Bezredk metodu. Tuo pačiu metu atliekama antibiotikų terapija (benzilpenicilinas, eritromicinas, rifampicinas ir kt.).
Straipsnio turinys
Korinebakterija difterija
Pirmą kartą E. Klebsas aprašė 1983 m., o F. Leffleris išskyrė 1984 m.Morfologija ir fiziologija
Difterijos korinebakterijos turi visai genčiai būdingą formą. Jie yra vienas kito kampu romėniškų penketukų pavidalu. Volutino grūdeliai aptinkami dažant acto mėlyna spalva Neisser metodu, kuris nudažo tik inkliuzus, nepaveikdamas citoplazmos. Difterijos bacila yra apsupta mikrokapsulės ir turi pili. C. diphtheriae yra reiklūs maistiniam substratui. Jiems reikia daug aminorūgščių, angliavandenių, mineralinės druskos. Paprastai jie auginami sukrešėjusiame kraujo serume ir kraujo agare su kalio teluritu. Paskutinėje terpėje susidaro dviejų tipų kolonijos: gravis - tamsiai pilka ir mitis - juoda, kurios skiriasi viena nuo kitos biocheminėmis savybėmis.Antigenai
C. diphtheriae mikrokapsulėje yra K-antigeno, leidžiančio juos diferencijuoti į serovarus ir grupei specifinį ląstelės sienelės polisacharidinį antigeną, kuris suteikia kryžminius ryšius. serologinės reakcijos su mikobakterijomis ir nokardija. Patogeniškumas ir patogenezė. Difterijos bakterijų virulentiškumo veiksniai yra pilis ir mikrokapsulė, kurių pagalba jos prisitvirtina prie tonzilių, rečiau gerklų, trachėjos, nosies ertmės, akies junginės, vulvos epiteliocitų. Tada įvyksta epitelio ląstelių kolonizacija, kurią lydi jų atsiradimas uždegiminis procesas. Toksiškumas yra susijęs su histotoksino, kurį sudaro du subvienetai: toksinis polipeptidas ir transportavimo polipeptidas, atsakingo už toksinio komponento tiekimą į tikslines ląsteles, sekrecija. Pirmojo susidarymą kontroliuoja bakterijų genai, antrojo – fago, lizogenizavusio bakterijos ląstelę, genai. Tai rodo, kad histotoksiną gali išskirti tik lizogeninės C. diphtheriae ląstelės.Histotoksino fiksacija vyksta ant širdies raumenų ląstelių membranų, širdies parenchimos, inkstų, antinksčių, nervinių ganglijų receptorių. Tuo pačiu metu blokuojama baltymų sintezė ribosomose, o tai galiausiai sukelia ląstelių mirtį. Sergant difterija, kaip taisyklė, nėra bakteriemijos ir septicemijos dėl C. diphtheriae lokalizacijos gerklų ląstelėse, kur atsiranda fibrininis-nekrozinis uždegimas, susidaro plėvelės, limfadenitas ir edema, dėl kurios gali išsivystyti asfiksija. Be gerklų difterijos, C. diphtheriae sukelia žaizdų paviršių ir lytinių organų difteriją. Į difteriją panašios korinebakterijos yra šios: C. xerosis sukelia lėtinį konjunktyvitą, C. ulcerans – lengvas į difteriją panašių ligų formas, C. pyogenes ir C. haemolyticum – opinį nekrozinį faringitą, tonzilitą, gingivostomatitą. C. pseudodyphtheriae yra nuolatinis odos ir gleivinių gyventojas.Imunitetas
Poinfekcinio imuniteto intensyvumas sergant difterija atsiranda dėl didelio antitoksino kiekio kraujo serume. Difterijos metu susidarę antibakteriniai antikūnai – agliutininai, precipitinai ir kiti – neturi apsauginių savybių. Antitoksinio imuniteto buvimas ar nebuvimas vertinamas pagal Shik reakciją – toksino neutralizavimą antitoksinu. Į dilbio odą patekus difterijos toksino V40 DLM, atsiranda paraudimas ir patinimas, nesant antitoksino kraujyje. Esant antitoksinui, Schick testas yra neigiamas.Ekologija ir epidemiologija
C. diphtheriae buveinė yra žmonės, kurių gerklėje jie yra lokalizuoti. Vaikai yra jautriausi difterijai. Tačiau per pastaruosius 30 metų difterija „išaugo“. Suaugusiesiems difterija yra sunki ir gali būti mirtina. Aplinkoje difterijos bakterijos išlieka gyvybingos keletą dienų, nes toleruoja išsausėjimą. Infekcija vyksta oro lašeliniu būdu ir rečiau kontaktiniu būdu.Difterija
Difterija – ūmi, daugiausia vaikiška infekcinė liga, kuris pasireiškia būdingu fibrininiu uždegimu patogeno vietoje ir sunkus apsinuodijimas organizmo difterijos egzotoksinas. Jo sukėlėjas yra Corynebacterium diphtheriae, priklausantis Corynebacterium genčiai. Šiai genčiai priklauso dar apie 20 rūšių bakterijų, kurios yra patogeniškos žmonėms, gyvūnams ir augalams. Jų didžiausia vertė praktinei medicinai turi: 1. C. ulcerans – gali sukelti faringitą, odos pažeidimus, taip pat aptinkama sveikiems žmonėms, pieno produktuose ir jų transportavimo taroje, kai kurios padermės yra toksiškos.2. C. jeikeium (anksčiau Corynebacterium JK) – sukelia plaučių uždegimą, endokarditą, peritonitą, užkrečia žaizdas, odą.3. C. cistitidis (anksčiau Corynebacterium grupė D2) – inicijuoja akmenų susidarymą šlapimo takų ir plaučių uždegimas.4. C. minutissimum – sukelia eritrazmą, plaučių abscesus, endokarditą.5. C. haemolyticum – gali sukelti tonzilitą, celiulitą, smegenų abscesus, osteomielitą, lėtinį dermatitą.6. C. kserozė – anksčiau buvo laikoma kserozės (lėtinio konjunktyvito) sukėlėju, dabar ji vadinama saprofitais.7. C. pseudodiphtheriticum yra saprofitas, gyvenantis ant žmogaus nosiaryklės gleivinės.Medžiagos surinkimas ir pristatymas į laboratoriją
