Hladni aglutinini. Uzroci, postupak i rezultati analize na hladne aglutinine

Ključne riječi: antitijela bolest hladnih antitijela hemolitička anemija atipična pneumonija mikoplazma pneumonija infektivna mononukleoza krv

Hladni aglutinini su antitijela, obično pripadaju klasi IgM, koja uzrokuju aglutinaciju crvenih krvnih stanica na niskim temperaturama. U malim količinama se mogu naći hladni aglutinini zdrave osobe. Prolazno povećanje njihovog nivoa opaženo je kod nekih infekcija, posebno kod primarnih " SARS(uzrokovana Mycoplasma pneumoniae), u kojoj se hladni aglutinini otkrivaju u 2. sedmici bolesti.

Pacijenti s visokim titrom hladnih aglutinina, kao što su oni s primarnom atipičnom pneumonijom (u ovom slučaju, tipom pneumonije uzrokovane, na primjer, Mycoplasma pneumonijom, a koja se odvija "atipično") mogu razviti akutnu prolaznu hemolitičku anemiju nakon izlaganja hladnoći. Kod pacijenata sa upornim porastom titra. Hladni aglutinini mogu razviti hroničnu hemolitičku anemiju.

1. Pacijentu treba objasniti da analiza omogućava da saznate da li ima antitijela u krvi koja oštećuju crvena krvna zrnca na niskim temperaturama.
2. Takođe treba upozoriti da će se analiza možda morati ponoviti kako bi se pratila efikasnost terapije.
3. Nisu potrebna nikakva ograničenja u ishrani i ishrani.
4. Upozoriti pacijenta da će mu biti potreban uzorak krvi za analizu i obavijestiti ko će i kada izvršiti venupunkciju.
5. Treba biti upozoren na mogućnost nelagodnost prilikom nametanja podveza na ruku i venepunkcije.
6. Ako pacijent uzima antimikrobna sredstva, to je naznačeno na obrascu za laboratorijsku uputnicu, jer neki od ovih lijekova mogu utjecati na pojavu hladnih aglutinina u krvnom serumu.

1. Nakon venepunkcije krv se vadi u epruvetu koja se zagreva na 37 °C.
2. Ako se kod pacijenta posumnja na sindrom hladne aglutinacije, studija se izvodi u toploj prostoriji, inače aglutinacija u perifernom vaskularnom krevetu, koja nastaje pod uticajem hladnoće, može doprinijeti promrzlinama, razvoju Raynaudovog sindroma i , rjeđe, gangrena.
3. Obratite posebnu pažnju na znakove vaskularni poremećaji na primjer, pojava mrlja na koži, purpura, žutica, bljedilo, bol u udovima i njihovo oticanje, grčevi mišića u prstima. Pod uticajem hladnoće moguća je masivna intravaskularna hemoliza koja dovodi do hemoglobinurije.
4. Mjesto vene punkcije se pritiska vatom dok krvarenje ne prestane.
5. Kada se formira hematom, zajedno sa venepunkcijom propisuju se grijaće obloge.

Rezultat određivanja Cold aglutinina može biti pozitivan ili negativan. At pozitivan rezultat, što ukazuje na prisustvo hladnih aglutinina u krvi, ukazuje na njihov titar. Normalno, titar hladnih aglutinina ne prelazi 1:64.

1. Hemoliza zbog nepažljivog rukovanja uzorkom krvi (mogući su niski titri).
2. Zamrzavanje uzorka krvi dok se serum ne odvoji od eritrocita (mogući su niski titri).
3. Antimikrobna sredstva.

1. Potvrdite dijagnozu primarne atipične pneumonije.
2. Dobiti dodatne informacije za dijagnozu sindroma hladne aglutinacije uočenog kod mnogih virusne infekcije i malignih tumora limfoidno tkivo.
3. Identifikujte hladne aglutinine kod pacijenata za koje se sumnja da imaju sindrom hladne aglutinacije.

