Šalti agliutininai. Šalto agliutininų analizės priežastys, procedūra ir rezultatai
Raktažodžiai: antikūnai peršalimo antikūnų liga hemolizinė anemija atipinė pneumonija mikoplazma pneumonija infekcinė mononukleozė kraujas
Šaltieji agliutininai yra antikūnai, dažniausiai priklausantys IgM klasei, dėl kurių raudonieji kraujo kūneliai agliutinuojasi žemoje temperatūroje. Nedideliais kiekiais galima rasti šaltų agliutininų sveiki asmenys. Kai kurių infekcijų, ypač pirminių, metu stebimas laikinas jų lygio padidėjimas. SARS“(sukelia Mycoplasma pneumoniae), kai 2-ąją ligos savaitę nustatomi šalti agliutininai. Pacientams, kuriems yra didelis šalto agliutininų titras, pvz., sergantiems pirmine netipine pneumonija (šiuo atveju pneumonija, kurią sukelia, pavyzdžiui, Mycoplasma pneumonija, ir vyksta "netipiškai"), po šalto poveikio gali išsivystyti ūmi laikina hemolizinė anemija. Pacientams, kurių titras nuolat didėja. Dėl šalto agliutinino gali išsivystyti lėtinė hemolizinė anemija.
1. Pacientui reikia paaiškinti, kad analizė leidžia išsiaiškinti, ar jo kraujyje nėra antikūnų, kurie žemoje temperatūroje pažeidžia raudonuosius kraujo kūnelius. 2. Taip pat reikia įspėti, kad analizę gali tekti pakartoti, kad būtų galima stebėti gydymo veiksmingumą. 3. Dietos ir dietos apribojimai nereikalingi. 4. Įspėkite pacientą, kad analizei reikės paimti kraujo mėginį, informuokite, kas ir kada atliks venų punkciją. 5. Reikėtų įspėti apie galimybę diskomfortas uždedant žnyplę ant rankos ir atliekant venos punkciją. 6. Jeigu pacientas ima antimikrobinių medžiagų, tai nurodyta laboratorinio siuntimo formoje, nes kai kurie iš šių vaistų gali turėti įtakos šalto agliutinino atsiradimui kraujo serume.
1. Po venos punkcijos kraujas paimamas į mėgintuvėlį, kuris pašildomas iki 37 °C. 2. Jei pacientui įtariamas šalčio agliutinacijos sindromas, tyrimas atliekamas šiltoje patalpoje, priešingu atveju agliutinacija periferinių kraujagyslių lovoje, atsirandanti veikiant šalčiui, gali prisidėti prie nušalimo, Raynaud sindromo išsivystymo ir , rečiau – gangrena. 3. Atidžiai stebėkite ženklus kraujagyslių sutrikimai, pavyzdžiui, dėmių atsiradimas ant odos, purpura, gelta, blyškumas, galūnių skausmas ir jų patinimas, raumenų mėšlungis pirštuose. Esant šalčiui, galima masinė intravaskulinė hemolizė, dėl kurios atsiranda hemoglobinurija. 4. Venipunktūros vieta spaudžiama vatos tamponu, kol kraujavimas sustoja. 5. Susidarius hematomai kartu su venų punkcija skiriami šildantys kompresai.
Šaltųjų agliutininų nustatymo rezultatas gali būti teigiamas arba neigiamas. At teigiamas rezultatas, rodantys šaltų agliutininų buvimą kraujyje, nurodyti jų titrą. Paprastai šaltųjų agliutininų titras neviršija 1:64.
1. Hemolizė dėl neatsargaus elgesio su kraujo mėginiu (galimi žemi titrai). 2. Kraujo mėginio užšaldymas, kol serumas bus atskirtas nuo eritrocitų (galimi žemi titrai). 3. Antimikrobinės medžiagos.
1. Patvirtinkite pirminės netipinės pneumonijos diagnozę. 2. Gaukite papildomos informacijos daugeliui pastebėto šalto agliutinacijos sindromo diagnozei virusinės infekcijos ir piktybiniai navikai limfoidinis audinys. 3. Nustatyti šaltus agliutininus pacientams, kuriems įtariamas šalto agliutinacijos sindromas.