Tyrimo medžiaga yra plėvelė iš tonzilių, lankų, gomurio, liežuvio, gleivių iš gerklės ir nosies, rečiau išskyros iš akies, ausų, žaizdų, makšties ir pažeistos odos vietos. Epidemiologo prašymu apžiūrimi žaislų ir kitų daiktų tamponai, kai kurie maisto produktai (pienas, ledai). Medžiagą reikia paimti prieš etiotropinio gydymo pradžią tuščiu skrandžiu arba praėjus 2 valandoms po valgio.Medžiagai paimti naudojami tamponai, išdžiovinti arba iš anksto sudrėkinti 5% glicerolio tirpalu, dedami į mėgintuvėlį ir sterilizuojami. su tuo. Tiriama medžiaga paimama iš burnos ryklės ir nosies dviem atskirais tamponais, sukamaisiais judesiais stengiantis paimti ją ant sveikos ir pažeistos vietos ribos, neliečiant tampono su skruostų, dantų ir liežuvio gleivine, kuri yra spaudžiamas mentele. Atliekant laringoskopiją, plėvelė arba gleivės paimamos tiesiai iš gerklų. Plėvelės ir gleivės iš burnos ir nosies būtinai imamos visais atvejais, net ir sergant retų lokalizacijų difterija (odos, žaizdos, akies, ausies, vulvos) plėvelė, kruopščiai sumalama tarp dviejų stiklelių. Paėmus medžiagą dedami tamponai tuose pačiuose mėgintuvėliuose, ant kurių įrašytas mėginio paėmimo numeris, data ir laikas bei gydytojo pavardė. Jie turi būti pristatyti į laboratoriją ne vėliau kaip per 3 valandas po medžiagos paėmimo. Jei mėginių ėmimo schema numato užimtumą prie paciento lovos, mėgintuvėliai ir indai su pasėliais nedelsiant siunčiami į laboratoriją arba inkubuojami 37 °C temperatūroje ir pristatomi po 20–23 valandų, esant šaltam orui, maišeliuose su kaitinimo trinkelėmis.Bakterioskopinis tyrimas
Medžiagos iš paciento bakterioskopinis tyrimas atliekamas tik gydytojo prašymu ir tik siekiant atpažinti Simanovskio-Plauto-Vincento nekrozinę krūtinės anginą (fusiforminių strypų ir Vincento spirochetų, kurie neauga įprastiniais auginimo metodais, nustatymas). Daugelį metų mikroskopinis Volutino grūdų, dažytų Leffler ir Neisser metodais, tyrimas ir identifikavimas buvo difterijos laboratorinės diagnostikos ir bakterionešio nustatymo pagrindas. Dabar dėl difterijos bakterijų kintamumo, veikiant antibiotikams, pirminė tiriamosios medžiagos mikroskopija nerekomenduojama. Tepinėliai dažomi pagal Gram, Loeffler ir Neisser. Galite dažyti juos acto rūgšties metilo violetiniu, toluidino mėlynu arba bentiazolo ir tiazino dažais.Difterijos bacilos tepinėliuose išsidėsčiusios kampu, lotyniškų raidžių V, X, Y pavidalu arba formuoja grupes, primenančias išsibarsčiusių degtukų krūvą. Volutino grūdeliai, kaip taisyklė, yra mikrobų ląstelių poliuose. Pseudodifterijos bakterijos ir difteroidai dedami lygiagrečiai ("palisados" pavidalu) ir, žinoma, neturi volutino grūdelių. Babesh-Ernst grūdelius galima aptikti naudojant fluorescencinę mikroskopiją, kai tepinėlius nudažo korifosfinu. Geltonai žalių bakterijų ląstelių kūnų fone grūdai įgauna oranžinės raudonos spalvos spalvą.Bakteriologiniai tyrimai
Klinikinė medžiaga pasėjama ant kraujo agaro ir kraujo telurito agaro (arba Clauberg II terpės), supilto į Petri lėkštes. Kraujo agaro pasėlis yra būtinas kitai mikroflorai aptikti. Be to, kai kurios Cdiphtheriae padermės yra jautrios kalio telurito poveikiui, todėl jų augimas ant telurito terpės gali būti slopinamas. Norint aptikti difterijos bakterionešį, pasėlis daromas tik ant kraujo telurito agaro, nes inokuliate negali būti didelis skaičius difterijos bacilos, kurių augimą neselektyviose terpėse slopins kita mikroflora. Šiuo atveju taip pat leidžiama naudoti transporto priemonę.Telurino kraujo agaras
Į 100 ml 2% ištirpinto ir atšaldyto iki 50 °C maistinio agaro, pH 7,6, įpilkite 10-15 ml defibrinuoto kraujo ir 2 ml 2% kalio telurito tirpalo. Mišinys kruopščiai išmaišomas ir 3-4 mm storio sluoksniu supilamas į sterilias Petri lėkštes.Trečiadienis Clauberg II
Į 100 ml 3% maistinio agaro pH 7,6, ištirpinto ir atšaldyto iki 50 °C, įpilkite 3 ml 2% kalio telurito tirpalo, 10 ml glicerolio mišinio ir 50 ml hemolizuoto kraujo. Glicerino mišinys paruošiamas į 40 ml defibrinuoto kraujo įpylus 20 ml sterilaus glicerolio. Mišinį galima laikyti šaldytuve iki 4 mėnesių. Norint paruošti hemolizuotą („lakuotą“) kraują, 16 ml defibrinuoto kraujo įpilama į 34 ml sterilaus distiliuoto vandens.Transportavimo pusiau skysta terpė
1 g bet kokio komercinio agaro įpilama į 100 ml Hotinger's digest arba mėsos-peptono sultinio, kurio pH sureguliuotas iki 7,6, sterilizuojamas autoklave 112 °C temperatūroje 30 minučių, 10 ml serumo ir 1 ml 2% kalio telurito. pridedama aseptiškai. Terpė supilama į 5 ml mėgintuvėlius. Jei įmanoma, taip pat naudojama sudėtingesnė Stewarto modifikuota Ames transportavimo terpė (AMIES).Skiepijimas iš vieno paciento atliekamas ant vieno puodelio, o pusę terpės naudojant iš burnos ir ryklės (tonzilių, lankų, uvulos) ir antrasis - skiepijimui kitu tamponu iš nosies. Jei yra medžiagos, kurią reikia tirti iš odos, akių, ausų ir kitų lokalizacijų, pridėkite kitą puodelį. Į vieną puodelį neįmanoma pasėti medžiagos iš kelių pacientų. Prieš sėją terpės 15-20 minučių pašildomos termostate, sėjant tiriamąją medžiagą tamponu pirmiausia įtrinkite į atskirą 2x1 cm ploto kraujo agaro sritį, tada panašiai ant kraujo telurito agaro (arba Clauberg II terpės), visą laiką sukant tamponą, kad iš jo būtų pasėta visa medžiaga. Tada tuo pačiu tamponu likę terpės paviršiai (pusė puodelio) pasėjami potėpiais. Taikant šį inokuliavimo metodą gaunamos izoliuotos kolonijos (gryna kultūra), kurios naudojamos tiesiai iš plokštelės toksiškumui nustatyti ir vėliau identifikuoti. Inokuliuoti lėkštelės arba mėgintuvėliai su transportine terpe 20-24 valandas inkubuojami termostate 37 ° C. Antrą dieną stereoskopiniu mikroskopu tiriamas kolonijų pobūdis. Jei augimas nevyksta abiejose terpėse, medžiagos mėginys imamas iš naujo. Tolesniam kultūros identifikavimui visuose tyrimuose atrenkamos lėkštelės su tipiškomis ir įtartinomis C. diphtheriae kolonijomis. Įtartinų