Функционални диагностични методи за изследване на заболявания на ендокринната система. Методи за изследване на пациенти с ендокринна патология Доцент от катедрата по пропедевтика на вътрешните болести Кардангушева A.M.
Ендокринната система или ендокринната система се състои от жлези вътрешна секреция, наречени така, защото отделят специфични продукти от своята дейност - хормони - директно във вътрешната среда на тялото, в кръвта. В тялото има осем от тези жлези: щитовидна, паращитовидна или гуша (тимус), хипофиза, епифиза (или епифиза), надбъбречна жлеза (надбъбречна жлеза), панкреас и полови жлези (фиг. 67).
Обща функция ендокринна системасе свежда до осъществяване на химична регулация в организма, установяване на връзка между неговите органи и системи и поддържане на техните функции на определено ниво.
Хормоните на ендокринните жлези са вещества с много висока биологична активност, тоест действат в много малки дози. Заедно с ензимите и витамините те принадлежат към така наречените биокатализатори. Освен това хормоните имат специфично действие – някои от тях влияят на определени органи, други контролират определени процеси в тъканите на тялото.
Жлезите с вътрешна секреция участват в процеса на растеж и развитие на тялото, в регулирането на метаболитните процеси, които осигуряват неговата жизнена дейност, в мобилизирането на силите на тялото, както и във възстановяването на енергийните ресурси и обновяването на неговите клетки и тъкани. По този начин, в допълнение към нервната регулация на жизнената дейност на тялото (включително по време на спорт), има ендокринна регулацияи хуморална регулация, тясно свързани помежду си и осъществявани по механизма на "обратната връзка".
Защото класове физическа култураи особено спортът изисква все по-съвършено регулиране и съотнасяне на дейността на различните системи и органи на човека трудни условияемоционален и физически стрес, изследването на функцията на ендокринната система, въпреки че все още не е станало широко разпространена практика, постепенно започва да заема все по-голямо място в цялостното изследване на спортиста.
Правилната оценка на функционалното състояние на ендокринната система ви позволява да идентифицирате патологичните промени в нея в случай на нерационална употреба упражнение. Под влияние на рационалната систематична физическа култура и спорт тази система се усъвършенства.
Адаптиране на ендокринната система към физическа дейностсе характеризира не само с повишаване на активността на ендокринните жлези, но главно с промяна в съотношението между отделните жлези. Развитието на умора дълга работапридружено и от съответните промени в дейността на ендокринните жлези.
Човешката ендокринна система, подобрявайки се под въздействието на рационално обучение, допринася за увеличаване на адаптивните възможности на тялото, което води до подобряване на спортните постижения, по-специално в развитието на издръжливостта.
Изследването на ендокринната система е трудно и обикновено се извършва в болнични условия. Но има редица прости методиизследвания, които позволяват в известна степен да се оцени функционалното състояние на отделните ендокринни жлези - анамнеза, преглед, палпация, функционални тестове.
анамнеза. Важни са данните за периода на пубертета. Когато разпитват жените, те установяват времето на началото, редовността, продължителността, обилността на менструацията, развитието на вторичните полови белези; при разпит на мъже - времето на поява на счупване на гласа, окосмяване по лицето и др. При по-възрастните хора - времето на настъпване на менопаузата, т.е. времето на спиране на менструацията при жените, състоянието на сексуалната функция при мъжете.
Информацията за емоционалното състояние е от съществено значение. Например бързи промени в настроението, раздразнителност, безпокойство, обикновено придружено от изпотяване, тахикардия, загуба на тегло, субфебрилна температура, умора, може да означава повишена функция на щитовидната жлеза. При намаляване на функцията на щитовидната жлеза се отбелязва апатия, която е придружена от летаргия, забавяне, брадикардия и др.
Симптомите на повишена функция на щитовидната жлеза понякога почти съвпадат със симптомите, които се появяват, когато спортистът е претрениран. Тази страна на историята трябва да бъде особено важна, тъй като спортистите имат случаи на повишена функция на щитовидната жлеза (хипертиреоидизъм).
Установете наличието на оплаквания, характерни за пациенти със захарен диабет - повишена жажда и апетит и др.
инспекция. Обърнете внимание на следните признаци: пропорционалността на развитието на отделните части на тялото при индивидите висок(има ли непропорционално увеличение на носа, брадичката, ръцете и краката, което може да показва хиперфункция на предния дял на хипофизата - акромегалия), за наличие на изпъкнали очи, изразен блясък на очите (наблюдава се при хипертиреоидизъм), подпухналост на лице (отбелязва се при хипотиреоидизъм), както и признаци като увеличена щитовидна жлеза, изпотяване или суха кожа, наличие на мазнини (преобладаващо отлагане на мазнини в долната част на корема, задните части, бедрата и гърдите е характерно за затлъстяването, свързано с дисфункция на хипофизата и половите жлези), бърза загуба на тегло (възниква при тиреотоксикоза, заболявания на хипофизната жлеза - болест на Simmonds и надбъбречните жлези - болест на Addison).
Освен това по време на прегледа се определя линията на косата на тялото, тъй като растежът на косата зависи до голяма степен от хормонални влиянияполови жлези, щитовидна жлеза, надбъбречни и хипофизни жлези. Наличието на окосмяване при мъжете, характерно за жените, може да показва липса на функция на половите жлези. Мъжкият тип линия на косата при жените може да бъде проява на хермафродитизъм - наличието в един индивид на признаци, характерни за двата пола (такива лица нямат право да спортуват).
Прекомерното окосмяване по тялото и крайниците, а при жените и по лицето (мустаци и брада) позволява да се подозира тумор на надбъбречната кора, хипертиреоидизъм и др.
палпация. От всички ендокринни жлези може да се подложи на директна палпация (както и проверка). щитовидната жлезаи мъжки полови жлези; гинекологичен преглед - женски полови жлези (яйчници).
функционални тестове. При изследването на функцията на ендокринните жлези се използват много такива тестове. Най-важните в спортната медицина са функционалните тестове, използвани при изследване на щитовидната жлеза и надбъбречните жлези.
Функционалните тестове при изследване на функцията на щитовидната жлеза се основават на изследването на метаболитните процеси, регулирани от тази жлеза. Хормонът на щитовидната жлеза - тироксинът стимулира окислителните процеси, участвайки в регулирането на различни видове метаболизъм (въглехидратен, мастен, йоден метаболизъм и др.). Следователно основният метод за изследване на функционалното състояние на щитовидната жлеза е определянето на основния метаболизъм (количеството енергия в килокалории, изразходвано от човек в състояние на пълна почивка), което е в пряка зависимост от функцията на щитовидната жлеза. и количеството секретиран от него тироксин.
Стойността на основния метаболизъм в килокалории се сравнява с правилните стойности, изчислени съгласно таблиците или номограмите на Харис-Бенедикт, и се изразява като процент от правилната стойност. Ако основният метаболизъм на изследвания спортист превишава дължимия с повече от + 10%, това предполага хиперфункция на щитовидната жлеза, ако е под 10% - нейната хипофункция. Колкото по-висок е процентът на излишък, толкова по-изразена е хиперфункцията на щитовидната жлеза. При значителен хипертиреоидизъм основната метаболитна скорост може да бъде по-голяма от +100%. Намаляването на основния метаболизъм с повече от 10% в сравнение с правилното може да означава хипофункция на щитовидната жлеза.
Функцията на щитовидната жлеза може да се изследва и с помощта на радиоактивен йод. Това определя способността на щитовидната жлеза да го абсорбира. Ако повече от 25% от въведения йод остава в щитовидната жлеза след 24 часа, това показва повишаване на нейната функция.
Функционалните тестове при изследване на надбъбречната функция дават ценни данни. Надбъбречните жлези имат различни ефекти върху тялото. Надбъбречната медула, освобождаваща хормони - катехоламини (адреналин и норепинефрин), комуникира между ендокринните жлези и нервна система, участва в регулирането на въглехидратния метаболизъм, поддържа съдовия тонус и сърдечната мускулатура. Надбъбречната кора отделя алдостерон, кортикостероиди, андрогенни хормони, които играят важна роля в живота на тялото като цяло. Всички тези хормони участват в минералния, въглехидратния, протеиновия метаболизъм и в регулацията на редица процеси в организма.
напрегнато мускулна работаподобрява функцията на надбъбречната медула. По степента на това увеличение може да се прецени ефектът от натоварването върху тялото на спортиста.
За определяне функционално състояниена надбъбречните жлези се изследва химичният и морфологичният състав на кръвта (количеството калий и натрий в кръвния серум, броят на еозинофилите в кръвта) и урината (определяне на 17-кетостероиди и др.).