Aukštas šaltų agliutininų titras gali būti pirminis ir antrinis, atsirandantis dėl infekcijos ar piktybinių limfoidinio audinio navikų. Ligos, kurias lydi šalto agliutininų titro padidėjimas, yra infekcinė mononukleozė, citomegalovirusinė infekcija, hemolizinė anemija, daugybinė mieloma, sisteminė sklerodermija, maliarija, kepenų cirozė, įgimtas sifilis, vaskulitas, tromboembolinis sindromas, tripanosomozė, tonzilitas, stafilokokemija, skarlatina, gripas. Nėštumo metu kartais stebimas padidėjęs šaltų agliutininų titras. Dažniausia lėtinio šalto agliutinino titro padidėjimo priežastis yra pneumonija ir piktybiniai navikai daugelio virusinių infekcijų atveju stebimas ūmus laikinas titro padidėjimas. Šis testas padeda diagnozuoti pirminę netipinę pneumoniją, kurią sukelia Mycoplasma pneumoniae, ir kai kurias hemolizines anemijas. Atsakymas dažniausiai priklauso nuo ligos sunkumo, tačiau lengvais atvejais gali susidaryti ir titras. Pavadinimai sparčiai didėja ir tampa didžiausi po 3-4 savaičių. Nuo ligos pradžios, tada greitai išnyksta. Titrai ≥ 1:32 laikomi teigiamais; kreditai gali siekti iki 1:2048. Tik 30-70% pacientų turi teigiamus titrus, todėl neigiamas titras neatmeta mikoplazminės pneumonijos. Kuo didesnis titras, tuo didesnė koreliacija su mikoplazmine pneumonija. Titrai ≥ 1:128 yra svarbesni nei titrai ≤ 1:64, nes jų titras tarp ūminio ir sveikstančio serumo padidėja ≥ 4 kartus. Didelis antikūnų prieš M.pneumoniae titras gali būti aptiktas ir esant kitoms ligoms, įskaitant kraujo diskraziją, kepenų ligas, tripanosomiazę, kolageno kraujagyslių ligą. Itin aukštas (daugiau nei 1:2000) šaltų agliutininų titras stebimas esant idiopatiniam šaltos agliutinacijos sindromui, kuris yra prieš limfomos išsivystymą. Toks aukštas titras rodo, kad pacientas turi intravaskulinę agliutinaciją, kurią paprastai lydi sunkios klinikinės apraiškos.
Kraujo ligos
Šalti agliutininai
Šaltieji agliutininai arba krioproteinai yra antikūnai, kurie sąveikauja su eritrocitų apvalkalo antigenais. Tai gali suaktyvinti komplemento sistemą, sukeldama autoimuninė reakcija veda prie eritrocitų agregacijos ir sunaikinimo, bet tik tada, kai žemos temperatūros. Ši patologija dažniausiai pasireiškia vyresniems nei 50 metų pacientams. Antikūnus gali pateikti IgM, IgG arba IgA, pirmuoju atveju agliutinacija išreiškiama reikšmingai. Yra laboratoriniai metodai, leidžiantys diagnozuoti šaltus agliutininus ir nustatyti temperatūrą, nuo kurios prasideda agliutinacija. Paprastai peršalimo agliutininų priežastis yra infekcija, dažniausiai virusinė. Jų skaičius gali palaipsniui mažėti, todėl, jei jie aptinkami, geriau atidėti operaciją hipotermijos sąlygomis ir, jei įmanoma, naudojant šaltą kardioplegiją. Taip pat galite nustatyti šaltų agliutininų titrus skirtinga temperatūra kraujo ir perfuzijos metu venkite aušinimo iki temperatūros, kuriai esant gali atsirasti agliutinacija. Jei vis dėlto reikalinga gilesnė hipotermija, reikalinga plazmaferezė, pašalinant serume esančius antikūnus. Esant dideliems šaltų agliutininų titrams, aušinimas gali sukelti rimtų komplikacijų: perioperacinį MI, inkstų nepakankamumas, hemolizinė anemija, trombozė. Tokiems pacientams operacijos planavimas turi būti ypač atsargus, siekiant išvengti paciento atšalimo. Hemodiliucija naudojant CPB tam tikru mastu sumažina agliutinacijos riziką, tačiau šis poveikis nėra pakankamai nuspėjamas, todėl prieš CPB, jo metu ir po jo pacientas neturėtų būti vėsinamas. Patartina naudoti šildomą vandens čiužinį, IR reikia atlikti esant normotermijai, iš anksto pakaitinant sistemą užpildantį tirpalą. Jei eritrocitai suleidžiami CPB metu, jie taip pat turi būti iš anksto pašildyti. Jei būtina šalta kardioplegija, ji turi būti kristaloidinė, be kraujo. Tokiu atveju jie pradedami įpilant 200–300 ml šilto tirpalo, kuris išplauna kraują iš vainikinių arterijų, tada suleidžiamas šaltas tirpalas. Šalto kardiopleginio tirpalo temperatūra yra tokia, kad agliutinacija yra beveik neabejotina, todėl kardioplegija, kurioje yra kraujo, turėtų būti leidžiamas tik šiltas. Prieš pat nuimant spaustuką nuo aortos, patartina suleisti šilto kardiopleginio tirpalo, kad kraujas patektų į vainikinių arterijų neatvėso.
pjautuvinė anemija
Paprastai žmogaus eritrocituose daugiausia yra hemoglobino A, pjautuvinė anemija atsiranda dėl nenormalaus hemoglobino S kiekio eritrocituose. Pacientų, kuriems šis požymis homozigotinis, eritrocituose daugiausia yra hemoglobino S, kliniškai tai pasireiškia pjautuvine anemija. Heterozigotiniams pacientams hemoglobino S yra mažiau nei 45% viso, jie yra ligos geno nešiotojai. Sergant pjautuvine anemija, raudonieji kraujo kūneliai turi būdingą pjautuvo arba pusmėnulio formą, yra mažiau judrūs, linkę agreguotis ir greičiau suyra. Kai deguonies kiekis yra mažas, pusmėnulio formos raudonieji kraujo kūneliai gali nusodinti. Pacientams, sergantiems pjautuvine anemija, be pačios anemijos, pastebima intravaskulinė trombozė. Krizės metu (ar krizės – nesu tikras, nepamenu) atsiranda sąkandis kraujagyslės kartu su skausmu, dusuliu ir traukuliais.