kolonijų mikroskopijos galima nedaryti.Difterijos bacilų kolonijos ant kraujo agaro yra balkšvos arba gelsvos spalvos, nepermatomos, apvalios, šiek tiek išgaubtos, 1-2 mm skersmens. Dažniausiai būna riebios konsistencijos, nors kai kurios gali suformuoti trapias kietas R kolonijas.KonomiC.diphtheriae kraujo-telurito terpėje po 24 valandų augimo yra pilkos, išgaubtos, lygiu kraštu, klampios. Po 48 valandų jie tampa tamsiai pilki arba juodi su metaliniu blizgesiu, vienodais arba šiek tiek iškirptais kraštais, lygiais arba radialiai ruožuotu paviršiumi (R forma), klampūs arba trapūs palietus kilpa. Pagal struktūrą 48- valandinės kolonijos ant telurito terpės ir Kai kurios difterijos sukėlėjo fermentinės savybės išskiria keturis kultūrinius ir biocheminius variantus (biovarus) – gravis, mitis, belfanti, intermedius. Biovar gravis dažniausiai sudaro pilkas arba juodas mamines sausas kolonijas, trapias, plokščias, lygias, 1,5-2 mm skersmens, radialiai ruožuotu paviršiumi, labai toksiškas, nesukelia hemolizės, skaido krakmolą ir glikogeną Auga biovarai mitis ir belfanti pilkų arba juodų, apvalių lygių išgaubtų kolonijų pavidalo lygiais kraštais, 1-1,5 mm skersmens, šie variantai yra mažiau toksiški, sukelia hemolizę, bet neskaido krakmolo ir glikogeno Intermedius Biovar sudaro mažas, pilkas, skaidrias kolonijas su 0,5-1 mm skersmens, plokščiu lygiu paviršiumi, šiek tiek toksiška, neskaido krakmolo ir glikogeno.Jei nėra tipiško augimo, tepinėliams ruošiami iš kitų abejotinų kolonijų. Jei juose randama sporinių lazdelių, kokosų, mielių ir pan., difterijos tyrimai nutraukiami ir atsakoma neigiamai. Tačiau svarbu prisiminti, kad difterijos bakterijos, suformavusios netipines kolonijas terpėse su augimo inhibitoriais (kalio teluritas), gali būti sutrumpintos, sutirštintos, tačiau išsaugomos polimorfizmas ir būdinga vieta.Kai tipiškos kolonijos auga, jos iš karto pradeda tirti savo toksiškumą, t. identifikavimas. Toksigeninės savybės tiriamos mažiausiai 2 izoliuotose kolonijose, vieną kiekvienos kolonijos pusę pasėjant į terpę, skirtą toksiškumui nustatyti ir nesudegintą kilpele ant Pisu terpės, o kitą pusę ant pasvirusio serumo agaro, kad būtų išskirta grynoji kultūra ir išsaugota iki tol. laboratorinės diagnostikos pabaiga. Tuo atveju, kai lėkštėje auga ir toksinės, ir netoksigeninės C. diphtheriae veislės, būtina ištirti apie 20 kolonijų toksogenines savybes, esant daugkartiniam įtartinų kolonijų augimui, sėjant medžiagą iš 5-6 kolonijų į vieną. apnašas. Kai auga tik viena kolonija, ji sėjama į terpę toksiškumui nustatyti ir, kalcinuojant kilpą, į mėgintuvėlį su Pisu terpe. Agaro gelyje ir teigiamas cistinazės testas, nustatoma, kad izoliuota kultūra yra toksiška C. difterija. Jei po 24 valandų nėra kritulių linijų, plokštelės inkubuojamos dar vieną dieną. Jei Pizos testas yra neigiamas, kultūra identifikuojama kaip korinebakterijų rūšis.Gryna kultūra ant pasvirusio serumo agaro sėjama ant angliavandenilių terpės su gliukoze, sacharoze, tirpiu krakmolu, imami mėginiai ureazei, pirazinidazei ir nitratų reduktazei nustatyti. . Ketvirtą dieną surašomi visų skiepų rezultatai ir pateikiama motyvuota bakteriologinė išvada apie išskirtą pasėlį Tokie korinebakterijų nustatymo metodai naudojami.Toksiškumo nustatymas in vitro
Jis pagrįstas toksino ir antitoksino sąveika agaro gelyje. Optimalaus kiekybinio toksino ir antitoksino santykio vietose agaro storyje nuosėdos nusėda plonų, švelnių baltų linijų („rodyklės“, „antenos“) pavidalu. Šis testas daugelyje užsienio šalių vadinamas Elek testu.Toksigeniškumo testas paprastai atliekamas su grynosiomis kultūromis. Jis gali būti nustatomas ir su svetima mikroflora užterštomis kultūromis, pagreitėja per parą laboratorinė diagnostika difterija. Bet jei testas yra neigiamas, jis kartojamas su izoliuota gryna kultūra.Šiam tyrimui atlikti mikrobiologinė pramonė gamina specialią sausą standartinę terpę difterijos mikrobų (VTDM) toksiškumui nustatyti ir standartinius popierinius diskus, suvilgytus antitoksiniu antidifterijos preparatu. serumas ir išdžiovintas.Popieriniai diskeliai dedami ant šviežiai paruoštos VTDM terpės su antitoksinu (ne daugiau kaip keturi viename puodelyje) paviršiaus. 0,5 cm atstumu nuo disko aplink jį sėjamos 7-8 mm skersmens "plokštelių" formos kultūros, pakaitomis tiriamos kultūros ir kontrolinės padermės "plokštelės". Atsižvelgiama į rezultatus. po 18-24 ir 48 metų. Nuosėdų specifiškumo kriterijus – tiriamos kultūros kritulių linijų susiliejimas su toksogeninio padermės linijomis. Šiuo atveju izoliuota kultūra laikoma toksine, nesant standartinių popierinių diskų, galima naudoti filtravimo popieriaus juosteles, impregnuotas difterijos antitoksinu. jie gaminami tiesiogiai laboratorijoje. Popierinės juostelės, supjaustytos pagal dydį ir 30 minučių autoklavuojamos 121°C temperatūroje, sudrėkinamos 0,25 ml išgryninto difterijos antitoksino, kurio viename ml yra 500 TV. Tokiu atveju ant puodelio su atitinkama terpe uždedama antitoksinu suvilgyta popieriaus juostelė, kuri džiovinama atidarius puodelį 15-20 minučių termostate ir apverčiant aukštyn kojomis. Po to abiejose juostelės pusėse kultūros pasėjamos "plokštelėmis", kaitaliodamos bandomąsias ir kontrolines padermes. bakteriologinė diagnostika difterija", Kijevas (1999). Daugelį metų difterijos bakterijų toksiškumas buvo nustatomas po oda arba intraderminiu būdu, įvedant kultūrą dviem jūrų kiaulytėms, iš