При тренирани спортисти след натоварване, съответстващо на нивото им на подготовка, се наблюдава умерено повишаване на надбъбречната функция. Ако натоварването надвишава функционалните възможности на спортиста, хормоналната функция на надбъбречните жлези се потиска. Това се определя чрез специално биохимично изследване на кръв и урина. При надбъбречна недостатъчност минералът и обмен на вода: в кръвния серум нивото на натрий намалява и количеството на калий се увеличава.
Без перфектна, координирана функция на всички ендокринни жлези е невъзможно да се постигнат високи спортни резултати. Очевидно различни видовеСпортът е свързан с преобладаващо повишаване на функцията на различни жлези с вътрешна секреция, тъй като хормоните на всяка от жлезите имат специфично действие.
С развитието на качеството на издръжливостта основна роля играят хормоните, които регулират всички основни видове метаболизъм, с развитието на качествата на скоростта и силата важностима повишаване на нивото на адреналина в кръвта.
Неотложна задача на съвременната спортна медицина е изследването на функционалното състояние на ендокринната система на спортиста, за да се изясни нейната роля за подобряване на представянето му и предотвратяване на развитието на патологични променикакто в самата ендокринна система, така и в други системи и органи (тъй като дисфункцията на ендокринната система засяга тялото като цяло).
Федерална агенция за образование на Руската федерация
GOU VPO Башкирски държавен университет
Катедра по биология
Катедра по биохимия
Курсова работа
Методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния
Завършено:
5-ти курс на ОЗО
Група А
Усачев С. А.
Уфа 2010 г
Съдържание
Въведение………………………………………………………………………………4
1. Преглед на методите за изследване на ендокринната система
в норма и патология…………………………………………………………… …6
1.1. Кратка историческа справка…………………………………………...6
1.2. Преглед съвременни методиизследване на ендокринната система..12
1.3. Съвременни методи за изследване на ендокринната система
пример за изследване на щитовидната жлеза………………………………28
2. Проблеми и перспективи на методите за изследване на ендокринната
системи…………………………………………………………………………45
Заключение…………………………………………………………………………..58
Списък на използваната литература……………………………………………59
Списък на съкращенията, приети в работата
AOK - антитялообразуващи клетки
AG - антиген
АКТХ - адренокортикотропен хормон
HPLC - високоскоростна течна хроматография
GI - компенсаторна хиперинсулинемия
ДНК - дезоксирибонуклеинова киселина
LC - течна хроматография
ELISA - ензимен имуноанализ
IR - инсулинова резистентност
CT - компютърна томография
LH - лутеинизиращ хормон
МС - метаболитен синдром
MRI - ядрено-магнитен резонанс
PCR - полимеразна верижна реакция
RIA - радиоимуноанализ
DHRT - реакция на свръхчувствителност от забавен тип
SD 2 - диабет 2-ри тип
TSH - тиреоиден стимулиращ хормон
Т4 - тироксин
Т3 - трийодтиронин
TBG - тест за тироксин-свързващ глобулин
Ултразвук - ехография
FIA - флуоресцентен имуноанализ
CFD - цветно доплерово картографиране
ЦНС - централна нервна система
тиреоид - щитовидна жлеза
Въведение
През последните няколко години, в резултат на развитието на по-фини, чувствителни и специфични методи за определяне на хормони и други методи за изследване на ендокринната система при здраве и заболяване, клиничната ендокринология и биохимия до голяма степен се превърнаха от форма на изкуство в клон по приложна химия, физиология, физика и генетика. Този напредък стана възможен чрез въвеждането на Голям бройнай-новите и високотехнологични методи за изследване на ендокринната система, изолиране и последваща биологична и биохимична характеристика на различни високопречистени полипептидни хормони, стероиди, витамини, производни на малки полипептиди и аминокиселини, които се класифицират като хормони, както и получаване на хормони белязани с радиоактивни атоми с висока специфична активност.
Уместност на темата:
В момента, на прага на разбирането на най-скритите и мистериозни явления на живия организъм, най-важната задача е да се намерят най-надеждните, достъпни и високотехнологични методи за изследване. Новата ера на нанотехнологиите и високоспециализираните открития започва да дава своя принос в биологичната химия, която отдавна използва методи не само за химичен анализ, но и най-модерните технологии от всички клонове на физиката, компютърните науки, математиката и други науки. Времето диктува своите условия на човечеството - да опознае по-дълбоко, да опознае задълбочено, да открие причината за процесите, протичащи в живия организъм в нормални и патологични условия. Търсенето на нови методи за изследване не спира и ученият просто няма време да обобщи, систематизира тази област на знанието, да подчертае това, от което се нуждае в момента. Освен това, когато изучавах проблема с изследването на ендокринната система, не намерих достатъчно пълно, обобщаващо ръководство по тази тема. много изследователи, по-специално биохимиците, са изправени пред такъв проблем като търсенето и систематизирането на съвременни методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния. Това се дължи преди всичко на факта, че ежедневно се появяват нови източници на литература, нови методи на изследване, но няма нито едно ръководство за изследователски методи, което да систематизира данните за методите. Именно поради тези причини актуалността на избраната от мен тема е много голяма.
Обективен:
Систематизиране на данните за състоянието на методите за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния в съвременния свят.
Задачи:
- Направете исторически преглед на темата.
Отразете текущите познания за методите за изследване на ендокринната система, без Подробно описаниеизследователски методи и техники.
Опишете методите за изследване на примера на една ендокринна жлеза.
Да се подчертаят проблемите и перспективите на съвременните методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния.
1. Преглед на методите за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния
1.1. Кратък исторически очерк
Изследването на ендокринната система и самата ендокринология са сравнително ново явление в историята на науката. Ендокринната система е била недостъпна част от човешкото тяло до началото на 20 век. Преди това изследователите не можеха да разгадаят тайните на ендокринните образувания поради факта, че не можеха да изолират и изследват течностите, които отделят („сокове“ или „тайни“). Учените не са открили никакви "сокове" или специални отделителни канали, през които обикновено изтича произведената течност. Следователно единственият метод за изследване на функциите на ендокринната жлеза е методът на изрязване на част или на целия орган.
Учени - историци твърдят, че органите на ендокринната система на Изток са били известни още в древни времена и с уважение ги наричат "жлези на съдбата". Според източните лечители тези жлези са приемници и преобразуватели на космическа енергия, изливаща се в невидими канали (чакри) и поддържаща жизнеността на човека. Смятало се, че добре координираната работа на "жлезите на съдбата" може да бъде разстроена от катастрофи, които се случват по волята на злата съдба.
Споменаването на болестта, най-вероятно диабет, се съдържа в египетските папируси от 1500 г. пр.н.е. Гушата и ефектите от кастрацията при животни и хора принадлежат към първите клинични описания на заболявания, чиято ендокринна природа впоследствие е доказана. Стари клинични описания ендокринни заболяванияса правени не само на Запад, но и в древен Китай и Индия.
Ако във времето организираме значителни открития в много области на ендокринологията, тогава получената картина ще отразява в миниатюра историята на цялата биология и медицина. След откъслечни клинични наблюдения, направени през античността и средновековието, тези науки напредват изключително бавно. През втората половина на 19-ти век се наблюдава бърз скок в развитието на много области на медицината, както по отношение на качеството на клиничните изследвания, така и по отношение на разбирането на механизмите на заболяването. Този процес се дължи на сложността на връзката на историческите причини.
Първо, индустриалната революция доведе до натрупване на капитал, който беше използван за развитието на много науки, главно химия и биология.
Друга революция, настъпила през втората половина на 19 век и имаща фундаментално значение за развитието не само на ендокринологията, но и на медицината и биологията, е появата на експерименталното моделиране на животни. Клод Бернар и Оскар Минковски демонстрираха възможността за провеждане на контролирани и възпроизводими експерименти в лабораторията. С други думи, създаде се възможността за "кръстосан разпит" на природата. Без работата на тези пионери щяхме да сме лишени от повечето съвременни знания в областта на ендокринологията. Изследването на всички онези вещества, които се наричат хормони, започва с експерименти върху цели животни (и често предшествани от наблюдения върху болни хора). Тези вещества бяха наречени вещество "X" или фактор "?". Постулатите на "Кох" за ендокринология предвиждат следния ред на работа:
1. Отстраняване на предполагаемата жлеза.След отстраняването на всяка ендокринна жлеза възниква комплекс от нарушения, дължащи се на загубата на регулаторните ефекти на тези хормони, които се произвеждат в тази жлеза. Поради травмата от операция вместо хирургично отстраняване ендокринна жлезаможе да се използва въвеждането на химикали, които ги нарушават хормонална функция. Например, прилагането на алоксан при животни нарушава функцията на β-клетките на панкреаса, което води до развитие на захарен диабет, чиито прояви са почти идентични с нарушенията, наблюдавани след екстирпация на панкреаса. един
2. Описание на биологичните ефекти от операцията.Например, предположението, че панкреасът има ендокринни функции, беше потвърдено в експериментите на И. Меринг и О. Минковски (1889), които показаха, че отстраняването му вкучета води до тежка хипергликемия и глюкозурия; животните умират в рамките на 2-3 седмици. след операция на фона на симптоми на тежък захарен диабет. Впоследствие беше установено, че тези промени се дължат на липса на инсулин, хормон, произвеждан в островния апарат на панкреаса.