Perfuzijos taktika turėtų būti nukreipta į tai, kad būtų išvengta krizės su visomis jos pasekmėmis. Būtina palaikyti aukštą deguonies prisotinimo lygį ir neaušinti paciento. Pacientams, kuriems vyrauja hemoglobino S kiekis, eritrocitų prisotinimas deguonimi turi būti ne mažesnis kaip 85%, pacientams, kurių hemoglobino S kiekis yra dalinis - ne mažiau kaip 40%. Pacientams, kuriems yra dalinis hemoglobino kiekis S CPB metu, reikia palaikyti aukštą deguonies prisotinimo lygį ir vengti acidozės, kuri prisideda prie pusmėnulio eritrocitų sunaikinimo. Laikantis šių taisyklių, dažniausiai galima išvengti komplikacijų. Vėsinimas taip pat pablogina pjautuvo funkciją, todėl vėsinimo geriausia vengti, naudojant šiltą ar kristaloidinę kardioplegiją taip pat, kaip ir šaltiems agliutininams. Teigiamas vaidmuo tenka ir hemodiliucijai perfuzijos metu. Norint išvengti kraujagyslių pralaidumo, reikia naudoti vazodilatatorius.
Šalto agliutinino testas yra kraujo tyrimas, kurio metu nustatomas šių antikūnų kiekis organizme. Šaltuosius agliutininus gamina mūsų organizmas, reaguodamas į infekciją. Jie daro raudoną kraujo ląstelės susijungia žemoje temperatūroje. At sveikų žmonių, paprastai, žemas lygis peršalimo antikūnai kraujyje. Tačiau limfoma ir tam tikros infekcijos (SARS) padidina šalto agliutinino kiekį.
Truputį pakeltas lygis peršalimo agliutininai dažniausiai nesukelia rimtų problemų. Kartais šalti agliutininai surenka raudonuosius kraujo kūnelius grupėmis, kurios įstringa kraujagyslėse, esančiose arti atvėsusios odos. Tai gali sukelti odos blanšavimą ir tirpimą. AT pažangūs atvejai(su labai užsitęsusia hipotermija) tai gali sukelti gangreną.
Kodėl reikia matuoti šaltus agliutininus?
Šalto agliutinino tyrimas atliekamas siekiant:
- Išsiaiškinkite, ar peršalimo antikūnai nėra autoimuninės hemolizinės anemijos priežastis;
- Diagnozuoti SARS.
Mūsų klinikoje dirba šios srities specialistai.
(4 specialistai)
2. Kaip pasiruošti ir kaip atliekama analizė?
Kaip pasiruošti šalto agliutinino tyrimui?
Prieš tiriant peršalimo antikūnus, pasiruošimo nereikia.
Kaip atliekamas šalto agliutinino tyrimas?
Peršalimo antikūnų kiekis matuojamas paėmus kraują iš venos. Kraujo mėginių ėmimas atliekamas pagal standartinę procedūrą.
3. Kokia yra rizika ir kas gali turėti įtakos analizei?
Kokia yra šalto agliutinino tyrimo rizika?
Galimas kraujo tyrimo dėl peršalimo antikūnų pavojus gali būti siejamas tik su pačiu kraujo mėginių ėmimu. Visų pirma, mėlynių atsiradimas punkcijos vietoje ir venos uždegimas (flebitas). Šilti kompresai kelis kartus per dieną atleis nuo flebito. Jei vartojate kraują skystinančius vaistus, pradūrimo vietoje gali atsirasti kraujavimas.
Kas gali trukdyti šalto agliutinino tyrimui?
Šalto agliutinino tyrimo rezultatas nebus tikslus, jei vartojate antibiotikus, ypač penicilinus ir cefalosporinus.
Ką verta žinoti?
Daugiau nei pusė žmonių, sergančių SARS, turi didelį peršalimo antikūnų kiekį. Tačiau SARS diagnozuoti dažniau naudojami kiti, patikimesni tyrimai.
Jei metu randama surištų raudonųjų kraujo kūnelių bendra analizė kraujo, gydytojas gali reikalauti atlikti šalto agliutinino tyrimą.
Kraujo grupę sunkiau nustatyti esant aukštam agliutinino kiekiui.
Jei žmogus turi didelis kiekisšaltų agliutininų, kol jis nebuvo veikiamas žemos temperatūros, tada jam reikia sušilti. Aukštas lygisšaltas agliutininas gali sukelti anemiją, nušalimą ar Raynaud ligą.
Klinikinis šių ligų vaizdas sujungia abu charakteristikos hemolizė ir kitos apraiškos padidėjęs jautrumasšalčiui (pažeidimas periferinė kraujotaka). Priklausomai nuo vyraujančios šaltų agliutininų arba hemolizinų gamybos, du klinikinės formos. Nors šios sąlygos yra pagrįstos bendrieji susitarimai, imunologinių metodų pagalba galima jų diferenciacija. Kadangi atitinkamą antigeną galima aptikti pacientų eritrocituose, Mes kalbame iš tikrųjų apie autoimunizaciją.