kurių vienai dieną prieš tai buvo suleista 100-1000 TV antitoksinio antidifterijos serumo. Dabar šis metodas bakteriologijos laboratorijose beveik nenaudojamas, nes neseniai buvo sukurtas labai jautrus ir labai specifinis difterijos toksino geno nustatymo metodas grandininės reakcijos polimerizacijos būdu.toksikogeniškumo apibrėžimas: didelis jautrumas, rezultatų gavimo greitis (4-6 val.), grynosios kultūros išskirti nereikia. Tačiau jo įgyvendinimui reikalinga speciali įranga, brangūs reagentai ir atitinkama patalpa, todėl jį galima atlikti tik specializuotoje laboratorijoje. Visos netoksinės difterijos bakterijų padermės, išskirtos iš ligonių ir bakterijų nešiotojų, turi būti siunčiamos į Ukrainos valstybinės sanitarinės ir epidemiologinės priežiūros centrą (kur tokia laboratorija yra), kad būtų galutinai nustatytos C. diphtheriae toksinės savybės.Cistinazės nustatymas (Piso testas)
C. diphtheriae, C. ulcerans išskiria fermentą cistinazę, jį gamina pseudodifterijos bakterijos ir kiti difteroidai.Išskirta kultūra inokuliuojama į terpę su cistinu, supilama kolonėlėje į siaurus mėgintuvėlius. Cistino teigiamos bakterijos cistiną skaido, išskirdamos vandenilio sulfidą, kuris su švino acetatu, patekusiu į terpę, sudaro švino sulfatą, dėl to terpė tamsėja. Ruda spalva. C. diphtheriae sukelia ne tik terpės patamsėjimą po dūrio eigos, bet aplink ją 1 cm atstumu nuo paviršiaus suformuoja tamsiai rudą „debesėlį“. Į rezultatus atsižvelgiama po 20-24 valandų inkubacijos termostate.Ureazės nustatymas (Sachse testas)
Difterijos bakterijos šio fermento nesudaro. Tik kai kurios kitos korinebakterijų rūšys duoda teigiamą ureazės testą. Norint paruošti mėginį, išskirta kultūra sėjama į sultinį su karbamidu. Ureazė skaido karbamidą, keičia terpės pH, lydi jos paraudimas. Jei fermentas neišsiskiria, sultinio spalva nesikeičia.Pirazinamidazės nustatymas
Pirazinamidazė nustatoma hidrolizuojant pirazinamidą iki pirazino rūgšties ir amonio. Tam 0,25 ml sterilaus distiliuoto vandens įpilama į sterilų mėgintuvėlį, kuriame paruošiama tiršta izoliuotos kultūros suspensija, tada pridedama viena diagnostinė Rosko 598-21 tabletė. Inkubuokite 4 valandas 37°C temperatūroje, po to įlašinkite vieną lašą šviežiai paruošto 5 proc. vandeninis tirpalas amonio geležies sulfatas. Esant fermentui, suspensija tampa raudona arba oranžinė. Patogeninės korinebakterijos neišskiria pirazinamidazės, todėl nekeičia suspensijos spalvos.Sacharolitiniai fermentai
Sacharolitiniai fermentai nustatomi pasėjant visą izoliuotos kultūros kilpą į kiekvieną sutrumpintos margos Hiss serijos (gliukozės, sacharozės, tirpaus krakmolo) mėgintuvėlį. Į rezultatus atsižvelgiama po 24 valandų inkubavimo termostate. Krakmolo skilimas gali užtrukti iki 48 valandų.Nitratų reduktazės nustatymas
Nitratų reduktazės apibrėžimas yra papildomas testas nustatyti C. belfanti ir C. ulcerans, kurios nesudaro šio fermento. Mėgintuvėlyje su sultiniu, į kurį įpilama 0,1 % KN03, tiriamoji kultūra pasėjama, inkubuojama termostate parą. Privaloma kontrolė nesokuliuota terpe. Jei yra nitratų reduktazės, į sėjamą sultinį įlašinus 3 lašus Kasatkino reagento, atsiranda raudona spalva. Kontroliniame mėgintuvėlyje esanti terpė nekeičia spalvos.Pastaruoju metu korinebakterijoms identifikuoti enterobakterijoms identifikuoti naudojami popieriniai indikatoriniai diskai su gliukoze, sacharoze, karbamidu ir krakmolu iš rinkinio "B" (firma "ImBio", Nižnij Novgorodas). 4 mėgintuvėliuose paruošiama tiršta tiriamos kultūros suspensija, į kiekvieną jų panardinamas diskelis su atitinkamu angliavandeniu ar kitu reagentu. Po inkubacijos termostate ureazės išsiskyrimas fiksuojamas po 40-120 minučių, o sacharolitinis aktyvumas nustatomas po 5-24 valandų. Esant ureazei, baltas diskas su karbamidu tampa rausvai rausvai raudonas, jei jo nėra, jis lieka baltas. Diskai su gliukoze ir sacharoze, esant atitinkamiems fermentams, po 5-6 valandų pakeičia spalvą iš raudonos į geltoną. Nustatant amilazę, į mėgintuvėlį su atitinkamu substratu įdedamas indikatorinis diskas su jodu. Jei fermento nėra, atsiranda tamsiai mėlyna spalva, jei yra, tirpalo spalva išlieka nepakitusi.Specifinė profilaktika ir gydymas
Skiepijama nuo difterijos įvedant difterijos toksoidą, gautą apdorojant difterijos toksiną formalinu. Mūsų šalyje vakcinacijai naudojama DTP – adsorbuota kokliušo-difterijos-stabligės vakcina. Antitoksinis serumas naudojami specifinei terapijai, o antibiotikai – bakterijų nešiotojų sanitarai. Iš antibiotikų vartojamas penicilinas, vankomicinas, eritromicinas ir kt.2 klausimas. Corynebacterium diphtheria Corynebacterium diphtheriae (Corynebacterium gentis)
C. diphtheriae – lazdelės formos bakterijos; sukelti difteriją (gr. difterija – oda, plėvelė) – ūmi infekcija, kuriai būdingas fibrininis ryklės, gerklų, rečiau kitų organų uždegimas, intoksikacijos reiškiniai.
Morfologinės ir kultūrinės savybės.
Corinebacterium diphteriae yra plonos, šiek tiek išlenktos arba tiesios gramteigiamos lazdelės, išdėstytos kampu viena kitos atžvilgiu romėniškų penketukų pavidalu. Galuose jie sutirštėja dėl grūdelių. valiuta viename arba abiejuose ląstelės poliuose. Piniginiai grūdeliai susideda iš polifosfatų, anilino dažus jie suvokia intensyviau nei ląstelės citoplazma ir lengvai aptinkami dažant pagal Neisserą melsvai juodų granulių pavidalu, o bakterijų kūnai nusidažo geltonai žaliai. Kai dažomas gramu, valiutos grūdeliai neaptinkami.