Visok titar hladnih aglutinina može biti i primarni i sekundarni, kao rezultat infekcije ili malignih tumora limfoidnog tkiva. Bolesti praćene povećanjem titra hladnih aglutinina uključuju infektivnu mononukleozu, infekcija citomegalovirusom, hemolitička anemija, mijelom, sistemska skleroderma, malarija, ciroza jetre, kongenitalni sifilis, vaskulitis, tromboembolijski sindrom, tripanosomijaza, tonzilitis, stafilokokemija, šarlah, gripa. Povišeni titar hladnih aglutinina se ponekad primećuje tokom trudnoće. Najčešći uzrok kroničnog povećanja titra hladnog aglutinina je upala pluća i malignih tumora akutno prolazno povećanje titra uočeno je kod mnogih virusnih infekcija.
Ovaj test pomaže u dijagnozi primarne atipične pneumonije uzrokovane Mycoplasma pneumoniae i nekim hemolitičkim anemijama. Odgovor obično zavisi od težine bolesti, ali u blagim slučajevima može se proizvesti titar.
Naslovi se brzo povećavaju i postaju maksimalni nakon 3-4 sedmice. Od početka bolesti, a zatim brzo nestaju. Titri ≥ 1:32 smatraju se pozitivnim; krediti mogu doseći do 1:2048. Samo 30-70% pacijenata ima pozitivne titre, tako da negativan titar ne isključuje mikoplazma pneumoniju. Što je titar veći, to je veća korelacija sa mikoplazmnom pneumonijom. Titri ≥ 1:128 su važniji od titara ≤ 1:64 jer imaju ≥ 4 puta povećanje titra između akutnog i rekonvalescentnog seruma.
Visoki titri antitijela na M.pneumoniae mogu se otkriti iu drugim stanjima, uključujući krvnu diskraziju, bolest jetre, tripanosomijazu, kolagensku vaskularnu bolest.
Ekstremno visok titar (više od 1:2000) hladnih aglutinina uočen je kod idiopatskog sindroma hladne aglutinacije, koji prethodi razvoju limfoma. Ovako visok titar ukazuje da se čini da pacijent ima intravaskularnu aglutinaciju, koja je obično praćena teškim kliničkim manifestacijama.

Bolesti krvi

Hladni aglutinini

Hladni aglutinini ili krioproteini su antitijela koja stupaju u interakciju s antigenima ovojnice eritrocita. Ovo može aktivirati sistem komplementa, uzrokujući autoimuna reakcija dovodi do agregacije i uništavanja eritrocita, ali samo kada niske temperature. Ova patologija se javlja uglavnom kod pacijenata starijih od 50 godina. Antitijela mogu biti predstavljena IgM, IgG ili IgA, u prvom slučaju aglutinacija je značajno izražena. Postoje laboratorijske metode za dijagnosticiranje hladnih aglutinina i određivanje temperature početka aglutinacije. Obično je uzrok hladnih aglutinina infekcija, najčešće virusna. Njihov se broj može postupno smanjivati, stoga je, ako se otkriju, bolje odgoditi operaciju u uvjetima hipotermije i uz korištenje hladne kardioplegije ako je moguće. Takođe možete odrediti titre hladnih aglutinina sa različita temperatura krvi, a tokom perfuzije izbjegavajte hlađenje na temperaturu na kojoj može doći do aglutinacije. Međutim, ako je neophodna dublja hipotermija, potrebna je plazmafereza kojom se uklanjaju antitijela sadržana u serumu. Uz visoke titre hladnih aglutinina, hlađenje može dovesti do ozbiljnih komplikacija: perioperativni IM, otkazivanja bubrega, hemolitička anemija, tromboza. Planiranje operacije kod takvih pacijenata treba biti posebno pažljivo, kako bi se izbjeglo hlađenje pacijenta. Hemodilucija sa CPB donekle smanjuje rizik od aglutinacije, ali ovaj efekat nije dovoljno predvidljiv, stoga, pre, tokom i posle CPB, pacijenta ne treba podvrgavati hlađenju. Preporučljivo je koristiti madrac sa zagrijanom vodom, IR treba izvoditi na normotermiji, prethodno zagrijavajući otopinu koja puni sistem. Ako se crvena krvna zrnca ubrizgavaju tokom CPB-a, također ih treba prethodno zagrijati. Ako je neophodna hladna kardioplegija, ona bi trebala biti kristaloidna, bez krvi. U tom slučaju počinju uvođenjem 200-300 ml tople otopine, koja ispire krv iz koronarnih arterija, a zatim se ubrizgava hladna otopina. Temperatura hladnog rastvora za kardioplegiju je takva da je gotovo sigurno da će izazvati aglutinaciju, tako da kardioplegiju koja sadrži krv treba davati samo toplu. Neposredno prije uklanjanja stezaljke iz aorte, poželjno je ubrizgati toplu kardioplegičnu otopinu kako bi krv ušla u koronarne arterije nije se ohladio.

anemija srpastih ćelija

Normalno, kod ljudi eritrociti sadrže uglavnom hemoglobin A, anemija srpastih ćelija je posledica sadržaja abnormalnog hemoglobina S u eritrocitima.Kod pacijenata homozigotnih po ovoj osobini eritrociti sadrže pretežno hemoglobin S, klinički se to manifestuje anemijom srpastih ćelija. Kod heterozigotnih pacijenata hemoglobin S je manji od 45% ukupnog broja, oni su nosioci gena bolesti. Kod anemije srpastih stanica, crvena krvna zrnca imaju karakterističan oblik srpa ili polumjeseca, manje su pokretna, imaju tendenciju agregiranja i brže se razgrađuju. Kada je sadržaj kiseonika nizak, crvena krvna zrnca u obliku polumjeseca mogu se taložiti. Kod pacijenata sa anemijom srpastih ćelija, pored same anemije, primećuje se intravaskularna tromboza. U krizi (ili krizi - nisam siguran, ne sjećam se) dolazi do okluzije krvni sudovi praćeno bolom, kratkim dahom i konvulzijama.