šalto agliutinino liga. Peršalimo hemagliutininų sukeltos ligos vaizdas aprašytas jau XIX a. Apie vieną tokį atvejį pranešė M. A. Raynaud. Šių antikūnų patogenetinė reikšmė buvo įrodyta tik mūsų amžiaus 20-aisiais. 1952 m. Schubothe pasiūlė išskirti šalto agliutinino ligą kaip specialią nozologiją, taip išskiriant ją nuo antrinių formų, kurios išsivystė dėl kitų patologinių procesų.
Tai reliatyvu reta liga daugiausia paveikia vyresnius nei 50 metų žmones. Tai sudaro 7,7–10,8% autoimuninių ligų hemolizinės ligos ir 30-42% visų atvejų lydi peršalimo antikūnų gamyba.
Simptomai. Visų pacientų skundai priklauso nuo oro sąlygų. Simptomai pasireiškia hemolizės forma dėl padidėjusio organizmo jautrumo šalčiui. Paciento būklę apsunkina jų derinys su krioprecipitacijos procesu. Sunkios hemolizinės krizės pastebimos gana retai, šiais laikotarpiais pastebimi sutrikimai bendras ir hemoglobinurija. Anemija yra ryškesnė žiemos mėnesiais nei vasarą. Apžiūrint kartais randama padidėjusi blužnis, dažniausiai nežymi.
Laboratoriniai duomenys. Atliekant standartinį kraujo tyrimą, galima aptikti hemagliutinacijos reakcijos ir iš dalies hemolizės požymius. Agliutinatai ypač aiškiai matomi fiksuotuose kraujo tepinėliuose. Šie sutrikimai praktiškai atmeta galimybę nustatyti eritrocitų skaičių kraujo kūnelių skaičiavimo kameroje. Anemija dažniausiai nėra labai ryški, tačiau hemoglobino kiekis gali nukristi iki 4 mmol/l. Kraujo nuotrauka rodo didžiąja dalimi sfero- ir mikrocitozė, padidėjęs retikulocitų kiekis, eritrocitų polichromatofiliškumas. Ant preparatų, paruoštų po išankstinio kraujo mėginio inkubavimo, stebima eritrocitų fagocitozė. Leukocitų ir trombocitų kiekis, kaip taisyklė, nesikeičia. Pagrindinis diagnostinis kriterijus yra teigiama šalčio hemagliutininų reakcija. Dėl antikūnų prisijungimo prie eritrocitų reikia centrifuguoti kraują ir atskirti serumą 37 °C temperatūroje. Atsižvelgiant į ypatingos savybėsšių antikūnų, tyrimas atliekamas esant skirtingoms temperatūros sąlygoms: 10, 20, 30 ir 37°C. Priešingai nei įprasta, peršalimo antikūnų titrai 4°C temperatūroje viršija 1:500. Svarbus ir aptiktų antikūnų titras, ir temperatūros amplitudė diferencinė diagnostika. Teigiamas tiesioginis AHT daugiausia yra eritrocitų jautrinimo komplemento komponentais rezultatas. Pastarųjų aktyvumas dažnai sumažėja.
Dabartinė. Liga pasižymi lėtine eiga ir sunkiai gydoma. Kartais simptomai išlieka 10 ar daugiau metų; Dažnai šiems pacientams diagnozuojami organų navikai. Imuninė sistema. Mirties priežastys gali būti infekcijos, anemija, komplikacijos po kraujo perpylimo arba, galiausiai, pagrindinės ligos progresavimas. Spontaniškos remisijos yra retos.
Diagnostika . Diagnozė idiopatinė formašalto agliutinino ligos diagnozuojamos nustačius peršalimo antikūnus (titras didesnis nei 1:500, temperatūra aukštesnė nei 15 °C). Sergant šalta hemoglobinurija, nustatomas Donat-Landsteiner antikūnų aktyvumas. Diferencinės diagnostikos požiūriu Waldenströmo makroglobulinemijos atvejai yra įdomūs. Kai kurie autoriai šalto agliutinino ligą laiko speciali formaši liga arba plazmocitoma.
Etiologija. Pirminių formų vystymosi priežastys pirmiausia vadinamos monokloninėmis proliferacijomis B ląstelių tipas. Autoantikūnų koncentracija gali padidėti vystantis limfomai, lėtinei limfoleukemijai, rečiau limfogranulomatozei, tačiau pereinant į piktybinę formą autoantikūnų neaptinkama.
Antrinės autoimuninės hemolizinės anemijos formos dėl šalčio antikūnų paprastai būna ūminės arba poūminės. Jie yra palyginti reti. Žymiai dažniau stebima subklinikinė ligos eiga ir teigiamas AHT (60-80% atvejų su mikoplazmos sukeltomis infekcijomis arba infekcine mononukleoze). Paprastai simptomai pasireiškia praėjus 10–20 dienų nuo ūminės infekcijos pradžios, dažnai sutampa su sveikimu. Sergant infekcine mononukleoze, jie užfiksuojami jau ligos pradžioje: tokiems pacientams paprastai pastebimas sumažėjęs antikūnų kiekis (palyginti su lėtine forma), taip pat ne toks ryškus. Klinikiniai požymiai. Dažniausiai hemolizinė krizė lydi bendras silpnumas, odos blyškumas ir gelta.