3. Въвеждане на екстракт от жлеза.
4. Доказателство, че приложението на екстракта премахва симптомите на липса на жлеза.
5. Изолиране, пречистване и идентифициране на активния компонент.
По време на Втората световна война в областта на ендокринологията се натрупват голям бройданни, много от които са от фундаментално значение за последващото развитие на науката. След войната, във връзка с появата на много нови методи, се наблюдава безпрецедентно ускоряване на темпото на изследване. И сега, в резултат на рязък приток на технически и творчески сили, броят на публикациите, както в ендокринологията, така и във всички други аспекти на биомедицинските знания, нараства с впечатляваща скорост. Това означава постоянен поток от нови данни, което изисква периодично преразглеждане на стари идеи в тяхната светлина. 2
20-ти век е белязан от раждането на науката за хормоните или ендокринологията. Самата дума "хормон" е въведена през 1905 г. от британския физиолог професор Ернст Старлинг на лекция в Кралския колеж на лекарите в Лондон. Създадена е от двама професори в университета в Кеймбридж от гръцката дума хормао, което означава „бързо да се задейства“, „повдига“ или „възбужда“. Старлинг го използва, за да опише "химическите носители", освободени в кръвта от жлезите с вътрешна секреция или ендокринните жлези (ендон - вътрешен + крино - за производство), например тестисите, надбъбречните жлези и щитовидната жлеза, както и от външни , екзокринни (екзо - външни) жлези като слюнчените и слъзните жлези. Тази нова наука се разви много бързо, вълнувайки умовете не само на лекарите, но и на обществото.
По правило историята на изследването на всеки хормон преминава през четири етапа.
Първо, има ефект, който секретът, секретиран от жлезата, произвежда върху тялото.
На второ място, разработват се методи за определяне на вътрешната секреция и степента на нейното въздействие върху организма. Първо, това се прави чрез биологични тестове за определяне на ефекта на хормона върху организъм, в който има дефицит. По-късно инсталиран химични методитакова измерване.
Трето, хормонът се изолира от жлезата и се изолира.
И накрая, четвърто, структурата му се определя от химиците и се синтезира. 3
В днешно време изследователите, които започват с наблюдения на нивото на целия организъм, имат все повече въпроси, докато работата им напредва, докато се опитат да разрешат първоначалния проблем на молекулярно ниво. Тук биологичната химия и нейният клон, молекулярната биология (ендокринология), поемат ендокринологичните изследвания.
Щом се появят нови морфологични, химични, електрофизиологични, имунологични и други методи, те намират много бързо приложениев ендокринологията. Например през 30-те и 40-те години са използвани много сложни методи за изследване на стероиди. Това доведе до голям напредък в разбирането на структурата и биосинтезата на стероидните хормони. Възможността за използване на радиоактивни изотопи, появила се в края на 40-те и 50-те години на миналия век, разшири познанията ни за много аспекти на йодния цикъл, междинния метаболизъм, йонния транспорт и др. Да се изследва функционалната активност на ендокринната жлеза, нейната способност да улавя от кръвта и натрупват определено съединение. Известно е например, че щитовидната жлеза активно абсорбира йод, който след това се използва за синтеза на тироксин и трийодтиронин. При хиперфункция на щитовидната жлеза се увеличава натрупването на йод, при хипофункция се наблюдава обратен ефект. Интензивността на натрупване на йод може да се определи чрез въвеждане на радиоактивния изотоп 131I в тялото, последвано от оценка на радиоактивността на щитовидната жлеза. Съединения, които се използват за синтеза на ендогенни хормони и са включени в тяхната структура, също могат да бъдат въведени като радиоактивен етикет. Впоследствие е възможно да се определи радиоактивността на различни органи и тъкани и по този начин да се оцени разпределението на хормона в тялото, както и да се намерят неговите целеви органи.
По-късно, комбинация от електрофореза с полиакриламиден гел с авторадиография беше използвана творчески за изследване на много протеини, включително хормонални рецептори. Едновременно с този впечатляващ напредък в химията, използването на хистохимични, имунохистохимични и електронни микроскопски методи се оказа още по-плодотворно.
Всички варианти на хроматография - колонна, тънкослойна, хартиена, многоизмерна, газо-течна (с или без масспектрометрия), високоефективна течна - бяха използвани от ендокринолозите веднага след появата им. Те направиха възможно получаването на важна информация не само за аминокиселинната последователност на пептидите и протеините, но и за липидите (особено простагландините и свързаните с тях вещества), въглехидратите и амините.
С развитието на молекулярно-биологичните методи на изследване ендокринолозите бързо ги прилагат за изследване на механизмите на действие на хормоните. В момента методът на рекомбинантната ДНК се използва не само за тази цел, но и за производството на протеинови хормони. Наистина е трудно да се назове биохимичен или физиологичен метод, който да не бъде възприет от ендокринолозите. четири
1.2. Преглед на съвременните методи за изследване на ендокринната система
При изследване на пациенти със съмнение за ендокринна патология, в допълнение към събирането на анамнеза за заболяването, изследване и оплакване на пациента, се използват следните диагностични методи: общи лабораторни методи (клинични и биохимични), хормонални изследвания, инструментални методи, молекулярно-генетични методи.
В повечето случаи хормонално изследванеима не ключ, а проверяваща стойност за диагнозата. За диагностицирането на редица ендокринни заболявания изобщо не се използва хормонално изследване (безвкусен диабет и захарен диабет); в някои случаи хормоналното изследване има диагностична стойност само в комбинация с биохимични параметри (ниво на калций при хипертиреоидизъм).
Хормоналното изследване може да разкрие намаляване на производството на определен хормон, повишаване и нормалното му ниво (Таблица 1). Най-често използваните методи за определяне на хормоните в клиничната практика са различни модификации. радиоимунен метод
. Тези методи се основават на факта, че хормонът, маркиран с радиоактивен етикет, и хормонът, съдържащ се в тестовия материал, се конкурират помежду си за свързване със специфични антитела: колкото повече този хормон се съдържа в биологичния материал, толкова по-малко белязани хормонални молекули ще се свързват, тъй като броят на местата за свързване на хормони в пробата е постоянен. Преди повече от 20 години Berson и Yalow предложиха радиоимунен метод за определяне на инсулин.
Този метод се основава на тяхното наблюдение, че протеин (по-късно доказано, че е глобулин), който свързва белязан с 131I инсулин, присъства в периферната кръв на пациенти с диабет, лекувани с инсулин. Значението на тези открития и последващото развитие на радиоимуноанализ за откриване на инсулин се подчертава от присъждането на Нобелова награда на Yalow и Berson.
Скоро след първите доклади на тези изследователи други лаборатории разработиха и описаха подходящи методи за определяне на други хормони. Тези методи използват или антитела, или серумни протеини, които свързват специфичен хормон или лиганд и носят радиоактивен метхормон, който се конкурира със стандартния хормон или хормон, присъстващ в биологичната проба.
Принцип радиорецепторен метод
по същество същото като радиоимуноанализа, само че хормонът, вместо да се свързва с антитела, се свързва със специфичен хормонален рецептор плазмената мембранаили цитозол. Специфични рецептори за повечето полипептидни хормони са разположени на външната повърхност на плазмената мембрана на клетките, докато рецепторите са биологично активни стероиди, както и тироксин и трийодтиронин – в цитозола и ядрата. Чувствителността на радиорецепторния анализ е по-ниска от тази на радиоимуноанализа и повечето биологични методи в in vitro системи. За да взаимодейства с рецептора си, хормонът трябва да има подходяща конформация, т.е. да бъде биологично активен. Възможна е ситуация, при която хормонът губи способността си да се свързва с рецептора си, но продължава да взаимодейства с антителата в системата за радиоимуноанализ. Това несъответствие отразява факта, че антителата и рецепторите "разпознават" различни части от молекулата на хормона.
Предложени са редица радиорецепторни методи за хормонален анализ. Обикновено се получава тъкан от орган, специфичен за даден хормон и от нея се изолират рецептори по стандартни техники. Изолираните рецептори на плазмената мембрана в седимента са относително стабилни, когато се съхраняват при температури под -20°C. Въпреки това, разтворените рецептори за полипептидни и стероидни хормони, изолирани от плазмени мембрани или от цитозола и несвързани с лиганди, се оказват нестабилни, което се проявява чрез намаляване на способността им да свързват специфични хормони, дори ако са били съхранявани замразени за известно време относително кратко време.