Taktika perfuzije treba da bude usmerena na izbegavanje krize sa svim njenim posledicama. Neophodno je održavati visok nivo zasićenosti kiseonikom i ne hladiti pacijenta. Kod pacijenata sa dominantnim sadržajem hemoglobina S, zasićenost eritrocita kiseonikom treba da bude najmanje 85%, kod pacijenata sa delimičnim sadržajem hemoglobina S - najmanje 40%. Pacijenti sa parcijalnim hemoglobinom S tokom CPB moraju održavati visok nivo zasićenosti kiseonikom i izbegavati acidozu, koja doprinosi uništavanju srpastih ćelija. Pridržavanjem ovih pravila, komplikacije se obično mogu izbjeći. Hlađenje također doprinosi oštećenju funkcije srpa, pa je hlađenje najbolje izbjegavati, koristeći toplu ili kristaloidnu kardioplegiju na isti način kao i za hladne aglutinine. Hemodilucija tokom perfuzije takođe igra pozitivnu ulogu. Vazodilatatore treba koristiti kako bi se spriječila vaskularna prohodnost.

Hladni aglutinin test je test krvi koji mjeri količinu ovih antitijela u tijelu. Hladne aglutinine proizvode naša tijela kao odgovor na infekciju. Oni forsiraju crveno krvne ćelije spojiti na niskim temperaturama. At zdravi ljudi, obično, nizak nivo antitela na hladnoću u krvi. Ali limfom i određene infekcije (SARS) povećavaju nivoe hladnog aglutinina.

Malo povišen nivo hladno aglutinini obično ne uzrokuju ozbiljni problemi. Ponekad hladni aglutinini skupljaju crvena krvna zrnca u grupe koje se zaglave u žilama koje se nalaze blizu ohlađene kože. To može dovesti do blijedenja i utrnulosti kože. AT napredni slučajevi(uz izuzetno dugotrajnu hipotermiju) to može dovesti do gangrene.

Zašto mjeriti hladne aglutinine?

Testiranje hladnog aglutinina radi se na:

Saznajte jesu li antitijela na hladnoću uzrok autoimune hemolitičke anemije;
Dijagnosticirajte SARS.

Naša klinika ima specijaliste iz ove oblasti.

(4 specijalista)

2. Kako se pripremiti i kako se vrši analiza?

Kako da se pripremim za test hladnog aglutinina?

Nije potrebna priprema prije testiranja na antitijela na prehladu.

Kako se izvodi test hladnog aglutinina?

Nivo antitijela na hladnoću mjeri se nakon uzimanja krvi iz vene. Uzimanje krvi se vrši prema standardnoj proceduri.

3. Koji su rizici i šta može uticati na analizu?

Koji su rizici testiranja hladnog aglutinina?

Mogući rizici testa krvi na antitijela na prehladu mogu se povezati samo sa samim uzorkovanjem krvi. Konkretno, modrice na mjestu uboda i upala vene (flebitis). Topli oblozi nekoliko puta dnevno će vas osloboditi flebitisa. Ako uzimate lijekove za razrjeđivanje krvi, može doći do krvarenja na mjestu uboda.

Šta može ometati test hladnog aglutinina?

Rezultat hladnog aglutininskog testa neće biti tačan ako uzimate antibiotike, posebno peniciline i cefalosporine.

Šta je vredno znati?

Više od polovine ljudi koji boluju od SARS-a ima visok nivo antitijela na prehladu. Međutim, drugi, pouzdaniji testovi se češće koriste za dijagnosticiranje SARS-a.

Ako se tokom opšta analiza krvi, lekar može zahtevati test hladnog aglutinina.

Krvnu grupu je teže odrediti kod visokog nivoa aglutinina.

Ako osoba ima visokog sadržaja hladni aglutinini, dok nije bio izložen niskim temperaturama, onda mu je potrebno da se zagreje. Visoki nivo hladni aglutinini mogu dovesti do anemije, promrzlina ili Raynaudove bolesti.