Grynosios kultūros tepinėlio piešimas. Neisser dėmė Grynos kultūros tepinėlis.
Dažyta Leffler šarmine mėlyna spalva
Difterijos bacila neturi atsparumo rūgštims, yra nejudri, nesudaro sporų, turi mikrokapsulę su virvelės faktoriumi. Ląstelės sienelės sudėtyje yra galaktozės, manozės, arabinozės, taip pat daug lipidų, įskaitant rūgštims neatsparias mikolio rūgštis.
Difterijos sukėlėjas yra fakultatyvinis anaerobas, heterotrofas, augantis 37 ° C temperatūroje sudėtingose maistinėse terpėse: krešėjusio kraujo serumo, telurito kraujo agaro.
Ant pasirenkamosios terpės po 8-14 valandų susidaro taškuotos, išgaubtos gelsvai kreminės spalvos kolonijos su lygiu arba šiek tiek granuliuotu paviršiumi. Kolonijos nesusilieja ir turi šagreeninės odos išvaizdą.
Telurito terpėje difterijos sukėlėjas po 24-48 valandų sudaro juodas arba juodai pilkas kolonijas, teluritui pavirstant į metalinį telūrą.
Difterijos sukėlėjas pasižymi dideliu fermentiniu aktyvumu. Diferencinės diagnostikos savybės C. diphteriae yra:
nesugebėjimas fermentuoti sacharozės ir skaidyti karbamidą,
gebėjimas gaminti fermentą cistinazę.
Difterijos sukėlėjas kultūroje nėra vienalytis ir biochemines savybes. Pagal PSO Europos regioninio biuro rekomendacijas C. diphteriae skirstomas į 4 biovarus: gravis, mitis, intermedius, belfanti.
Telurito terpėje biovar gravis sudaro sausas, nepermatomas, dideles, plokščias, pilkšvai juodas kolonijas, iškilusias centre. Kolonijos periferija yra šviesi su radialiniu dryžuotumu ir nelygiu kraštu. Tokios kolonijos primena ramunės žiedą. Biovar mitis sudaro mažas, lygias, blizgančias, juodas, išgaubtas kolonijas su lygiu kraštu, apsuptas hemolizės zonos. Intermedius ir belfanti biovarai iš tikrųjų priklauso mitis biovarui, nes jie neskaido krakmolo, ir šis požymis yra stabiliausias C. diphteriae.
Antigeninė struktūra. C. diphteriae turi O-antigeną (lipidų ir polisacharidų frakcijas, esančias giliai ląstelės sienelėje) ir K-antigeną (paviršiaus termolabilų baltymą). O antigenas yra skirtingų rūšių. Remiantis K-antigenu, išskiriami apie 58 serovarai.
patogeniškumo veiksniai. Pagrindiniai C. diphteriae patogeniškumo veiksniai yra paviršiaus struktūros, fermentai ir toksinai.
Paviršiaus konstrukcijos (gėrė, mikrokapsulės komponentai: laido faktorius, K-antigenas, mikolio rūgštys) turi baltyminį ir lipidinį pobūdį, skatina mikrobų sukibimą įėjimo vartų vietoje, užkerta kelią bakterijų fagocitozei, turi toksinį poveikį makroorganizmo ląstelėms, naikina mitochondrijas.
Patogeniškumo fermentai: neuraminidazė, hialuronidazė, hemolizinas, dermonekrotoksinas. Neuraminidazė skaldo N-acetilneuramino rūgštį nuo gleivių glikoproteinų ir ląstelių paviršių, lyase padalija jį į piruvatą ir N-acetilmannozaminą ir piruvatas skatina bakterijų augimą. Kaip veiksmo rezultatas hialuronidazė padidina kraujagyslių pralaidumą ir plazmos išsiskyrimą už jų ribų, o tai sukelia aplinkinių audinių patinimą. Dermonekrotoksinas sukelia ląstelių nekrozę patogeno vietoje. Plazmos fibrinogenas, peržengęs kraujagyslių ribas, susisiekia su nekrozinių kūno ląstelių trombokinaze ir virsta fibrinu, kuris yra difterijos uždegimo esmė. Difterijos plėvelės viduje C. diphtheriae randa apsaugą nuo imuninės sistemos efektorių ir antibiotikų, dauginasi, jų susidaro daug pagrindinis patogeniškumo veiksnys -difterijos histotoksinas.
Difterijos histotoksinas blokuoja baltymų sintezę organuose, kurie intensyviausiai aprūpinami krauju: širdies ir kraujagyslių sistemoje, miokarde, nervų sistema, inkstai ir antinksčiai.
Epidemiologija. Natūraliomis sąlygomis difterija serga tik žmogus, neturintis atsparumo sukėlėjui ir antitoksinio imuniteto. Liga yra visur. Didžiausias sergančiųjų skaičius stebimas rugsėjo antroje pusėje, spalį ir lapkritį. Labiausiai jautrūs yra ikimokyklinio ir pradinio mokyklinio amžiaus vaikai. Tarp suaugusiųjų į didelės rizikos grupę patenka viešojo maitinimo ir prekybos, mokyklų, ikimokyklinių ir gydymo įstaigų darbuotojai.
C. diphteriae atspari aplinkos veiksniams: seilių lašeliuose, prilipusiuose prie indų ar žaislų, ant durų rankenų, gali išsilaikyti iki 15 dienų, ant aplinkos objektų – 5,5 mėnesio, gali daugintis piene. Verdant C. diphteriae žūva per 1 min., 10% vandenilio peroksido tirpale - po 3 min., 5% karbolio rūgšties tirpale ir 50-60% spirite - po 1 min.
Difterijos histotoksinas yra labai nestabilus ir greitai sunaikinamas šviesos, šilumos ir oksidacijos poveikio.
Patogenezė.
infekcijos šaltinis yra:
1. Toksogeninių padermių nešiotojai – ypač pavojingi yra tie nešiotojai, kurie neturi klinikinių ligos apraiškų, nes turi antitoksinį imunitetą.
2. Pacientai: Tarp pacientų didžiausią reikšmę turi asmenys, kurių procesas lokalizuotas viršutiniuose kvėpavimo takuose. Ligonis epidemiologiškai pavojingas visą ligos laikotarpį, net sveikimo laikotarpiu į aplinką išskiria toksikogenines padermes.
Pagrindinis infekcijos mechanizmas yra aerozolis. Perdavimo maršrutai:
pagrindinis vaidmuo tenka orlaiviams,
kartais gali būti perduodami oro-dulkių, kontaktiniai-buitinių, taip pat maisto (per pieną) perdavimo keliai.