Наскоро най-разпространениполучени нерадиоактивни методи. Като стандартен метод за определяне на различни съединения в клиничната химия, имуноанализ
, характеризиращ се с добра чувствителност, специфичност и широк обхват. По-специално, имуноанализът се използва за определяне на хормоните. Тези методи включват:
- 1) ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA), твърдофазен ELISA тип ELISA или хомогенен ELISA тип EMIT.
- 2) флуоресцентен имуноанализ (FIA), базиран на измерване на усилване, потушаване или поляризация на флуоресценцията или на изследване на флуоресценция с времева разделителна способност.
- 3) био- или хемилуминесцентен имуноанализ.
1) да бъдат приложими както за двуместен имунометричен анализ на протеини, така и за директни конкурентни анализи на хаптени, базирани на принципа на свързване.
2) имат подходящата чувствителност, точност и работен диапазон на определените концентрации с минимално разсейване на резултатите в целия диапазон.
3) лесно се подобрява, за да се увеличи допълнително чувствителността и да се опрости анализа.
Потенциално методът трябва да може да бъде подобрен и приложен за анализи на други вещества, извънлабораторни и безразборни анализи, както и за едновременно определяне на няколко вещества (т.нар. множествен имуноанализ). Идеалните методи за имуноанализ в най-голяма степен съответстват на луминесцентни или фотоемисионни методи, при които откриването на етикета се извършва чрез регистриране на светлинна емисия.
Луминесценцията е излъчване на светлина от вещество в електронно възбудено състояние. Има няколко вида луминесценция, различаващи се само по източниците на енергия, която прехвърля електроните във възбудено състояние, т.е. към по-високо енергийно ниво, а именно:
1) Радиолуминесценция, при които възбуждането на съответния флуорофор се постига чрез поглъщане на енергията, освободена в процеса на необратим радиоактивен разпад. Възбуден флуорофор излъчва светлина, връщайки се в основното си състояние.
2) Хемилуминесценция, при които възбуждането се постига в резултат на химическа реакция (обикновено необратима реакция на окисление). Ако химическа реакциясе извършва в биологични системи под действието на ензими, в този случай обикновено се използва терминът биолуминесценция. Ако химическа реакция се инициира от повишаване на температурата на реагентите, тогава този тип луминесценция се нарича термохемилуминесценция, но ако реакцията се инициира от електрически потенциал, тогава съответното явление се нарича електрохемилуминесценция.
3) Фотолуминесценция, при които възбуждането се причинява от фотони на инфрачервена, видима или ултравиолетова светлина. Фотолуминесценцията може допълнително да се подраздели на флуоресценция, когато възбудена молекула бързо се връща в първоначалното си състояние чрез синглетно състояние, и фосфоресценция, когато възбудена молекула се връща в първоначалното си състояние чрез триплетно състояние. Фосфоресцентната емисия се разпада много по-бавно. Излъчваните светлинни кванти имат голяма дължина на вълната. Фотолуминесценцията се различава от радио- и хемилуминесценцията по това, че обикновено е обратима и следователно може да бъде индуцирана многократно в тази система (тъй като образуването на възбуден междинен продукт и последващото му инактивиране чрез излъчване на светлина не водят до химични трансформации).
В допълнение към тези методи, химичните методи за определяне на редица вещества (обикновено метаболити на хормони и техните прекурсори) не са загубили напълно своето значение. Често се използва за пречистване на протеинови фракции и изследване на хормони хроматография . Течната хроматография се използва широко като бърз и селективен аналитичен метод за разделяне и идентифициране на различни вещества. Течна хроматография (LC) в него класическа версия(при атмосферно налягане) и високоскоростен, или HPLC при високо кръвно налягане- оптималният метод за анализ на химически и термично нестабилни молекули, макромолекулни вещества с намалена летливост, което се обяснява със специалната роля на подвижната фаза: за разлика от газообразния елуент, в LC той изпълнява не само транспортна функция. Природата и структурата на компонентите на подвижната фаза контролират хроматографското поведение на веществата, които трябва да се разделят. Сред най-типичните обекти на течната хроматография са протеини, нуклеинови киселини, аминокиселини, багрила, полизахариди, експлозиви, лекарства, растителни и животински метаболити. Течната хроматография от своя страна се разделя на течно-адсорбционна (разделянето на съединенията се дължи на тяхната различна способност да адсорбират и десорбират от повърхността на адсорбента), течност-течност или разпределение (разделянето се извършва поради различна разтворимост в подвижната фаза - елуент и стационарна фаза, физически адсорбирана или химически присадена към повърхността на твърд адсорбент), йонообменна хроматография, където се постига разделяне поради обратимото взаимодействие на анализираните йонизиращи се вещества с йонните групи на сорбента - йонообменник. Специално място в използването на методите на течна хроматография в медицината заемат изключването на размера, или гелната хроматография, и афинитетната, или биоспецифичната. Тази версия на LC се основава на принципа за разделяне на смес от вещества според техните молекулни тегла. При хроматографията с изключване на размера (от английски exclusion - изключение; остарялото наименование е сито) молекулите на веществата се разделят по размер поради различната им способност да проникват в порите на сорбента. Подвижната фаза е течност, а неподвижната фаза е същата течност, която е запълнила порите на сорбента (гела). Ако тези пори не са достъпни за молекулите на аналита, тогава съответното съединение ще напусне колоната по-рано от това с по-малки молекулни размери. Молекулите или йоните, чиито размери са между максималния и минималния диаметър на порите на гела, се разделят на отделни зони. Хроматографията с изключване по размер получи особено интензивно развитие през последните две десетилетия, което беше улеснено от въвеждането на Sephadex, декстранови гелове, омрежени с епихлорхидрин, в химическата и биохимичната практика. Различни видове Sephadex могат да се използват за фракциониране на химикали с различно молекулно тегло, така че те се използват широко за изолиране и пречистване на биополимери, пептиди, олиго- и полизахариди, нуклеинови киселини и дори клетки (лимфоцити, еритроцити), в промишлено производстворазлични протеинови препарати, по-специално ензими и хормони. 5 Афинитетната хроматография се характеризира с изключително висока селективност, присъща на биологичните взаимодействия. Често една хроматографска процедура може да пречисти желания протеин хиляди пъти. Това оправдава усилията, изразходвани за получаването на афинитетен сорбент, което не винаги е лесна задача поради опасността биологичните молекули да загубят способността си да взаимодействат специфично по време на ковалентното им свързване към матрицата. 6
При изследване на функционалното състояние на ендокринните жлези се използват следните методологични подходи:
1. Определяне на първоначалното ниво на определен хормон.
2. Определяне на нивото на хормона в динамика, като се вземе предвид циркадният ритъм на секреция.
3. Определяне на нивото на хормона в условията на функционален тест.
4. Определяне на нивото на хормоналния метаболит.
Таблица 1. Патогенеза на ендокринни заболявания 7
Най-често в клиничната практика се използва определянето на базалното ниво на определен хормон. Обикновено кръвта се взема на празен стомах сутрин, въпреки че приемът на храна не влияе върху производството на много хормони. За да се оцени активността на много ендокринни жлези (щитовидна, паращитовидна), е напълно достатъчна оценка на базалното ниво на хормоните. При определяне на базалното ниво на хормона могат да възникнат определени трудности поради циркулацията в кръвта на няколко молекулярни форми на същия хормон. На първо място, това се отнася за паратироидния хормон.
Повечето хормони циркулират в кръвта, свързани с протеини-носители. По правило нивото на свободния, биологично активен хормон в кръвта е десетки или стотици пъти по-ниско от общото ниво на хормона.
Нивата на повечето хормони имат характерна дневна динамика (циркаден секреционен ритъм), като много често тази динамика придобива клинично значение. Най-важна и показателна в това отношение е динамиката на продукцията на кортизол (фиг. 1.1). осем
Други примери в това отношение са пролактинът и растежният хормон, чийто ритъм на секреция също се определя от цикъла сън-бодърстване. Патогенезата на редица ендокринни заболявания се основава на нарушение на дневния ритъм на производство на хормони.
В допълнение към циркадния ритъм повечето биологични параметри могат да бъдат отразени в нивото на хормоните в кръвта. За много хормони референтните показатели до голяма степен зависят от възрастта (фиг. 1.2) 9, пола, фазата на менструалния цикъл.
Нивото на редица хормони може да бъде повлияно не само от съпътстващи соматични заболявания и лекарства, приемани за тях, но и от фактори като стрес (кортизол, адреналин), екологични особености (нива на тироксин в региони с различно потребление на йод), състав храна, приета предния ден (С-пептид) и много други.