Klinička slika ovih bolesti kombinuje oboje karakteristike hemoliza i druge manifestacije preosjetljivost na hladnoću (kršenje periferna cirkulacija). Ovisno o pretežnoj proizvodnji hladnih aglutinina ili hemolizina, dva kliničke forme. Iako su ovi uslovi zasnovani na opšti aranžmani, uz pomoć imunoloških metoda moguća je njihova diferencijacija. Budući da se odgovarajući antigen može otkriti na eritrocitima pacijenata, mi pričamo zapravo o autoimunizaciji.

bolest hladnog aglutinina. Slika bolesti izazvane hladnim hemaglutininima opisana je još u 19. veku. Jedan takav slučaj prijavio je M. A. Raynaud. Patogenetski značaj ovih antitela dokazan je tek 20-ih godina našeg veka. Godine 1952. Schubothe je predložio da se bolest hladnog aglutinina odvoji u posebnu nozologiju, čime se razlikuje od sekundarnih oblika koji su se razvili kao rezultat drugih patoloških procesa.

To je relativno rijetka bolest pretežno pogađa osobe starije od 50 godina. Čini 7,7-10,8% autoimunih hemolitičke bolesti i 30-42% svih slučajeva praćeno proizvodnjom antitijela na prehladu.

Simptomi. Žalbe pacijenta u cjelini zavise od prirode vremena. Simptomi se javljaju u obliku hemolize kao posljedica preosjetljivosti tijela na hladnoću. Stanje pacijenta je komplicirano njihovom kombinacijom s procesom krioprecipitacije. Teške hemolitičke krize uočavaju se relativno rijetko, u tim se periodima primjećuju poremećaji general i hemoglobinurija. Anemija je izraženija u zimskim mjesecima nego u ljetnim mjesecima. Prilikom pregleda ponekad se nađe povećana slezena, obično beznačajna.

Laboratorijski podaci. Standardnim testom krvi mogu se otkriti znaci reakcije hemaglutinacije, a dijelom i hemolize. Aglutinati su posebno jasno vidljivi na fiksnim brisevima krvi. Ovi poremećaji praktično isključuju mogućnost određivanja broja eritrocita u komori za brojanje krvnih zrnaca. Anemija obično nije jako izražena, ali nivo hemoglobina može pasti na 4 mmol/l. Krvna slika pokazuje uglavnom sfero- i mikrocitoza, povećan sadržaj retikulocita, polihromatofilnost eritrocita. Fagocitoza eritrocita se opaža na preparatima pripremljenim nakon preliminarne inkubacije uzorka krvi. Sadržaj leukocita i trombocita se u pravilu ne mijenja. Main dijagnostički kriterijum je pozitivna reakcija hladnih hemaglutinina. Zbog vezivanja antitijela za eritrocite potrebno je centrifugirati krv i odvojiti serum na 37 °C. Razmatrati posebna svojstva ovih antitijela, studija se provodi pri različitim temperaturnim uslovima: 10, 20, 30 i 37°C. Za razliku od norme, titri hladnih antitela na 4°C prelaze 1:500. I titar i temperaturna amplituda otkrivenih antitijela su važni za diferencijalna dijagnoza. Pozitivni direktni AHT je uglavnom rezultat senzibilizacije eritrocita komponentama komplementa. Aktivnost potonjeg često je smanjena.

Current. Bolest se karakteriše hroničnim tokom i teško se leči. Ponekad simptomi traju 10 godina ili više; Često se ovim pacijentima dijagnosticira tumor organa. imunološki sistem. Uzroci smrti mogu biti infekcije, anemija, komplikacije nakon transfuzije krvi ili, konačno, napredovanje osnovne bolesti. Spontane remisije su rijetke.

Dijagnostika . Dijagnoza idiopatski oblik Bolesti hladnog aglutinina dijagnostikuju se na osnovu detekcije antitela na hladno (titar veći od 1:500, temperatura iznad 15 °C). Kod hladne hemoglobinurije utvrđuje se aktivnost Donat-Landsteinerovih antitijela. Sa stajališta diferencijalne dijagnoze zanimljivi su slučajevi Waldenstromove makroglobulinemije. Neki autori smatraju hladno aglutininsku bolest kao poseban obrazac ovu bolest ili plazmacitom.

Etiologija. Kao razlozi za razvoj primarnih oblika prvenstveno se nazivaju monoklonske proliferacije Tip B-ćelije. Koncentracija autoantitijela može se povećati tijekom razvoja limfoma, kronične limfocitne leukemije, rjeđe limfogranulomatoze, međutim, autoantitijela se ne otkrivaju tijekom prijelaza u maligni oblik.

Sekundarni oblici autoimune hemolitičke anemije zbog antitijela na hladnoću u pravilu su akutni ili subakutni. Relativno su rijetke. Značajno češće se uočava subklinički tok bolesti i pozitivan AHT (u 60-80% slučajeva kod infekcija uzrokovanih mikoplazmom ili infektivnom mononukleozom). Obično se simptomi javljaju 10-20 dana nakon pojave akutne infekcije, koja se često poklapa sa stadijem rekonvalescencije. U infektivnoj mononukleozi se bilježe već na početku bolesti: kod takvih pacijenata u pravilu se bilježi smanjen nivo antitijela (u odnosu na kronični oblik), kao i manje izražen Klinički znakovi. Najčešća hemolitička kriza je praćena opšta slabost, bljedilo i ikterus kože.