įėjimo vartai infekcijos yra burnos ir ryklės gleivinės (gomurinės tonzilės ir aplinkiniai audiniai), nosies, gerklų, trachėjos, taip pat akių ir lytinių organų gleivinės, pažeista oda, žaizdos ar nudegimo paviršius, neužgijusi bambos žaizda.
Dažniausias difterija ryklės ( 90-95%). Inkubacinis laikotarpis trunka nuo 2 iki 10 dienų. Difterijos patogenezė yra toksinų infekcijos kai mikrobas lieka prie infekcijos įėjimo vartų ir visos klinikinės apraiškos yra susijusios su egzotoksino veikimu.
Pradinis infekcinio proceso etapas yra mikrobo sukibimas įėjimo vartų vietoje. Ten daugindamasis mikrobas išskiria g istotoksino, kuris turi vietinį poveikį audinių ląstelėms, taip pat patenka į kraują, o tai sukelia toksinemiją.
Įėjimo vartų srityje išsivysto uždegiminė reakcija, kurią lydi epitelio ląstelių nekrozė ir edema, susidaro balta apnaša su pilkšvu arba gelsvu atspalviu, kurioje yra daug mikrobų, gaminančių toksiną.
Difterijos požymis yra fibrininė plėvelė:
Jei susidaro gleivinė vieno sluoksnio epitelis(gerklų, trachėjos, bronchų), atsiranda skilties uždegimas, čia plėvelė išsidėsčiusi paviršutiniškai ir lengvai atskiriama nuo apatinių audinių.
Jei susidaro gleivinė sluoksniuotas epitelis(burnos gerklės, antgerklio, balso stygų), atsiranda difterija kai visos ląstelės yra tvirtai sujungtos viena su kita ir su jais esančiu jungiamojo audinio pagrindu. Fibrininė plėvelė šiuo atveju yra tvirtai prilituota prie apatinių audinių ir nepašalinama tamponu. Kai bandote tai padaryti, gleivinė kraujuoja.
Imunitetas. Po ligos susidaro stabilus ir intensyvus humoralinis antitoksinis imunitetas. Imuniteto po vakcinacijos trukmė yra 3-5 metai.
Mikrobiologinė diagnostika.
Tyrimo medžiaga yra fibrininė plėvelė, gleivės iš gerklės ar nosies.
Medžiagos surinkimas turi būti atliktas per 3-4 valandas (ne vėliau kaip per 12 valandų) nuo paciento kontakto. Medžiagai paimti naudojami sausi vatos tamponai, jei sėjama per 2-3 val., transportuojant medžiagą, tamponai suvilgomi 5% glicerino tirpalu.
Diagnostikos metodai:
Pagrindinis diagnostikos metodas yra bakteriologinis. bakteriologinė laboratorija po 48 valandų turėtų pateikti atsakymą apie C. diphteriae buvimą ar nebuvimą analizėse.
Medžiaga sėjama ant maistinės terpės. Atrenkamos įtartinos kolonijos ir identifikuojama izoliuota kultūra:
Pagal cistinazės buvimą (Pisoux testas): tiriamoji kultūra pasėjama į maistinio agaro kolonėlę su cistinu. Kultūros inkubuojamos 37° C temperatūroje 24 valandas. Dėl C. diphteriae terpė injekcijos metu pajuoduoja dėl švino sulfido susidarymo.
Pagal ureazės buvimą (Sachso testas): paruošiamas karbamido alkoholio tirpalas ir indikatorinis tirpalas - fenolio raudonasis, kurie prieš naudojimą sumaišomi santykiu 1:9 ir supilami į agliutinacijos mėgintuvėlius. Tirtos bakterijos įvedamos kilpa ir trinamas išilgai tvarkingos sienelės. Teigiamas atveju, po 20–30 minučių inkubacijos 37 ° C temperatūroje, terpė pasidaro raudona dėl karbamido skilimo ureaze.
C. diphteriae gebėjimas gaminti toksiną (nustatomas agaro nusodinimo bandymu). Norėdami tai padaryti, į Petri lėkštelę su maistiniu agaru, kuriame yra 15-20% arklio serumo, 0,3% maltozės ir 0,03% cistino, dedama filtravimo popieriaus juostelė, suvilgyta antitoksiniame difterijos serume, kuriame yra 5000 AV/ml. Puodelis džiovinamas 37 0 C temperatūroje 30 min., o bandomieji kamienai pasėjami plokštelėmis 0,6-0,8 cm atstumu nuo popieriaus krašto. Inokuliacijos 24 valandas inkubuojamos 37 0 C. Teigiamu atveju terpėje susidaro nuosėdos baltų linijų – „antenų“ pavidalu toksino sandūroje su antitoksinu.
Norint nustatyti difterijos sukėlėjo toksiškumą, galima naudoti biologinis tyrimas. Jūrų kiaulytei į odą arba po oda suleidžiama tiriamoji kultūra. Toksogeninės kultūros gyvūnai numarina per 3-5 dienas, autopsijos metu nustatomi hipereminiai antinksčiai, o intraderminės infekcijos atveju – odos nekrozė.
Dėl bakterioskopinis tyrimas(kaip nepriklausomas diagnostikos metodas, jis retai naudojamas dėl patogeno polimorfizmo, tačiau gali būti atliekamas gydytojo prašymu) iš medžiagos ant kelių stiklinių ruošiami tepinėliai, vienas tepinėlis nudažomas pagal Gramą, kitas pagal Neisser, trečias apdorojamas fluorochromu - korifosfinu liuminescencinei mikroskopijai.
Antitoksinio imuniteto buvimas vertinamas pagal Schick reakciją – toksinų neutralizavimo antitoksinu reakciją. 1/40 DLM difterijos toksino suleidžiama į dilbio odą. Paraudimas ir patinimas injekcijos vietoje rodo, kad kraujyje nėra antitoksinų. Neigiamas Schick testas rodo antitoksinų buvimą.
Norėdami pagreitinti difterijos toksino nustatymą tiek bakterijų kultūrose, tiek kraujo serume, naudokite: RNGA su antikūnų eritrocitų diagnostika, RIA ir ELISA. Iš naudojamų molekulinių genetinių tyrimų metodų PGR.
Preparatai specifiniam difterijos gydymui.
Siekiant neutralizuoti difterijos histotoksiną, specifinis antidifterinis arklių išgrynintas koncentruotas serumas, kuris gaunamas hiperimunizuojant arklius difterijos antitoksinu.
Kliniškai įtarus difteriją, nedelsiant pradedamas specifinis gydymas antidifteriniu serumu. Būtina pasirinkti optimalų serumo vartojimo būdą, nes antitoksinas gali neutralizuoti tik su audiniais nesusijusį toksiną. Siekiant išvengti anafilaksinio šoko išsivystymo, serumas skiriamas dalimis pagal A.M. Bezredke. Serumo įvedimas vėliau nei 3 ligos dieną yra nepraktiškas.