Основният принцип за оценка на активността на зависимите от хипофизата (щитовидна жлеза, надбъбречна кора, гонади) и редица други ендокринни жлези е определянето на така наречените диагностични двойки хормони. В повечето случаи производството на хормони се регулира чрез механизъм на отрицателна обратна връзка. Обратната връзка може да се осъществи между хормони, принадлежащи към една и съща система (кортизол и ACTH), или между хормони и техния биологичен ефектор (паратироиден хормон и калций). В допълнение, между хормоните, които съставляват една двойка, не трябва непременно да има пряко взаимодействие. Понякога се медиира от други хуморални фактори, електролити и физиологични параметри (бъбречен кръвен поток, нива на калий и ангиотензин за двойката ренин-алдостерон). Изолираната оценка на показателите, които съставляват една двойка, може да доведе до погрешно заключение.
Въпреки усъвършенстването на методите за хормонален анализ, функционалните тестове все още имат голяма диагностична стойност при диагностицирането на ендокринопатии. Функционалните тестове се делят на стимулационни и супресивни (потискащи). Общият принцип на провеждане на тестове е, че тестовете за стимулация се предписват, ако се подозира недостатъчност на ендокринната жлеза, и супресивни тестове се предписват, ако се подозира нейната хиперфункция.
Наред с оценката на нивото на хормоните в кръвта, в някои случаи определена диагностична стойност може да има определянето на тяхната екскреция в урината. Диагностичната стойност на тези изследвания, като определяне на екскрецията на свободен кортизол, е значително по-малка от тази на съвременните функционални тестове. По същия начин използването на тестове за екскреция на хормонални метаболити вече е почти напълно изчезнало, като единственото изключение е определянето на катехоламиновите метаболити за диагностициране на феохромоцитом.
През последните години напълно автоматизираните методи за хормонално изследване станаха широко разпространени, което позволява да се намали броят на грешките като неправилно вземане на кръвни проби, съхранение, доставка и други „човешки фактори“.
от инструментални методиИзследванията най-често използват ултразвук (ултразвук), радиография, компютърна томография (CT) и ядрено-магнитен резонанс (MRI). Освен това в ендокринологията, специални методи: ангиография със селективно вземане на кръв от ендокринната жлеза, радиоизотопно изследване (сцинтиграфия на щитовидната жлеза), костна денситометрия. Основните инструментални методи, използвани за изследване на ендокринните жлези, са представени в таблица 2.
Молекулярно-генетични методи на изследване.
Бурното развитие на науката през последните няколко десетилетия и изследванията в областта на молекулярната биология, медицинската генетика, биохимията, биофизиката, тясно свързани с микробиологията, имунологията, онкологията, епидемиологията и др., доведоха до създаването и активното внедряване в практиката на диагностични лаборатории за молекулярно-биологични методи за изследване на генома на човека, животни, растения, бактерии и вируси. Тези методи най-често се наричат ДНК изследвания.
Методите за изследване на ДНК позволяват ранна и по-пълна диагностика на различни заболявания, навременна диференциална диагноза и проследяване на ефективността на терапията. Активното развитие на методите за ДНК диагностика и тяхното въвеждане в практиката предполага, че не е далеч моментът, когато тези методи значително ще стеснят обхвата на задачите на по-традиционните диагностични изследвания, като цитогенетиката, и може би дори ще ги изместят от практическата медицина в научна област.
Таблица 2. Основни инструментални методи
изследвания на жлезите с вътрешна секреция 10
В момента има две посоки на ДНК диагностика: хибридизационен анализ на нуклеинови киселини и диагностика с помощта на полимеразна верижна реакция.
PCR незабавно беше въведен в практиката, което направи възможно издигането на медицинската диагностика на качествено ново ниво. Методът стана толкова популярен, че днес е трудно да си представим работа в областта на молекулярната биология без използването му. Особено бързо развитие PCR методполучена благодарение на международната програма "Човешки геном". Създадени са съвременни технологии за секвениране (дешифриране на ДНК нуклеотидни последователности). Ако в близкото минало дешифрирането на ДНК от 250 базови двойки (bp) отне седмица, съвременните автоматични секвенсори могат да определят до 5000 bp. на ден. Това от своя страна допринася за значителното нарастване на базите данни, съдържащи информация за нуклеотидните последователности в ДНК. В момента са предложени различни модификации на PCR, описани са десетки различни приложения на метода, включително "дълъг PCR", който позволява копиране на изключително дълги ДНК последователности. За откриването на PCR К. В. Мълис получава Нобелова награда за химия през 1993 г.
Всички подходи за генна диагностика могат да бъдат разделени на няколко основни групи:
1. Методи за идентифициране на определени ДНК сегменти.
2. Методи за определяне на първичната нуклеотидна последователност в ДНК.
3. Методи за определяне съдържанието на ДНК и анализ на клетъчния цикъл. единадесет
PCR дава възможност да се намери в тестовия материал малка част от генетична информация, съдържаща се в специфична последователност от ДНК нуклеотиди на всеки организъм сред огромен брой други ДНК секции и да се умножи многократно. PCR е "ин витро" аналог на биохимичната реакция на синтеза на ДНК в клетката.
PCR е цикличен процес, във всеки цикъл от който настъпва термична денатурация на двойната верига на целевата ДНК, последвана от добавяне на къси олигонуклеотидни праймери и тяхното удължаване с помощта на ДНК полимераза чрез добавяне на нуклеотиди. В резултат на това се натрупват голям брой копия на оригиналната целева ДНК, които лесно се откриват.
Откриването на PCR доведе до незабавно практическо използване на метода. През 1985 г. е публикувана статия, която описва тестова система за диагностика на сърповидно-клетъчна анемия, базирана на PCR. От 1986 г. повече от 10 000 научни публикации са посветени на PCR. Перспективите за използването на PCR изглеждат повече от впечатляващи. 12
Цитохимични методи за изследване.
Тези методи са варианти на описаните in vitro биологични анализи. Те обикновено са по-чувствителни от методите за радиоимунологичен анализ, но са много по-тромави и скъпи за определяне. Резултатите от цитохимичните биологични изследвания се определят количествено чрез хистологични срезовес помощта на специално устройство - микроденситометър.
Хистологичните срезове се приготвят от прицелни тъкани или клетки, специфични за даден хормон, предварително изложени на различни концентрации на стандартния и тестовия хормон. С помощта на денситометър се сканира област с диаметър 250 - 300 nm, за да се определи количествено цветната реакция поради промяна в редокс състоянието на обекта под въздействието на хормонална стимулация. За количествен анализ се използват хистологични багрила, чувствителни към тези промени.
Първата система за цитохимичен биологичен анализ е разработена за ACTH и надбъбречната кора служи като целева тъкан в тази система. Други методи за биологично определяне на ACTH са или твърде нечувствителни, или изискват големи плазмени обеми. По този начин цитохимичното определяне на редокс състоянието на тъканта е ценен инструмент за анализиране на нормалната и променена функция на хипоталамус-хипофиза-надбъбречна система по отношение на нивата на ACTH.
Разработен е и цитохимичен метод за определяне на LH, но са възникнали значителни трудности поради значителни колебания в резултатите от различните определяния и променливата чувствителност на обекта, което вероятно отразява известни биологични несъответствия при различни животни. Предложени са чувствителни специфични цитохимични методи за определяне на паратироиден хормон, ADH и тиротропин.
С по-нататъшно усложняване на оборудването, което ще увеличи броя на изследванията в една дефиниция, този метод може да се използва по-широко. Той е особено привлекателен, защото не изисква използването на радиоактивни съединения. Цитохимичните методи не се използват широко в клиниката и се използват предимно като чувствителен метод в научните изследвания. 13
1.3. Съвременни методи за изследване на ендокринната система на примера на изследването на щитовидната жлеза
В моята ограничена по обем работа ще разгледам съвременните методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния, като използвам примера за изследване на ендокринната жлеза, което е от значение поради широкото разпространение на заболяванията на щитовидната жлеза в Република Башкортостан .
1. Ултразвуково изследване.
Ултразвукът позволява да се проверят доста субективни данни от палпацията. Оптимални за изследване са сензори с честота 7,5 MHz и 10 MHz. Понастоящем цветният доплер се използва за визуализиране на малки съдове в щитовидната жлеза и предоставяне на информация за посоката и средната скорост на потока. Възможностите на метода зависят от опита и квалификацията на специалиста, провеждащ изследването. Принципът на метода е, че ултразвукът, изпратен чрез чести импулси, прониква в човешките органи, отразява се на границата между среди с различно ултразвуково съпротивление, възприема се от устройството и се възпроизвежда на екрана и ултравиолетовата хартия. Методът е безвреден и няма противопоказания (фиг. 1.3).