Laboratorijski podaci su općenito konzistentni s onima u idiopatskoj AIHA. Titar antitela se kreće od 1:512 - 1:32,000 (na 2-4°C), amplituda temperature je smanjena. Ako je osnovna bolest akutna infekcija, onda je prognoza sekundarnih poremećaja prilično povoljna. Postepenim smanjenjem nivoa hladnih aglutinina, kliničko stanje pacijenta se normalizuje. Kod virusnih infekcija, kriterij za diferencijalnu dijagnozu je hemoliza zbog aktivnosti toplih antitijela.

Serološki podaci. Fenomen hladne hemaglutinacije prvi je opisao K. Landsteiner 1903. godine. specifična antitela na sledeći način: prvo su iz seruma uklonjeni agregati eritrocita koji su nastali uz pomoć hladnih hemaglutinina, stavljeni u izotonični rastvor NaCl, a zatim su, podizanjem temperature medijuma, izdvojena pridružena antitela.

Specifičnost hladnih antitela. Za razliku od toplih autoantitijela, dokazano je da hladni hemaglutinini nemaju specifičnost za bilo koje specifični antigen iako različito reaguju sa eritrocitima različite vrsteživotinje. Tako su opisane reakcije antitijela na eritrocite kunića, zamorac, piletina, ovce, mačke, svinje, miševi i majmuni, što je dovelo do njihovog naziva "panaglutinini". Najznačajniji, “jaki” antigen otkrili su A. S. Wiener i sar. pri pregledu bolesnika sa izuzetno visokim titrom hladnih aglutinina. Ispitana antitela nisu reagovala sa eritrocitima pacijenta, već su aglutinirala eritrocite gotovo svih drugih osoba. Aglutinogen je označen kao I-antigen kako bi odražavao posebna svojstva eritrocita koji reaguju sa odgovarajućim anti-1 serumom, odsustvo ovog aglutinogena je označeno simbolom i. Antigen 1 je usko povezan sa AB0 sistemom. Po hemijskoj strukturi verovatno je polisaharid. Novorođenčad imaju isključivo i fenotip. U 3. tjednu postnatalnog perioda povećava se sinteza I-antigena, kao rezultat toga, I fenotip se određuje kod djeteta starijeg od 18 mjeseci, a i-antigen se praktično gubi. U međuvremenu, sugerirano je da eritrociti mogu nositi zaostale strukture i-antigena. Detaljne studije su pokazale da je IF antigen podjednako prisutan i na eritrocitima krvi pupčanika i na odraslima, a 1° antigen se sintetizira iz i. Fenotip i se nalazi kod odraslih sa učestalošću od 1:4000 - 1:5000, vjerovatnoća pozitivnih reakcija značajno raste s leukemijom. Budući da se prelazak sinteze sa i na I dešava nakon rođenja, to može objasniti činjenicu da se anti-I aglutinini u niskom titru (do 1:64) i sa malom temperaturnom amplitudom (do 22°C) određuju u zdrave osobe. Smatra se da su ova antitijela znak normalnog procesa senzibilizacije, poliklonalne su prirode, za razliku od monoklonskih hladnih aglutinina karakterističnih za bolest.

Po pravilu, antigen koji reaguje sa hladnim autoantitelima nije identičan antigenu prirodnih antitela. Unutar grupe hladnih autoAb otkrivene su i različite specifičnosti, za 90% njih pronađen je epitop na 1-molekulu.

Anti-i tip hladni aglutinini su opisani u infektivnoj mononukleozi, cirozi jetre, malignoj retikulozi i tropskoj splenomegaliji. Ova antitela su takođe heterogena (definisana su četiri tipa specifičnosti). Budući da je antigen odgovoran za proizvodnju anti-1 antitijela obično odsutan, patogenetski značaj ovih potonjih je mali. AT poslednjih godina bilo je izvještaja o Pr antigenu, koji se nalazi na eritrocitima odraslih i fetusa. Za razliku od antigena I i i, inaktiviran je proteazama.

Unutar ove grupe razlikuju se sljedeći antigeni:

Određuje se N-acetilneuraminskom kiselinom (inaktivacija neuraminidaze);

Otporan na djelovanje neuraminidaze.

Diferencijalna dijagnoza zahtijeva analizu korištenjem nativnih i proteaznih eritrocita.