Sukurta žmogaus difterijos imunoglobulinas intraveniniam vartojimui. Jo naudojimas sukelia mažiau šalutinių reakcijų.
Siekiant slopinti C. diphteriae dauginimąsi įėjimo vartų vietoje, antibiotikai yra privalomi. Pasirinkti vaistai yra penicilinas arba eritromicinas, arba kiti β-laktamai ir makrolidai.
Pasiruošimai dėl specifinė prevencija difterija.
Norėdami sukurti dirbtinį aktyvų antitoksinį imunitetą, kreipkitės difterijos toksoidas. Išgrynintas ir koncentruotas vaistas yra susijusių vakcinų dalis:
1. adsorbuota kokliušo, difterijos ir stabligės vakcina (DTP vakcina),
2. adsorbuotas difterijos ir stabligės toksoidas (ADS toksoidas),
3. adsorbuotas difterijos ir stabligės toksoidas su sumažintu antigenų kiekiu (ADS-M),
4. adsorbuotas difterijos toksoidas su sumažintu antigenų kiekiu (AD-M).
Vaikams bazinis imunitetas sukuriamas pagal skiepijimo kalendorių. Tik 95% gyventojų skiepijimo apimtis garantuoja skiepijimo efektyvumą.
Corynebacterium gentis .
Difterijos sukėlėjas yra Corynebacterium diphtheriae ir didelė grupė panašiomis morfologinėmis ir biocheminėmis savybėmis vadinami Corynebacteria genties mikroorganizmai korineforminės bakterijos arba difteroidai. Juos vaizduoja gramteigiami nejudantys strypai, dažnai su pastorėjimais galuose, primenantys kuodą (coryne - mace). Difteroidai yra plačiai paplitę dirvožemyje, ore, maisto produktai(pienas). Tarp jų galima išskirti tris ekologines grupes:
Žmonių ir gyvūnų patogenai;
augalų patogenai;
Nepatogeninės korinebakterijos.
Daugelis difteroidų tipų yra normalūs odos, ryklės gleivinių, nosiaryklės, akių, kvėpavimo takų, šlaplę ir lytinius organus.
Difterija .
Difterija yra ūminė infekcinė liga vaikystė, kuriai būdinga apsvaigimas organizmas difterijos toksinas ir būdingas fibrininis (difteritinis) uždegimas patogeno lokalizacijos vietoje (phther - plėvelė).
Morfologinės ir tinctorinės savybės. C. diphtheriae – plonos polimorfinės lazdelės, turinčios kuolo formos galus, dažnai turinčios volutino inkliuzų, aptinkamos dažant metileno mėlynuoju arba Neisserio dažais. Su pastarosiomis lazdelės nudažomos šiaudiškai geltonai, volutino (polimetafosfato) grūdeliai tamsiai rudi. Kultūrose lazdelės yra viena prieš kitą kampu (skilimo ypatybės), formuoja įvairias formas – išskėstus pirštus, V, Y, L ir kt. Jie turi mikrokapsulę, taip pat fimbrijas, kurios palengvina sukibimą su gleivinės epiteliu.
kultūros vertybių. Difterijos šaknų bakterijos paprastose terpėse neauga. Jiems reikia terpės su krauju arba kraujo serumu (Leffler, Roux media), ant kurių augimas pastebimas po 10-12 valandų, per tą laiką lydinti (užteršianti mėginius) mikroflora nespėja pilnai išsivystyti.
Pats optimaliausias telurito terpė ir telurito-McLeod šokolado agaras. Didelė kalio telurito koncentracija šiose terpėse slopina pašalinės floros augimą. Corynebacterium diphtheria teluritą paverčia metaliniu telūru, kuris suteikia jų kolonijoms tamsiai pilką arba juodą spalvą.
Šis patogenas gamina biotipai - gravis, mitis, intermedius, skiriasi morfologija, antigeninėmis ir biocheminėmis savybėmis, žmonių ligų sunkumu. Gravis tipas dažnai sukelia protrūkius ir sunkesnę eigą, jam būdingos didelės kolonijos su dantytais kraštais ir radialinis dryžuotumas ramunės pavidalu (R forma). Mitis tipas sukelia vyraujančias lengvas sporadines ligas, tankiose terpėse sudaro mažas lygias kolonijas su lygiais kraštais (S formos). Intermedius tipas užima tarpinę padėtį, tankioje terpėje jis sudaro RS formas, kurios yra pereinamojo pobūdžio, bet dar mažesnės. Ant skystos terpės sukelkite terpės drumstumą, susidarys trapios nuosėdos.
biochemines savybes. Corynebacterium diphtheria fermentuoja gliukozę, maltozę. Trūksta veiklos dėl sacharozės ir karbamido svarbu diferencialinis ženklas tarp difteroidų. Turėti cistenazės aktyvumas (skaldyti cisteiną) – Piso testas.
Antigeninė struktūra. Paskirstykite O ir K antigenus. Ląstelės sienelės O-antigenų polisacharidiniai komponentai turi tarpgenerinių savybių, sukelia nespecifines kryžmines reakcijas su mikobakterijomis, aktinomicetais (nokardija).
Paviršiaus K-antigenai yra kapsuliniai baltymai, turintys rūšies specifiškumas ir imunogeniškumas. Yra 11 serotipų. 1-5 ir 7 serotipai priklauso gravis biovarui. Kultūrų serotipų nustatymas atliekamas RA su diagnostiniai serumaiį atitinkamus serovarus ir poligrupes agliutinuojantį serumą.
Serologinėje diagnozėje žmonėms dažniau naudojama RPHA, kuri yra jautresnė nei RA. Šiuo metu taip pat naudojamas ELISA. Daugelis Corynebacterium diphtheria padermių (ypač netoksigeniškų) yra spontaniškai agliutinuojamos ir poliagliutinuojamos.
patogeniškumo veiksniai. Toksogeninės difterijos sukėlėjo padermės gamina stiprų egzotoksinas(termolabilus labai toksiškas imunogeninis baltymas). Netoksigeniškos padermės nesukelia ligų.
Toksinas sukelia negrįžtamą polipeptidinės grandinės pailgėjimo blokavimą, t.y. bet koks baltymų sintezė. Pažeidžiamos daugiausia tam tikros sistemos: simpatinė-antinksčių, širdies ir kraujagyslių, periferiniai nervai. Yra struktūriniai ir funkciniai miokardo sutrikimai, demielinizacija nervinių skaidulų sukeliantis paralyžių ir parezę.
Tik lizogeninės padermės, užkrėstos bakteriofagu (beta-fagu), turinčiu toksino struktūrą koduojančią toksino struktūrą (t.y. savo chromosomoje turinčios vidutinio stiprumo profago genus), rodo gebėjimą gaminti toksiną. Fagų tipavimas naudojamas corynebacterium diftheria padermėms atskirti.