Фиг.1.3. Ултразвук на щитовидна жлеза.
Сега също широко използван комплекс ултразвукова процедураизползвайки цветно доплерово картографиране (CDC), (фиг. 1.4). 14
Ориз. 1.4. AIT с възли на щитовидната жлеза в режим CDI.
2. Тънкоиглена пункционна биопсия на щитовидна жлеза.
Тънкоиглената биопсия на щитовидната жлеза е единственият предоперативен метод за директна оценка структурни промении установяване на цитологични параметри на образувания в щитовидната жлеза. Ефективността на получаване на адекватен цитологичен материал с тънкоиглена пункционна биопсия се увеличава значително, ако тази диагностична процедура се извършва под ултразвуков контрол, което позволява да се идентифицират най-променените области на щитовидната жлеза, както и да се избере оптималната посока и дълбочина на пробиване. петнадесет
3. Цитологично изследване.
Цитологичната диагностика на образуванията в щитовидната жлеза се основава на комбинация от определени признаци, като количеството на получения материал, неговия клетъчен състав, морфологичните характеристики на клетките и техните структурни групи, качеството на цитонамазката и др.
4. Радиоизотопно изследване (сканиране), сцинтиграфия.
Радиоизотопното сканиране (сканиране) е метод за получаване на двуизмерно изображение, което отразява разпределението на радиофармацевтик в различни органи с помощта на скенер.
Фиг.1.6. Резултат от радиоизотопно сканиране
щитовидната жлеза
Сканирането ви позволява да определите размера на щитовидната жлеза, интензивността на натрупване в нея и в отделните й участъци на радиоактивен йод, което ви позволява да оцените функционалното състояние както на цялата жлеза, така и на фокалните образувания (фиг. 1.6).
Сцинтиграфия- метод за функционално изобразяване, който се състои във въвеждане в тялоторадиоактивни изотопии получаване на изображение чрез определяне на излъчваните от тяхрадиация . Пациентът се инжектирарадио индикатор - препарат, състоящ се от векторна молекула и радиоактивен маркер. Векторната молекула се абсорбира от определена телесна структура (орган, течност). Радиоактивният етикет служи като "предавател": той излъчва гама лъчи, които се записват от гама камера. Прилаганото количество радиофармацевтик е такова, че излъчваната от него радиация се улавя лесно, но не оказва токсичен ефект върху организма.
За сцинтиграфия на щитовидната жлеза най-често използваният изотоп на технеция е 99m Tc-пертехнетат. Употребата на 131 йод е ограничена до откриване на функциониращи метастази на рак на щитовидната жлеза. За диагностика на ретростернална и аберантна гуша, както и в някои случаи с вроден хипотиреоидизъм (атиреоза, дистопия, дефект в организацията) се използва 123 йод. 16
5. Определяне на нивото на TSH и тиреоидни хормони.
Изследване на нивото на TSH и хормоните на щитовидната жлеза (свободен тироксин и трийодтиронин) е показано за всички със съмнение за патология на щитовидната жлеза. Понастоящем е по-целесъобразно да се проведе изследване на свободните фракции на хормоните на щитовидната жлеза в комбинация с определянето на нивото на TSH.
6. Определяне на нивото на тиреоглобулин в кръвта.
Повишеното съдържание на тиреоглобулин в кръвта е характерно за много заболявания на щитовидната жлеза, също се открива в рамките на 2-3 седмици след пункционна биопсия, а също и в рамките на 1-2 месеца след операция на щитовидната жлеза.
7. Определяне на нивото на калцитонин в кръвта.
При пациенти с обременена фамилна анамнеза за медуларен рак на щитовидната жлеза (синдром на множествена ендокринна неоплазия тип 2 и 3), без провалопределяне на нивото на калцитонин в кръвта. Във всички останали случаи определянето на калцитонин не е показано.
Нормалното съдържание на калцитонин в кръвта не надвишава 10 pg / ml , Нивото на този маркер е над 200 pg / ml, което е най-важният диагностичен критерий за медуларен рак на щитовидната жлеза.
8. Тест за функцията на щитовидната жлеза.
Тестовете за функцията на щитовидната жлеза са кръвни изследвания, използвани за оценка на това колко добре функционира щитовидната жлеза. Тези тестове включват тест за стимулиращ щитовидната жлеза хормон (TSH), тест за тироксин (Т4), тест за трийодтиронин (Т3), тест за тироксин-свързващ глобулин (TBG), тест за трийодтиронин катран (T3RU) и тест за дългодействащ тироиден стимулатор (LATS). .
Функционалните тестове на щитовидната жлеза се използват за:
- помощ при диагностицирането на недостатъчна функция на щитовидната жлеза (хипотиреоидизъм) и свръхактивност на щитовидната жлеза (хипертиреоидизъм)
оценка на активността на щитовидната жлеза
проследяване на отговора на лечението с щитовидната жлеза
TSH „казва“ на щитовидната жлеза да секретира хормоните тироксин (Т4) и трийодтиронин (Т3). Преди да се използват тестове за TSH, се използват стандартни кръвни тестове за измерване на нивата на Т4 и Т3, за да се определи дали щитовидната жлеза работи правилно. Тестът за трийодтиронин (Т3) измерва количеството на този хормон в кръвта. Т3 обикновено присъства в много малки количества, но има значителен ефект върху метаболизма. Той е активен компонент на хормоните на щитовидната жлеза.
Тест за тироксин-свързващ глобулин (TSG).проверява нивата на това вещество в кръвта, които се произвеждат в черния дроб. GTD се свързва с Т3 и Т4, предотвратява измиването на хормоните от кръвта от бъбреците и ги освобождава, когато и където са необходими за регулиране на функциите на тялото.
Тест за абсорбция на трийодтиронинова смола (T3RU)измерва нивата на Т4 в кръвта. Лабораторен анализТози тест отнема няколко дни и се използва по-рядко от тестовете, които са достъпни по-бързо.
Тест за дългодействащ тиреоиден стимулатор (LATS)показва дали кръвта съдържа дългодействащ тиреоиден стимулатор. Ако наличието в кръвта е необичайно, LATS кара щитовидната жлеза да произвежда и освобождава необичайно големи количества хормони.
9. Компютърна, магнитно-резонансна, трансмисионна оптична томография.
КТ и ЯМР са високоинформативни неинвазивни методи, чрез които се визуализира щитовидната жлеза. Понастоящем обаче тези изследвания се извършват доста рядко поради високата цена и недостъпността на съответното оборудване. Наред с оценката на локализацията на щитовидната жлеза, нейните контури, форма, размер, структура, връзка със съседните тъкани, размер и структура на регионалните лимфни възли, CT ви позволява да определите денситометричната плътност на образуванията в щитовидната жлеза. И CT, и MRI са методите на избор при диагностицирането на ретростернална гуша. Компютърната томография (КТ) е рентгенов метод за изследване, основан на неравномерното поглъщане на рентгеново лъчение от различни тъкани на тялото, използван главно при диагностицирането на патология на щитовидната жлеза, коремна област(черен дроб, жлъчен мехур, панкреас, бъбреци, надбъбречни жлези и др.)
Компютърната томография ви позволява да получите информация за конфигурацията, размера, местоположението и разпространението на всяка формация, тъй като този метод разграничава твърдите и меките тъкани по плътност.
Магнитен резонанс (MRI) - инструментален методдиагностика, с помощта на която ендокринологията оценява състоянието на хипоталамо-хипофизно-надбъбречната система, скелета, органите коремна кухинаи малък таз.
ЯМР дава информация за конфигурацията на костите, размера, местоположението и разпространението на всяка формация, тъй като този метод разграничава твърдите и меките тъкани по плътност.
ЯМР през последните години става все по-важен при диагностицирането на патологията на хипоталамо-хипофизната област и се превръща в метод на избор при изследване на пациенти със съмнение за лезии на тази конкретна област (фиг. 1.7).
Фиг.1.7. Подготовка за ЯМР.
По време на магнитно резонансно изображение подвижна маса с пациента се движи през "тунел", който генерира електромагнитно поле, което от своя страна създава радиация, която ви позволява да получите триизмерно изображение на вътрешната структура на тялото.
Заболявания, диагностицирани чрез ЯМР:
- ? тумори на хипофизата (напр.пролактинома
, болест на Иценко-Кушинг)
- ? надбъбречни образувания (напр. Синдром на Кушинг, алдостерома, феохромоцитом)
- ? остеопороза
- ? и т.н.
- ? ви позволява да получите резени с дебелина 2-3 мм във всяка равнина
- ? способността да се прецени по естеството на сигнала не само наличието на образование, но и неговата вътрешна структура (кръвоизливи, кисти и др.)