Klase antitela. Za razliku od toplih antitijela, to su uglavnom antitijela IgM klase. Anti-Pr i anti-i specifičnosti se često pripisuju lg-u drugih klasa. Antitijela IgG klase hladnoće pronađena su u populaciji Melanezije. Hladni aglutinini IgA klase, pretežno Pr-specifični, identificirani su kod limfoproliferativnih bolesti i ciroze jetre. Zbog nemogućnosti aktiviranja komplementa pacijenti nemaju hemolitičke manifestacije, dok je akrocijanoza značajno izražena.

U hroničnom obliku bolesti hladnog aglutinina, kao i kod Waldenstromove bolesti, elektroferogram pokazuje monoklonalni vrh. Sastav LG-a predstavljen je isključivo x-lancima. Na osnovu ovih podataka, predloženo je da se idiopatska varijanta bolesti hladnog aglutinina smatra posebnim oblikom Waldenstromove makroglobulinemije. Značajna heterogenost hladnih aglutinina je dokazana u proučavanju seruma pacijenata sa infekcijama; u ovim slučajevima, antitijela su se sastojala od dva tipa L-lanaca. B-limfociti periferne krvi imaju i sposobnost hladne aglutinacije (fenomen formiranja rozete sa eritrocitima).

Titri hemaglutinina zavise od pH i temperature medijuma. Obično slabo koreliraju sa kliničkim statusom pacijenta, međutim, na optimalnoj temperaturi, nivo antitela je prilično visok - od 1:8000 do 1:64000, ponekad dostižući najviše 1:168,000,000. Opisani su značajni titri antitela. at hronične forme, srednje - u akutnom i subakutni tok bolesti. Važno je napomenuti da u rijetki slučajevi antitijela se nalaze u niskom titru i kod praktično zdravih osoba.

Zavisnost od temperature. Patogeni efekat hladnih antitela zavisi direktno od amplitude temperature. Pokazalo se da su pri visokom titru i temperaturi od oko 15 °C antitijela manje aktivna nego na niskom titru i na 32 °C ili više. Dok visoke temperature mogu podržati kronični hemolitički proces, niske temperature obično izazivaju krizu. Detaljne studije su pokazale da je gornja granica temperaturne amplitude određena pojačanom disocijacijom antitijela inicijalno fiksiranih na površini eritrocita. Između procesa stvaranja antitijela i temperaturne amplitude postoji inverzna veza. Ovo se podjednako odnosi i na odnos između titra antitela i temperature. Optimalna temperatura za vezivanje antitijela na eritrocite kreće se od 1 do 4 C, a kod zdravih osoba rijetko prelazi 15 °C. U akutnim i subakutnim sekundarnim oblicima, ovaj indikator općenito odgovara 20-25 ° C, s hronični tok može doseći 32°C ili više. Posebna sposobnost vezivanja antitela u hladnim uslovima verovatno je određena svojstvima membrane eritrocita, odnosno molekula glikoforina koji nose antigen, jer se ova zavisnost od temperature ne primećuje kada se vezuje za izolovani I-antigen. Anti-I antitijela rijetko pokazuju aktivnost krioprecipitina; anti-i antitijela češće imaju ovo svojstvo. Disocijacija antitijela na više visoke temperature nakon vezivanja C3 komponente komplementa, može poslužiti kao dokaz prisustva C3 receptora.

"Monotermni hladni aglutinini" se ponekad nazivaju antitijelima koja uzrokuju hemolizu u zakiseljenom serumu, na primjer na 20°C. Njihova aktivnost se manifestuje značajnom amplitudom, kada se zbroji temperaturni uslovi vezivanje (0-30°C) i liza (15-40°C).

Vezivanje komplementa je patogen. Učestvujući u reakciji antigen-antitijelo, ovaj proces može dovesti direktno do hemolize, kao i uzrokovati niz sulitičkih promjena. U stvari, hemoliza nastaje pod uslovom opšte aktivacije komplementa. Korelacija između titara hladnih aglutinina i hladnih hemolizina je relativno slaba. Optimalna temperatura na kojoj se opaža hemolitički efekat odgovara približno 20 °C, što ukazuje na stanje hipotermije. Temperatura rijetko prelazi 32°C. Jako hlađenje kod takvih pacijenata može dovesti do paroksizmalne hemoglobinurije.

Sublitička fiksacija komplementa ograničena je na komponentu C3. Uz pomoć C3b inaktivatora, C3a se odvaja od C3b, tako da po pravilu ostaje samo C3d vezan. Proces vezivanja komponenata komplementa odvija se i ako se kao rezultat zagrevanja antitela odvoje od površine ćelije. Prisustvo C3d sprečava fiksaciju antitela (blokada I-determinanti), kao i dalju aktivaciju komplementa (blokada C3b vezivnih mesta).