Laboratoriniai duomenys paprastai atitinka idiopatinės AIHA atvejus. Antikūnų titras svyruoja nuo 1:512 iki 1:32 000 (esant 2-4°C), temperatūros amplitudė sumažinama. Jei pagrindinė liga yra ūminė infekcija, tuomet antrinių sutrikimų prognozė gana palanki. Palaipsniui mažėjant šaltų agliutininų kiekiui, paciento klinikinė būklė normalizuojasi. Sergant virusinėmis infekcijomis, diferencinės diagnostikos kriterijus yra hemolizė dėl šiltų antikūnų aktyvumo.
Serologiniai duomenys. Pirmą kartą šaltos hemagliutinacijos reiškinį aprašė K. Landsteineris 1903 m.. Jis išskyrė specifiniai antikūnai taip: pirmiausia iš serumo buvo pašalinti šaltų hemagliutininų pagalba susidarę eritrocitų agregatai, jie patalpinti į izotoninį NaCl tirpalą, o po to, pakėlus terpės temperatūrą, atskirti susiję antikūnai.
Peršalimo antikūnų specifiškumas. Priešingai nei šilti autoantikūnai, buvo įrodyta, kad šalti hemagliutininai nėra specifiški jokiems specifinis antigenas nors jie skirtingai reaguoja su eritrocitais skirtingi tipai gyvūnai. Taigi buvo aprašytos antikūnų reakcijos su triušio eritrocitais, jūrų kiaulytė, vištienos, avys, katės, kiaulės, pelės ir beždžionės, dėl kurių jie gavo pavadinimą „panagliutininai“. Reikšmingiausią, „stiprų“ antigeną atrado A. S. Wiener ir kt. tiriant pacientą, turintį itin aukštą šaltųjų agliutininų titrą. Ištirti antikūnai nereagavo su paciento eritrocitais, tačiau agliutinavo beveik visų kitų asmenų eritrocitus. Agliutinogenas buvo pavadintas I-antigenu, kad atspindėtų ypatingas eritrocitų, reaguojančių su atitinkamu anti-1 serumu, savybes, šio agliutinogeno nebuvimas žymimas simboliu i. 1 antigenas yra glaudžiai susijęs su AB0 sistema. Pagal cheminę struktūrą tai tikriausiai yra polisacharidas. Naujagimiai turi išskirtinai i fenotipą. 3-ią postnatalinio laikotarpio savaitę sustiprėja I-antigeno sintezė, todėl vyresniam nei 18 mėnesių vaikui nustatomas I fenotipas, o i-antigenas praktiškai netenkama. Tuo tarpu buvo pasiūlyta, kad eritrocituose gali būti likutinių i-antigenų struktūrų. Išsamūs tyrimai parodė, kad IF antigeno vienodai yra tiek ant virkštelės kraujo eritrocitų, tiek ant suaugusiųjų, o 1° antigenas sintetinamas iš t.y. I fenotipas randamas suaugusiems 1:4000 - 1:5000 dažniu, teigiamų reakcijų tikimybė žymiai padidėja sergant leukemija. Kadangi sintezės perjungimas iš i į I įvyksta po gimimo, tai gali paaiškinti faktą, kad anti-I agliutininai yra nustatomi žemu titru (iki 1:64) ir maža temperatūros amplitudė (iki 22 ° C). sveiki asmenys. Manoma, kad šie antikūnai yra normalaus įsijautrinimo proceso požymis, jie yra polikloninio pobūdžio, priešingai nei ligai būdingi monokloniniai šaltieji agliutininai.
Paprastai antigenas, reaguojantis su šaltais autoantikūnais, nėra identiškas antigenui prieš natūralius antikūnus. Šaltų autoAb grupėje taip pat buvo atskleistos skirtingos specifikos; 90% jų epitopas buvo rastas ant 1 molekulės.
Anti-i tipo šalto agliutininai buvo aprašyti sergant infekcine mononukleoze, kepenų ciroze, piktybine retikuloze ir tropine splenomegalija. Šie antikūnai taip pat yra nevienalyčiai (nusakomi keturi specifiškumo tipai). Kadangi antigeno, atsakingo už anti-1 antikūnų gamybą, dažniausiai nėra, pastarųjų patogenetinė reikšmė yra nedidelė. AT pastaraisiais metais buvo pranešimų apie Pr antigeną, kuris randamas suaugusiųjų ir vaisiaus eritrocituose. Skirtingai nuo I ir I antigenų, jį inaktyvuoja proteazės.
Šioje grupėje išskiriami šie antigenai:
Nustatyta pagal N-acetilneuramino rūgštį (neuraminidazės inaktyvacija);
Atsparus neuraminidazės poveikiui.
Diferencinei diagnozei reikia atlikti analizę naudojant tiek natūralius, tiek proteazėmis apdorotus eritrocitus.
Antikūnų klasės. Priešingai nei šilti antikūnai, tai daugiausia IgM klasės antikūnai. Anti-Pr ir anti-i specifiškumas dažnai priskiriamas kitų klasių lg. Melanezijos populiacijoje buvo rasta šalto IgG klasės antikūnų. IgA klasės šaltieji agliutininai, daugiausia specifiniai Pr, buvo nustatyti sergant limfoproliferacinėmis ligomis ir kepenų ciroze. Dėl nesugebėjimo aktyvuoti komplemento pacientai neturi hemolizinės apraiškos, o akrocianozė yra labai ryški.