- ? липса на излагане на пациента на йонизиращо лъчение и почти пълна безвредност, което е важно при изследване на деца, както и, ако е необходимо, многократни повторни изследвания.
Ориз. 1.8. Системата CTLM е един от първите в света серийни оптични томографи.
10. Имунохистохимично изследване на тиреоидна туморна тъкан.
Те се извършват в тъканта на тумори на щитовидната жлеза, получени в резултат на операция. Основната цел на това изследване е прогностична. В тъканта на щитовидната жлеза се определя наличието на вещества като p53 (супресор на туморния растеж), CD44, Met (протеогликани, отговорни за метастазите), PTC, ras-онкогени (онкогени, които регулират прогресията на тумора) и други. Най-важното в клиничната практика е откриването на имунореактивност p53, Metи RTS в тъкан от рак на щитовидната жлеза. Наличието на тези маркери в туморната тъкан е признак за бързо (в рамките на 2-5 месеца) развитие на метастатично заболяване при оперирания пациент. Изследването е скъпо и изисква специално лабораторно оборудване. Понастоящем определянето на туморни маркери се извършва главно в специализирани онкологични клиники за определени показания, а именно, ако пациентът има други прогностични признаци на рецидив на тумора или развитие на метастатично заболяване (слабо диференциран рак на щитовидната жлеза, възрастта на пациента е над 55 години). , инвазия на околните тъкани от тумора и др.). осемнадесет
11. Имунологични методи.
Имунологичните методи включват предимно ензимен имуноанализ (ELISA). ELISA е метод за откриване на антигени или антитела, базиран на определянето на комплекса антиген-антитяло поради:
- предварително фиксиране на антигена или антитялото върху субстрата;
добавяне на тестова проба и свързване на фиксирания антиген или антитяло към целевия антиген или целевото антитяло;
последващо добавяне на антиген или антитяло, белязано с ензимен етикет с откриването му с помощта на подходящ субстрат, който променя цвета си под действието на ензима. Промяната в цвета на реакционната смес показва наличието на целева молекула в пробата.Определянето на продуктите на ензимните реакции при изследване на тестови проби се извършва в сравнение с контролните проби.
Изследване на нивата на антитиреоидни антитела - имунохемилуминесцентен метод. Изследвано е разпространението на антитела срещу антигени на щитовидната тъкан: тиреоглобулин, тиреоидна пероксидаза и TSH рецептор при пациенти с дифузна токсична гуша и ендокринна офталмопатия. Изследването на такива пациенти показва високо ниво на антитела срещу TSH рецептора, което намалява по време на тиреостатична терапия. 20 Доказано е, че определянето на антитела срещу TSH рецептора и тиреоглобулина трябва да служи като допълнителен диагностичен критерий по време на изследването. 21
Методи за определяне на антитела срещу TSH рецептора:
1. Дефиниция на TBII
1.1. Радиорецепторен метод
1.1.1. Използване на свински rTTG (TRAK)
1.1.2. Използване на човешки rTSH, експресиран от СНО клетки (CHO-R)
1.1.3. Използване на rTTH, експресиран от левкемични клетки (K562)
1.2. FACS
1.3. Имунопреципитация
2. Биологични методи за откриване на стимулиращи (TSAb) и блокиращи (TBAb) антитела
2.1. Оценка на производството на cAMP (определено от RIA)
2.1.1. в FRTL-5 клетки
и т.н.................
Подходите за изследване на пациенти с ендокринни заболявания не се различават съществено от тези, приети в клиниката по вътрешни болести, като трябва да се има предвид, че дисфункцията на ендокринните жлези обикновено е придружена от промени в няколко, а понякога и в повечето органи и системи. . Въпреки факта, че диагнозата на повечето ендокринопатии изисква проверка чрез лабораторни или инструментални методи, данните от анамнезата и физикалния преглед са доминиращи.
Между Общи чертианамнеза за ендокринопатии, трябва да се отбележи, че с изключение на захарен диабет и редица други заболявания, ендокринната патология често се развива в относително ранна възраст. Когато функцията на повечето ендокринни жлези е нарушена, има промяна в телесното тегло, външния вид, физическа дейности сексуална функция. По този начин самият факт на бременност и раждане по време на предполагаемата история на жената дава възможност да се съмнява с висока степен на вероятност, че тя има тежко ендокринно заболяване. Най-важните въпроси, които трябва да бъдат обсъдени при снемане на анамнеза за ендокринно заболяване, са представени в таблица 1.
маса 1
Анамнеза, характерна за много ендокринни заболявания
| Загуба на тегло (често изразена) Наддаване на тегло (рядко изразено) Промяна във външния вид и психиката Нарушение менструален цикъл Безплодие Намалено либидо еректилна дисфункция Галакторея Нарушения на изпотяването (изпотяване, суха кожа) Нарушения на растежа на косата (хипертрихоза, повишен косопад) Кардиомиопатия (ритъмни нарушения, сърдечна недостатъчност) Промяна в кръвното налягане (хипотония, хипертония) Хранителни разстройства (анорексия, булимия) мускулна слабост фрактури на костите забавяне на растежа Фамилна анамнеза за ендокринни заболявания |
За повечето от най-честите заболявания в клиничната практика, фамилната анамнеза за диагностика е ограничена стойност(забележително изключение е диабет тип 2). Това се дължи на факта, че повечето ендокринопатии не са наследствени заболявания, а патология с наследствено предразположение.
В педиатричната ендокринологична практика пропорцията наследствени заболяваниязначително по-висока. Въпреки това, редица наследствени ендокринопатии могат първо да се проявят при възрастни (синдром на множествена ендокринна неоплазия). При много ендокринни заболявания диагнозата може да бъде установена с много висока степен на вероятност още по време на прегледа на пациента (Таблица 2).
таблица 2
Заболявания, чиято диагноза често е очевидна при преглед
Комбинацията от ярки клинични симптомимного ендокринопатии с психични характеристики на пациентите често водят до факта, че диагностичната концепция на лекаря възниква още при първия поглед на пациента и изследването се провежда активно, тъй като оплакванията, значими за диагнозата, често не се представят на пациентите. Но понякога първото впечатление дори на опитен ендокринолог не се потвърждава от хормонално изследване (например при хипотиреоидизъм).
При диагностицирането на ендокринни заболявания могат да се разграничат 4 групи типични грешки:
1. Игнориране на очевидни клинични симптоми. Най-често тези грешки се правят при синдрома на Кушинг и акромегалията, когато бавно развиващите се клинични прояви се възприемат като "възрастови" промени или отделни симптоми ( артериална хипертония, затлъстяване, анемия), или се третират като независими заболявания.
2. Преоценка на значението на лабораторните методи на изследване. Определянето на нивото на хормоните "за всеки случай" води до факта, че лабораторните данни са повишени до абсолютна диагностична значимост. Много често източникът на грешки при интерпретирането на данните от хормоналните изследвания е пренебрегването на правилата за вземане на материал (добавяне на консервант, антикоагулант и др.), Както и неспазването на самата методология на хормоналното изследване.
3. Преоценка на значението на инструменталните методи на изследване. Провеждането на ултразвук на надбъбречните жлези или яйчниците, компютърно или магнитно резонансно изображение на надбъбречните жлези или главата без анализ на клиничната картина и определяне на нивото на необходимите хормони често служи като неправилна основа за заключение, че има патология на съответните органи. В същото време опциите анатомична структураили незначителни отклонения от нормата също се считат за пряка индикация за патологичен процеси водят до диагностика на несъществуващо заболяване.
4. Упорито търсене на ендокринна патология. При лица с конституционни особености на метаболизма, астенични прояви, вегетативни нарушения, храносмилателни разстройства, злоупотреба с наркотици, неврози и др психични разстройствачесто има упорито търсене на ендокринни заболявания. Ситуацията се влошава от несистематичното прилагане на голям брой хормонални и инструментални изследвания, при много от тези пациенти е възможно да се идентифицират някои клинично незначими промени, които не са патогенетично свързани с основното заболяване.
Дедов И.И., Мелниченко Г.А., Фадеев В.Ф.
Пункция (пункционна биопсия) на щитовидната жлеза- Пункция на щитовидна жлеза под ехографски контрол.
Този метод се предписва само ако други методи не дават достатъчно информация за предписване на лечение.
Показания:
- диагностика на заболявания на щитовидната жлеза;
- наличието на кисти или възли с размер над 1 см;
- вероятността от злокачествен процес.
Процедурата се извършва под ултразвуков контрол и ви позволява точно да предпишете вида на лечението.
За пункция се използва много тънка игла. Под ултразвуков контрол иглата се поставя точно на правилното място, което намалява вероятността от нараняване. Процедурата е безопасна и няма противопоказания.