Razlozi koji uzrokuju ili sublitičku fiksaciju komplementa ili potpunu hemolizu još nisu potpuno jasni. Pretpostavlja se da je u prvom slučaju riječ o posebnoj otpornosti eritrocita. Proučavanje procesa vezivanja komponenata komplementa omogućilo je da se fenomen objasni sa drugih pozicija. nepotpuna antitela; ako se eritrociti inkubiraju sa serumom koji sadrži hladne hemaglutinine, onda nakon zagrijavanja na 37 °C (odvajanje antitijela) i naknadnog ispiranja, ne aglutiniraju sa antiglobulinskim serumom. Ranije se vjerovalo da se nepotpuna, odnosno nesposobna za aglutinaciju, antitijela vezuju za površinu eritrocita, međutim, u eksperimentima sa monospecifičnim anti-Ig serumima nisu otkriveni ni IgM ni IgG ni IgA.

Hladni aglutinini su patogenetski u nizu klinička stanja. Uz to, nalaze se u odsustvu simptoma osnovne bolesti.

Etiologija. Većina vjerovatnog uzroka Pojava hemaglutinina kod imunoproliferativnih bolesti je abnormalna sinteza antitijela. Nažalost, patogeneza većine sekundarnih oblika još nije proučena. Činjenica da anti-I serumi specifično reaguju sa eritrocitima kunića sugeriše da je egzogeni antigen unakrsne reakcije, poput zečjeg, odgovoran za proizvodnju antitijela. U tom smislu, interesantna su zapažanja u koja je uključen anti-I serum pozitivna reakcija s eritrocitima ovna, međutim, potraga za ovim heterospecifičnim unakrsnim antigenima do sada je bila neuspješna. Izuzetak je reakcija s mikoplazmama. Utvrđeno je da senzibilizacija kunića humanim eritrocitima tretiranim mikoplazmom dovodi do stvaranja anti-I antitijela u visokom titru. Iz ovoga slijedi da je imunološki odgovor povezan s interakcijom mikoplazme i eritrocita koji nose zajednički antigen. Kod mladih miševa linije NZB/B1 redovno se otkrivaju IgM antitela na antigen I, što je očigledno povezano sa razvojem tumora limfoidnog tkiva kod životinja.

Patogeneza. Hlađenje krvi do temperature aktivnosti odgovarajućih antitijela dovodi do vezivanja lg i prvih C-komponenti na površini eritrocita. Ponovljenim zagrevanjem, antitela se odvajaju, a proces aktivacije komplementa, naprotiv, može biti pojačan (pod određenim uslovima, do C9). Termini i težina formiranja antitijela određuju se temperaturnom amplitudom. Glavna simptomatologija povezana je s razvojem hemolitičke krize. Pokazalo se da C3b-inaktivator igra važnu ulogu među aktivnim faktorima koji ograničavaju hemolizu. Potrošnja antitijela je od manjeg značaja, jer nakon odvajanja na povišena temperatura mogu u potpunosti zadržati svoja svojstva. Općenito, hemolitičke manifestacije zavise od sljedećih faktora:

Temperaturna amplituda, optimalna za djelovanje hladnih hemaglutinina;

Vezivanje komponenata komplementa i njihova litička svojstva;

Stepen osjetljivosti ili rezistencije eritrocita;

Aktivnosti monocitno-makrofagnog sistema (ekstravaskularna hemoliza).

Tretman . U hemolitičkim krizama nema potrebe za poseban tretman terapija je obično povezana s osnovnom bolešću. Splenektomija je bila uspješna u samo nekoliko slučajeva. Klinički efekat bio je posebno izražen kada su eritrociti obilježeni 51Cr pretežno lokalizirani u slezeni, a ne u jetri. Penicilamin je preporučen na osnovu ideje da cijepanjem IgM molekula može inaktivirati antitijela, ali to nije dalje potvrđeno. Terapeutsko djelovanje citostatici (npr. ciklofosfamid ili hlorambucil) su opisani samo u izolovanim slučajevima kod pacijenata sa imunoproliferativnim procesima. Zbog mogućeg nuspojava od ovih lijekova, poželjno je koristiti ih samo tokom egzacerbacije. Transfuzije krvi se propisuju, u pravilu, ako je potrebno. hitna pomoć(uzorak krvi treba zagrijati na 37°C). Određeni uspjeh je postignut plazmaferezom (na 37°C). Kortikosteroidi su bili praktično neefikasni.

Obratite pažnju na ograničene mogućnosti terapije, treba poštovati važne zahtjeve za prevenciju: spriječiti hipotermiju tijela.

Laboratorijska studija usmjerena na identifikaciju autoantitijela koja izazivaju aglutinaciju i hemolizu eritrocita na niskim temperaturama.

ruski sinonimi

Hladni aglutinini, studija potpunih hladnih aglutinina.

engleski sinonimi

Test krvi na hladne aglutinine, autoantitela na hladnoću, antitela koja reaguju na hladnoću.