Epidemiologija. Rezervuaras – žmogus (sergantis, sveikstantis, bakterijų nešiotojas). Pagrindinis perdavimo kelias – oru, sezoniškumas – ruduo-žiema. Sukėlėjas yra gerai išsilaikęs žemos temperatūros, išdžiūvusi būsena (seilės, gleivės, dulkės).
Klinikiniai ir patogenetiniai požymiai. Sukėlėjas įvedimo vietoje sukelia fibrininį uždegimą, kai susidaro fibrininė plėvelė, tvirtai prilituota prie audinių. Egzotoksino (aprašytas skyriuje „patogeniškumo veiksniai“) veikimas yra esminis sukeltai patologijai. Pagal lokalizaciją išskiriama burnos ryklės (dažniausiai), kvėpavimo takų, nosies ir retos lokalizacijos (akys, išoriniai lytiniai organai, oda, žaizdos paviršius) difterija. Ryklės difterija gali sukelti kruopas ir asfiksiją.
Laboratorinė diagnostika. Pagrindinis diagnostikos metodas yra bakteriologinis. Naudojamas pacientams, bakterijų nešiotojams, kontaktams identifikuoti. Steriliais tepinėliais paimama medžiaga mikroskopijai ir pasėliams – gleivės iš gerklės ir nosies, plėvelės iš tonzilių ir kitose vietose, įtariančiose dėl difterijos pažeidimų.
Sukėlėjas išskiriamas inokuliuojant ant selektyvios telurito terpės ir kraujo agaro. C.xerosis (galima lėtinio konjunktyvito priežastis) dažnai aptinkama ant akies gleivinės, C.pseudodiphtheriticum (Hofmanno bacila) nosiaryklėje, taip pat nustatomi kiti difteroidai.
Norint atskirti difterijos sukėlėją nuo difteroidų, reikia atsižvelgti į tokius rodiklius kaip gebėjimas redukuoti teluritą ir sudaryti tamsias kolonijas, Pisu testas, angliavandenių (gliukozės, maltozės, sacharozės) ir karbamido fermentacija, gebėjimas augti anaerobinėmis sąlygomis (tipiška). difterijos sukėlėjo) vartojami.
Privalomas žingsnis yra nustatyti kultūros toksiškumą. Labiausiai paplitę metodai yra biologiniai tyrimai su jūrų kiaulytėmis, agaro nusodinimo reakcija. ELISA su antitoksinu, genetiniais zondais ir PGR taip pat naudojama toksinio geno A fragmentui aptikti.
Gydymas. Naudojamas antitoksinis difterijos serumas, antibiotikai ir sulfainiai vaistai.
Poinfekcinis imunitetas- atsparus, daugiausia antitoksiškas. Dėl kiekybinis įvertinimas antitoksinio imuniteto lygis, anksčiau buvo naudojamas Schick testas (intraderminė toksino injekcija), dabar - RPHA su eritrocitų diagnostika, gauta jautrinant eritrocitus difterijos toksoidu.
Prevencija. Jis pagrįstas masine gyventojų imunizacija. Naudojami įvairūs preparatai, kurių sudėtyje yra difterijos toksoidų – DTP, ADS, ADS-M, AD ir AD-M.
Bordetella gentis . kokliušo
Bordetella yra mažos kokobacilės, kiaušinio formos lazdelės formos, gramneigiamos, nestabilios išorinė aplinka. Yra trys pagrindiniai tipai.
1. B.pertussis – kokliušo sukėlėjas – ūmi infekcinė liga, lydima gerklų, trachėjos ir bronchų uždegimų bei priepuolių kosulio.
2. B.parapertussis – parapertussis sukėlėjas.
3. B. bronchiseptica – į kokliušą panašios šunų, kačių ir triušių ligos sukėlėjas, gali sukelti žmonėms kvėpavimo takų ligos pagal SARS tipą (palyginti retai).
kultūros bruožai. Bordetella yra reikli aplinkai, ypač kokliušo sukėlėjui. Pirminiam šių hemofilinių mikroorganizmų išskyrimui naudojamas bulvių-glicerolio agaras, pridedant kraujo (Borde-Zhang terpė) arba kazeino-anglies agaras (CUA). Kraujo terpėje kokliušo sukėlėjas sukelia mažų metalinio atspalvio kolonijų susidarymą terpei patamsėjant, AMC - rusvai rudos kolonijos. Pagrindinės kolonijų formos – lygiosios (S) – vadinamoji I fazė (virulentinės kultūros) per tarpines formas pereina į šiurkščią (R) – IV fazę, kurią lydi kultūrinių, biocheminių ir antigeninių savybių pasikeitimas, virulentiškumas.
antigeninė sudėtis. Yra bendri (bendrieji) ir specifiniai (rūšiniai) antigenai. Specifiniai rūšiai yra somatiniai O-antigenai (agliutinogenai), aptikti sergant RA.
patogeniškumo veiksniai. Pagrindinis veiksnys yra termolabumas egzotoksinas baltyminio pobūdžio, su tropizmu nervų ir kraujagyslių sistema. Yra termostabili endotoksinas, kuris turi toksiškų ir jautrinančių savybių. Trachėjos citotoksinas sukelia blakstienų epitelio pažeidimus. Bakterijos gamina hialuronidazę, lecitinazę, plazmakoagulazę.
Epidemiologija. Infekcijos šaltinis sergant kokliušu ir parakokliušu yra pacientai, sergantys tipiniais ir ištrintos formos infekcijos. Infekcijos mechanizmas yra oru. Į kvėpavimo takų gleivinę patekęs sukėlėjas dauginasi, išskiria egzo- ir endotoksinus, nekrotizuoja gleivinę, dirgina kosulio receptorius ir kosulio centrą. pailgosios smegenys sukelia spazminius kosulio priepuolius.
Laboratorinė diagnostika. Sėjama naudojant „kosulio plokštelių“ metodą arba medžiaga paimama užpakalinės ryklės tamponu, sėjant ant Borde agaro - Zhangu ir AMC. Išskirtų kultūrų identifikavimas atliekamas pagal morfologines ir kultūrines savybes, taip pat RA su specifiniais serumais. Greitai diagnostikai ir identifikavimui naudojamas fluorescencinių antikūnų metodas.
Serologinei diagnostikai naudojami įvairūs metodai - RA, RSK, RPGA, tiriant suporuotus serumus, paimtus infekcinio proceso dinamikoje.
Gydymas. Gydymo centre antibiotikų terapija antibiotikai (gentamicinas, ampicilinas ir kt.).
Imunitetas ir imunoprofilaktika. Poinfekcinis imunitetas yra stabilus, specifinis rūšiai, dėl humoralinių ir ląstelinių veiksnių.
Vakcinacijai naudojamos negyvos I fazės bordetella. IN DTP vakcina yra kokliušo komponentas (20 mlrd. mikrobų kūnų/ml).