Esant lėtinei šalto agliutinino ligos formai, kaip ir Waldenströmo ligai, elektroferograma rodo monokloninį smailę. lg kompoziciją reprezentuoja tik x grandinės. Remiantis šiais duomenimis, buvo pasiūlyta, kad idiopatinis šalto agliutinino ligos variantas turėtų būti laikomas specialia Waldenströmo makroglobulinemijos forma. Didelis šaltų agliutininų heterogeniškumas buvo įrodytas tiriant infekcinėmis ligomis sergančių pacientų serumus; šiais atvejais antikūnus sudarė dviejų tipų L grandinės. Periferinio kraujo B-limfocitai taip pat turi galimybę šaltai agliutinuoti (rozetės susidarymo su eritrocitais reiškinys).
Hemagliutininų titrai priklauso nuo terpės pH ir temperatūros. Paprastai jie silpnai koreliuoja su paciento klinikine būkle, tačiau esant optimaliai temperatūrai, antikūnų lygis yra gana aukštas – nuo 1:8000 iki 1:64000, kartais pasiekia maksimalų 1:168 000 000. Aprašyti reikšmingi antikūnų titrai adresu lėtinės formos, vidutinis – esant ūminiam ir poūmis kursas ligų. Pažymėtina, kad į retais atvejais antikūnų randama žemo titro ir praktiškai sveikų asmenų.
Priklausomybė nuo temperatūros. Peršalimo antikūnų patogeninis poveikis tiesiogiai priklauso nuo temperatūros amplitudės. Paaiškėjo, kad esant dideliam titrui ir maždaug 15 ° C temperatūrai, antikūnai yra mažiau aktyvūs nei esant žemam titrui ir esant 32 ° C ar aukštesnei temperatūrai. Nors aukšta temperatūra gali palaikyti lėtinį hemolizinį procesą, žema temperatūra paprastai sukelia krizę. Išsamūs tyrimai parodė, kad viršutinę temperatūros amplitudės ribą lemia sustiprinta antikūnų, iš pradžių fiksuotų eritrocitų paviršiuje, disociacija. Tarp antikūnų susidarymo proceso ir temperatūros amplitudės yra atvirkštinis ryšys. Tai taip pat taikoma antikūnų titro ir temperatūros santykiui. Optimali temperatūra antikūnams jungtis prie eritrocitų svyruoja nuo 1 iki 4 C, sveikų žmonių retai viršija 15 °C. Esant ūmioms ir poūmioms antrinėms formoms, šis rodiklis paprastai atitinka 20–25 ° C, su lėtinė eiga gali siekti 32°C ar daugiau. Ypatingą gebėjimą surišti antikūnus šaltomis sąlygomis tikriausiai nulemia eritrocitų membranos, tiksliau, antigeną turinčių glikoforino molekulių savybės, nes jungiantis prie izoliuoto I-antigeno ši priklausomybė nuo temperatūros nepastebima. Anti-I antikūnai retai rodo krioprecipitino aktyvumą; anti-i antikūnai dažniau turi šią savybę. Antikūnų disociacija daugiau aukštos temperatūros prisijungęs prie komplemento C3 komponento, jis gali būti C3 receptorių buvimo įrodymas.
„Monoterminiai šaltieji agliutininai“ kartais vadinami antikūnais, sukeliančiais hemolizę parūgštintame serume, pavyzdžiui, esant 20 °C temperatūrai. Susumavus jų veikla pasireiškia didele amplitude temperatūros sąlygos surišimas (0-30°C) ir lizė (15-40°C).
Komplemento įrišimas yra patogeniškas. Dalyvaujant antigeno-antikūno reakcijoje, šis procesas gali tiesiogiai sukelti hemolizę, taip pat sukelti daugybę sublitinių pokyčių. Tiesą sakant, hemolizė vyksta esant bendro komplemento aktyvavimo sąlygai. Ryšys tarp šaltų agliutininų ir šaltųjų hemolizinų titrų yra gana silpnas. Optimali temperatūra, kuriai esant stebimas hemolizinis poveikis, atitinka maždaug 20 °C, o tai rodo hipotermijos būseną. Temperatūra retai viršija 32°C. Stiprus atšalimas tokiems pacientams gali sukelti paroksizminę hemoglobinuriją.
Sublitinis komplemento fiksavimas apsiriboja C3 komponentu. C3b inaktyvatoriaus pagalba C3a yra atskiriamas nuo C3b, todėl paprastai lieka surištas tik C3d. Komplemento komponentų surišimo procesas taip pat vyksta, jei dėl kaitinimo antikūnai atsiskiria nuo ląstelės paviršiaus. C3d buvimas užkerta kelią antikūnų fiksacijai (I-determinantų blokada), taip pat tolesniam komplemento aktyvavimui (C3b surišimo vietų blokada).