Metoda istraživanja

Reakcija aglutinacije.

Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?

Venska krv.

Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?

Nemojte pušiti 30 minuta prije studije.

Opće informacije o studiji

Autoimune hemolitičke anemije (AIHA) nastaju kao rezultat sloma zbog niza uzroka imunološke tolerancije i proizvodnje antitijela protiv vlastitih crvenih krvnih zrnaca. Postoje topla i hladna autoantitijela. Termalni se najefikasnije vezuju za antigene eritrocita na temperaturi od 37 °C, a hladni na 4-18 °C. Ovisno o efektu koji autoantitijela imaju na crvena krvna zrnca u epruveti, oslobađaju se hemolizini (uništavaju stanice) i aglutinini (uzrokuju lijepljenje crvenih krvnih stanica).

Autoimuna hemolitička anemija sa hladnim aglutininima - relativno rijedak oblik imunohemolitička anemija (prema nekim izvještajima, 20% svih slučajeva AIHA). Može biti idiopatski (uzrok nepoznat) ili simptomatski. Idiopatska varijanta je češća kod starijih osoba i starost(60-80 godina), dok se simptomatski mogu javiti u djetinjstvu i adolescencija, komplicira tok mikoplazmalne pneumonije, infektivna mononukleoza, legioneloze, kao i sistemske autoimune bolesti(sistemski eritematozni lupus, reumatoidni artritis). Kod starijih osoba, AIHA sa hladnim aglutininima se često povezuje sa limfoproliferativnim bolestima kao što su hronična limfocitna leukemija i Waldenstromova makroglobulinemija.

Hladni aglutinini su najčešće IgM, rjeđe su predstavljeni mješavinom imunoglobulina različite klase. Vežu se za membranu eritrocita na niskim temperaturama i vezuju komplement, familiju serumskih proteina koji uništavaju ćelije označene antitijelima. Nakon dodavanja komplementa, na membrani eritrocita nastaje kompleks koji oštećuje membranu, čije stvaranje dovodi do stvaranja velikog broja pora u ćelijskoj membrani, njenog bubrenja i uništavanja.

Kao laboratorijski marker autoimune hemolize uzrokovane hladnim aglutininima, preporučljivo je koristiti detekciju antitijela u krvnom serumu pacijenta, što dovodi do aglutinacije eritrocita tokom inkubacije na niskim temperaturama.

Moderna metoda ispitivanja hladnih aglutinina je test aglutinacije gelom. Suspenzija donorskih eritrocita se dodaje u mikroepruvete koje sadrže neutralni gel. Zatim dodajte ispitivani serum i inkubirajte na temperaturi od 2-8 °C. U prisustvu hladnih aglutinina u test serumu tokom inkubacije na niskim temperaturama, vezuju se za eritrocite i izazivaju njihovu aglutinaciju. Rezultat testa se vrednuje nakon centrifugiranja, tokom kojeg se odvajaju aglutinirani i neaglutinirani eritrociti. Neaglutinirani eritrociti imaju veličinu usporedivu s veličinom čestica gela i slobodno prolaze kroz njih pod djelovanjem centrifugalne sile, formirajući kompaktan crveni sediment na dnu mikroepruvete, a aglutinirani eritrociti zbog velike veličine zadržavaju se na površini gela ili u njegovoj debljini.

Za šta se koristi istraživanje?

Za otkrivanje antieritrocitnih antitijela u krvnom serumu pacijenta koja uzrokuju hemolizu na niskim temperaturama.

Kada je predviđeno učenje?

Ako se sumnja na autoimunu hemolitičku anemiju sa hladnim aglutininima: istaknuta karakteristika bolesti - loša podnošljivost hladnoće, kada se pojavljuju glavni simptomi.

Šta znače rezultati?

Referentne vrijednosti: nije detektovano.

Negativan rezultat - ćelije formiraju kompaktni talog na dnu mikroepruvete - ukazuje na odsustvo hladnih aglutinina u test serumu.
Pozitivan rezultat - aglutinirane ćelije formiraju crveni sloj na površini ili u debljini gela - ukazuje na prisustvo hladnih antitijela u test serumu.

Šta može uticati na rezultat?

U niskim titrima, hladni aglutinini se mogu naći i kod zdravih ljudi.

Važne napomene

Kod autoimune hemolitičke anemije sa hladnim aglutininima dolazi do autoaglutinacije eritrocita na sobnoj temperaturi, što stvara probleme i dovodi do pogrešnih rezultata u određivanju krvne grupe i izračunavanju parametara periferne krvi (broj eritrocita i eritrocitni indeksi). Ova aglutinacija je reverzibilna na 37°C, tako da kada se krv zagrije na tjelesnu temperaturu, problemi tokom istraživanja se eliminišu.