След пункцията пациентът може да почувства лека болезненост на мястото на манипулацията, която бързо преминава.
Ултразвук на панкреаса.
Ултразвукът на панкреаса се препоръчва при съмнение за остър и хроничен панкреатит(възпаление на панкреаса), както и жълтеница (подозрян тумор или рак на панкреаса) и симптоми на други заболявания на панкреаса (като диабет тип 1).
Подготовка за ултразвук на панкреаса, както и за ултразвук на всички органи на коремната кухина.
Ултразвук на щитовидна жлеза.
Ултразвукът на щитовидната жлеза е един от методите за изследване на щитовидната жлеза, който ви позволява да оцените нейния размер и да идентифицирате наличието на някои структурни промени, наблюдавани при заболявания на щитовидната жлеза (гуша, тумори на щитовидната жлеза, аденом на щитовидната жлеза и др.) . С помощта на ехографията на щитовидната жлеза се откриват най-малките й изменения, достигащи 1-2 mm в диаметър.
Ултразвукът на щитовидната жлеза не изисква специална подготовка. Това е абсолютно безопасен и безболезнен метод на изследване.
Ултразвук на надбъбречните жлези.
Ехографията на надбъбречните жлези е ултразвуково изследване на структурите на надбъбречните жлези, разположени над горните полюси на бъбреците.
Показания за ултразвук на надбъбречните жлези:
- Съмнение за тумор на надбъбречната жлеза.
- Клинични прояви на хипер- или хипофункция на надбъбречните жлези.
- Изясняване на причините за хипертония.
- Епизоди на безпричинна мускулна слабост.
- Изясняване на причините за затлъстяването.
- Изясняване на причините за безплодие.
Не се изисква подготовка за ултразвук на надбъбречните жлези, но някои ултразвукови специалисти предписват 3-дневна диета без шлака, лека вечеряне по-късно от 19 часа в навечерието на изследването, ултразвук на надбъбречните жлези на празен стомах.
Рентгенова снимка на костите на черепа (изследване на формата, размера и контурите Турско седло- костно легло на хипофизната жлеза) - извършва се за диагностициране на тумор на хипофизата.
Радиоизотопно сканиране (сцинтиграфия) на щитовидната жлезас радиоактивен йод, според степента на усвояване на които правят заключение за функцията на щитовидната жлеза и определят йодсвързващата способност на кръвните серумни протеини
КОМПЮТЪРНА ТОМОГРАФИЯ (CT)- методът на рентгеново изследване, базиран на неравномерното поглъщане на рентгеново лъчение от различни тъкани на тялото, се използва при диагностицирането на патология на щитовидната жлеза, панкреаса, надбъбречните жлези.
МАГНИТЕН РЕЗОНАНС (MRI)- инструментален диагностичен метод, с помощта на който ендокринологията оценява състоянието на хипоталамо-хипофизо-надбъбречната система, скелета, коремните органи и малкия таз.
Препратки
Уроци:
1. Пропедевтика на клиничните дисциплини / E.V. Смолева [и др.]; изд. Е. М. Аванесянц, Б. В. Кабарухин. – изд. 4-ти. - Ростов n / D: Phoenix, 2009. - 478 с. : аз ще. - (Средно професионално образование).
2. Фелдшер на линейката: практическо ръководство / A.N. Nagnibed.-SPb: SpecLit, 2009.-3-то изд., коригирано. и допълнителни - 253 стр.; аз ще.
3. Човешкото тяло отвън и отвътре, пълно ръководство по медицина и клинична патология, LLC "De Agostini", 2009 г.
4. Практическо ръководствопо пропедевтика на вътрешните болести / ред. Шуленин. - М .: ООО "Агенция за медицинска информация", 2006. - 256 с.
5. Рябчикова Т.В., Смирнов А.В., Егорова Л.А., Рупасова Т.И., Карманова И.В., Румянцев А.Ш. Практическо ръководство по пропедевтика на вътрешните болести.- М.: GOU VUNMTs, 2004.-192 с.
6. Медицински колеж Стари Оскол, Медицинска история с основите на пропедевтиката на клиничните дисциплини по темата "Синдромна патология, диференциална диагнозаи фармакотерапия”, 2000г.
7. Никитин А. В., Переверзев Б. М., Гусманов В. А. Основи на диагностиката на заболяванията вътрешни органи“, издателство Воронеж държавен университет, 1999.
8. М. Г. Хан. Бърз ЕКГ анализ. Санкт Петербург: "Медицина", 1999, стр. 286 с.
9. Пропедевтика на вътрешните болести / изд. проф. Ю.С. Маслова. - С.-Пб., Специална литература, 1998.
10. В.В. Мурашко, А.В. Срутински. Електрокардиография. Медицина, 1987г.
Пациентът трябва да бъде съблечен.
аз Преглед на лицето:
Обърнете внимание на хармонията на характеристиките (при заболяване на хипофизната жлеза се определя неравномерен растеж на костите - увеличение долна челюст, нос, суперцилиарни дъги зигоматични костии т.н.)
2.Цвят на лицето:
- Розов цвят при захарен диабет, може да има ксантома и ксантелазма;
- Мършаво лице с тънка кадифена кожа, екзофталм и пигментация на клепачите при тиреотоксокоза;
- Маска, безизразно лице с бавни изражения на лицето, сънливо, восъчно изражение, подпухнали клепачи и свиване палпебрални фисури. Кожата е суха, лющеща се - микседем - тежка форма на хипотиреоидизъм;
- Лунообразна форма, лилаво-червен цвят с наличие на пустули, стрии (стрии), лице - прекомерно производство на адренокортикотропен хормон (АКТХ).
II. Състояние на косата:
- Тънка, чуплива, леко падаща коса при хипертиреоидизъм;
- Гъста, матова (без блясък), чуплива коса, която лесно пада при хипотиреоидизъм;
- Намаляване или изчезване на космите при мъжете по гърдите, корема, пубиса (вторични полови белези) и окосмяване по протежение на мъжки типпри жените (появата на мустаци, брада).
III. Изследване на кожата:
- Обърнете внимание на цвета, наличието на надраскване (захарен диабет), пустуларни обриви, циреи (захарен диабет, болест на Iseng-Cushing).
- Пигментация (меладермия) - хронична недостатъчностнадбъбречните жлези. Особено изразена пигментация отворени частитяло, в кожните гънки, в зърната и гениталиите, устната лигавица.
- Определянето на сухотата и влажността на кожата се извършва визуално (при суха кожа се забелязва нейното загрубяване, удебеляване; при висока влажност се отбелязват капчици пот) и винаги с помощта на палпация.
IV. Определяне на височината на пациента
- Поставете пациента по такъв начин, че да докосва вертикалната дъска на стадиометъра с петите, задните части и лопатките.
- Дръжте главата си така горен ръбна открито Ушния канали външния ъгъл на окото на същата хоризонтала.
- Спуснете хоризонталната лента на главата си и пребройте деленията.
v. Претегляне на пациента
Правете сутрин, на гладно, след изпразване Пикочен мехури червата, в бельо (с последващо бельо за отслабване)
Претеглянето се извършва редовно, на редовни интервали.
VI. Дебелината на подкожния мастен слой
- Съберете кожата на корема на нивото на пъпа в гънка.
- При жените обикновено не трябва да надвишава 4 см, при мъжете - 2 см.
VII. Очни симптоми
- изпъкнал - екзофталм
- Широкото отваряне на палпебралните фисури е симптом на Delrymple.
- Блестящите очи са симптом на Краус.
- Рядкото мигане е симптом на Stelwag.
- Назад горен клепачпри гледане надолу - симптом на Graefe.
- Нарушение на конвергенцията - знак на Мьобиус (слаба конвергенция)
- Отдръпване на горния клепач с бърза смяна на погледа - симптом на Кохер
VIII. Наличието на тремор се определя в позицията на Ромберг:
- Пациентът стои с изпънати ръце пред гърдите, раздалечени пръсти, ненапрегнати, петите събрани, затворени очи
- Определете наличието на тремор на пръстите
- При изразен тремор е необходимо да се проведе тест пръст към носа, при който може да се открие умишлен тремор - увеличаване на амплитудата на трептенията на пръстите при приближаване до носа
IX. При заболяване на ендокринните жлези може да има оток в резултат на увреждане на сърцето (захарен диабет, тиреотоксикоза), бъбреците (захарен диабет) и вид оток на тъканите ( оток на лигавицата) при хипотиреоидизъм.
Визуално се определя голям масивен оток.
При леко подуване е необходимо да се приложи палпация:
- Натиснете пръстите си върху подутата кожа, притискайки я към костта. Под пръстите остават трапчинки, които след това се изглаждат.