Priežastys, sukeliančios sublitinį komplemento fiksavimą arba visišką hemolizę, dar nėra visiškai aiškios. Daroma prielaida, kad pirmuoju atveju kalbame apie ypatingą eritrocitų atsparumą. Komplemento komponentų surišimo proceso tyrimas leido paaiškinti reiškinį iš kitų pozicijų. nepilni antikūnai; jei eritrocitai inkubuojami su serumu, kuriame yra šaltų hemagliutininų, tai pakaitinus iki 37 °C (antikūnų atskyrimas) ir po to nuplovus, jie neagliutinuojasi su antiglobulino serumu. Anksčiau buvo manoma, kad prie eritrocitų paviršiaus jungiasi nepilni, t.y., nesugebantys agliutinuoti antikūnai, tačiau atliekant eksperimentus su monospecifiniais anti-Ig serumais, nei IgM, nei IgG ar IgA neaptikta.
Šalti agliutininai yra patogeniški daugelyje klinikinės būklės. Be to, jie randami nesant pagrindinės ligos simptomų.
Etiologija. Dauguma galima priežastis Hemagliutininų atsiradimas sergant imunoproliferacinėmis ligomis yra nenormali antikūnų sintezė. Deja, daugumos antrinių formų patogenezė dar nebuvo ištirta. Faktas, kad anti-I serumai specifiškai reaguoja su triušio eritrocitais, rodo, kad už antikūnų gamybą atsakingas į triušį panašus egzogeninis kryžmiškai reaguojantis antigenas. Šiuo atžvilgiu įdomūs yra stebėjimai, kuriuose dalyvauja anti-I serumas teigiama reakcija su avino eritrocitais, tačiau šių heterospecifinių kryžmiškai reaguojančių antigenų paieška iki šiol buvo nesėkminga. Išimtis yra reakcija su mikoplazmomis. Nustatyta, kad triušių jautrinimas žmogaus eritrocitais, apdorotais mikoplazma, sukelia didelio titro anti-I antikūnų gamybą. Iš to išplaukia, kad imuninis atsakas yra susijęs su mikoplazmos ir eritrocitų, turinčių bendrą antigeną, sąveika. Jaunose NZB/B1 linijos pelėse reguliariai aptinkami IgM antikūnai prieš antigeną I, o tai, matyt, yra susiję su limfoidinio audinio navikų vystymusi gyvūnams.
Patogenezė. Atšaldžius kraują iki atitinkamų antikūnų aktyvumo temperatūros, lg ir pirmieji C komponentai jungiasi eritrocitų paviršiuje. Pakartotinai kaitinant, antikūnai yra atskiriami, o komplemento aktyvacijos procesas, priešingai, gali būti sustiprintas (tam tikromis sąlygomis iki C9). Antikūnų susidarymo terminus ir sunkumą lemia temperatūros amplitudė. Pagrindinė simptomatika yra susijusi su hemolizinės krizės išsivystymu. Buvo įrodyta, kad C3b inaktyvatorius vaidina svarbų vaidmenį tarp aktyvių veiksnių, ribojančių hemolizę. Antikūnų suvartojimas yra mažiau svarbus, nes po atskyrimo val pakilusi temperatūra jie gali visiškai išlaikyti savo savybes. Apskritai hemolizinės apraiškos priklauso nuo šių veiksnių:
Temperatūros amplitudė, optimali šaltųjų hemagliutininų veiklai;
Komplemento komponentų surišimas ir jų litinės savybės;
Eritrocitų jautrumo ar atsparumo laipsniai;
Monocitų-makrofagų sistemos veikla (ekstravaskulinė hemolizė).
Gydymas . Esant hemolizinėms krizėms, nereikia specialus gydymas gydymas dažniausiai siejamas su pagrindine liga. Splenektomija buvo sėkminga tik keliais atvejais. Klinikinis poveikis buvo ypač ryškus, kai 51Cr pažymėti eritrocitai buvo lokalizuoti daugiausia blužnyje, o ne kepenyse. Penicilaminas buvo rekomenduotas remiantis nuomone, kad skaidydamas IgM molekules jis gali inaktyvuoti antikūnus, tačiau tai nebuvo patvirtinta. Terapinis veiksmas citostatikai (pvz., ciklofosfamidas arba chlorambucilis) buvo aprašyti tik tam tikrais atvejais pacientams, sergantiems imunoproliferaciniais procesais. Dėl galimo šalutinis poveikis iš šių vaistų, pageidautina juos vartoti tik paūmėjimo metu. Jei reikia, paprastai skiriamas kraujo perpylimas. skubi pagalba(kraujo mėginys turi būti pašildytas iki 37°C). Tam tikra sėkmė buvo pasiekta taikant plazmaferezę (37 °C temperatūroje). Kortikosteroidai buvo praktiškai neveiksmingi.
Atkreipkite dėmesį į ribotos galimybės terapija, reikia laikytis svarbių reikalavimų profilaktikai: užkirsti kelią organizmo hipotermijai.
Laboratorinis tyrimas, kurio tikslas - nustatyti autoantikūnus, kurie žemoje temperatūroje sukelia eritrocitų agliutinaciją ir hemolizę.
Rusų sinonimai
Šalti agliutininai, visiškų šaltų agliutininų tyrimas.
Anglų kalbos sinonimai
Šalto agliutinino kraujo tyrimas, šalčio autoantikūnai, šaltai reaguojantys antikūnai.
Tyrimo metodas
Agliutinacijos reakcija.
Kokia biomedžiaga gali būti naudojama tyrimams?
Veninis kraujas.
Kaip tinkamai pasiruošti tyrimams?
- Nerūkykite 30 minučių prieš tyrimą.
Bendra informacija apie tyrimą
Autoimuninė hemolizinė anemija (AIHA) atsiranda dėl daugelio priežasčių, dėl kurių atsiranda imunologinė tolerancija ir antikūnų prieš savo raudonuosius kraujo kūnelius gamyba. Yra šiltų ir šaltų autoantikūnų. Šilumos efektyviausiai jungiasi su eritrocitų antigenais 37 °C temperatūroje, o šaltieji – 4-18 °C temperatūroje. Priklausomai nuo autoantikūnų poveikio raudoniesiems kraujo kūnams mėgintuvėlyje, išsiskiria hemolizinai (naikina ląsteles) ir agliutininai (sukelia raudonųjų kraujo kūnelių sulipimą).
Autoimuninė hemolizinė anemija su šaltais agliutininais – santykinai reta forma imuninė hemolizinė anemija (pagal kai kuriuos pranešimus, 20% visų AIHA atvejų). Tai gali būti idiopatinė (priežastis nežinoma) arba simptominė. Idiopatinis variantas dažniau pasireiškia vyresnio amžiaus žmonėms ir senatvė(60-80 m.), o simptominis gali pasireikšti vaikystėje ir paauglystė, komplikuojantis mikoplazminės pneumonijos eigą, infekcinė mononukleozė, legioneliozė, taip pat sisteminė autoimuninės ligos(sisteminė raudonoji vilkligė, reumatoidinis artritas). Vyresnio amžiaus žmonėms AIHA su šaltais agliutininais dažnai siejama su limfoproliferacinėmis ligomis, pvz lėtinė limfocitinė leukemija ir Waldenströmo makroglobulinemija.
Šaltieji agliutininai dažniausiai yra IgM, rečiau jie atstovaujami imunoglobulinų mišiniu skirtingos klasės. Jie jungiasi prie eritrocitų membranos esant žemai temperatūrai ir prijungia komplementą – serumo baltymų šeimą, kuri naikina antikūnais pažymėtas ląsteles. Pridėjus komplementą, ant eritrocitų membranos susidaro membraną žalojantis kompleksas, kurio susidarymas lemia daugybės porų susidarymą ląstelės membranoje, jos išbrinkimą ir sunaikinimą.
Kaip laboratorinį šaltų agliutininų sukeltos autoimuninės hemolizės žymenį, patartina naudoti antikūnų, sukeliančių eritrocitų agliutinaciją, nustatymą paciento kraujo serume inkubuojant žemoje temperatūroje.
Šiuolaikinis šalto agliutininų tyrimo metodas yra gelio agliutinacijos testas. Į mikrovamzdelius, kuriuose yra neutralus gelis, pilama donorų eritrocitų suspensija. Tada supilkite tirtą serumą ir inkubuokite 2-8 °C temperatūroje. Inkubuojant žemoje temperatūroje tiriamajame serume esant šaltiems agliutininams, jie jungiasi su eritrocitais ir sukelia jų agliutinaciją. Tyrimo rezultatas vertinamas po centrifugavimo, kurios metu atskiriami agliutinuoti ir neagliutinuoti eritrocitai. Neagliutinuoti eritrocitai savo dydžiu prilygsta gelio dalelių dydžiui ir, veikiami išcentrinės jėgos, laisvai prasiskverbia pro juos, sudarydami kompaktiškas raudonas nuosėdas mikrovamzdelio apačioje, o agliutinuoti eritrocitai dėl dideli dydžiai likti ant gelio paviršiaus arba jo storio.
Kam naudojami tyrimai?
- Paciento kraujo serume nustatyti anti-eritrocitų antikūnus, kurie žemoje temperatūroje sukelia hemolizę.
Kada numatytas tyrimas?
- Jei įtariama autoimuninė hemolizinė anemija su šaltais agliutininais: ryškus bruožas ligos – prastai toleruoja šaltį, kai pasireiškia pagrindiniai simptomai.
Ką reiškia rezultatai?
Pamatinės vertės: neaptiktas.
- Neigiamas rezultatas – ląstelės suformuoja kompaktiškas nuosėdas mikrovamzdelio apačioje – rodo, kad tiriamajame serume nėra šaltų agliutininų.
- Teigiamas rezultatas – agliutinuotos ląstelės suformuoja raudoną sluoksnį gelio paviršiuje arba storyje – rodo, kad tiriamajame serume yra šaltų antikūnų.
Kas gali turėti įtakos rezultatui?
- Žemų titrų šaltų agliutininų galima rasti ir sveikiems žmonėms.
Svarbios pastabos
- Sergant autoimunine hemolizine anemija su šaltais agliutininais, kambario temperatūroje įvyksta eritrocitų autoagliutinacija, kuri sukelia problemų ir lemia neteisingus kraujo grupės nustatymo bei periferinio kraujo parametrų (eritrocitų skaičiaus ir eritrocitų indeksų) skaičiavimo rezultatus. Ši agliutinacija grįžtama esant 37°C temperatūrai, todėl kraują įkaitinus iki kūno temperatūros, problemos tyrimo metu pašalinamos.